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商陆皂苷甲对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎的治疗作用
目的:探讨商陆皂苷甲(EsA)对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎的治疗作用.方法:制备大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型,随机分为EsA治疗组、地塞米松治疗组、未治疗组(模型组).另设正常对照组.隔日测定24 h尿蛋白定量.所有大鼠第8天处死,取肾脏组织,显微镜观察肾组织系膜增生程度,利用图像分析系统对系膜区占据肾小球面积进行分析.结果:EsA治疗组及地塞米松治疗组3、5、7天24 h尿蛋白与模型组相应时间点比较均明显下降(P＜0.01～0.001);EsA治疗组及地塞米松治疗组肾小球系膜细胞及基质增生程度较模型组明显减轻(P＜0.05).结论:EsA对大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎具有降低尿蛋白、抑制肾小球系膜细胞及系膜基质的增生的作用.
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单克隆抗体OX7的制备及大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型的建立
目的:制备单克隆抗体OX7(monoclonal antibody OX7,mAb OX7)对建立大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型.方法:弗氏不完全佐剂预免疫Balb/c小鼠,腹腔注射OX7细胞,Protein A亲和层析法纯化腹水.用SDS-PAGE鉴定纯化后抗体的纯度.将所得抗体尾静脉注射Wistar大鼠,PAS染色观察正常对照组注射前及注射后第3天、第7天大鼠肾脏病理组织学改变.结果:SDS-PAGE电泳显示,纯化的抗体有IgG的轻链和重链两条带,无其他杂带,抗体浓度为2.06 mg/ml.PAS染色显示正常对照组肾小球结构正常,毛细血管袢开放良好;模型组第3天开始出现大量系膜细胞破坏,系膜基质溶解,肾小球毛细血管扩张;第7天系膜细胞重度增生.结论:通过将OX7细胞注入小鼠腹腔并用ProteinA亲和层析法纯化腹水,可成功制备高效价、高纯度及特异性强的mAb OX7,该抗体可成功建立抗Thy1系膜增生性肾炎动物模型.
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大鼠抗Thy1系膜增生性肾小球肾炎模型发病机制探讨
目的探讨大鼠抗Thy1系膜增生性肾炎模型发病机制.方法制备兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清(ATS),再将ATS经尾静脉注射给模型组Wistar大鼠,诱导其发生系膜增生性肾炎(MsPGN);另设正常对照组,静脉注射生理盐水.隔天测定24 h尿蛋白定量,放免法测定血清细胞因子含量,显微镜观察肾脏系膜组织增殖程度,BI2000图像分析系统对肾小球系膜区进行分析.分别于注射ATS后 1、3、5及7 d各时间点处死模型组大鼠6只.结果模型组与对照组比较,尿量、饮水量变化无显著性差异(P＞0.05);模型组1、3、5及7 d尿蛋白定量与对照组相应时间点比较均明显升高(P＜0.001～0.005);各时间点大鼠血清IL-1、IL-6及TNF含量均高于对照组(P＜0.001～0.005);模型组肾小球系膜细胞及基质明显增生.结论细胞因子可能在鼠抗Thy1肾炎模型的发病中起重要作用.
