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真核表达载体pcDNA 3.1文献资料
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HOGG1特异性锤头状核酶真核表达载体的构建及鉴定
目的设计并合成人8-羟基鸟嘌呤-DNA糖苷酶(HOGG1)特异性的锤头状核酶(hammerhead ribozyme)基因并构建其真核表达载体.鉴定含有核酶靶基因HOGG1 cDNA保守序列的真核表达载体.方法运用计算机软件人工设计并合成核酶基因(RZ),将核酶基因克隆到真核表达载体pcDNA 3.1中,重组子由BamH I和EcoR I酶切,琼脂糖凝胶电泳鉴定及DNA测序证实.含有HOGG1基因cDNA保守序列的真核表达载体经BamHI和EcoRI酶切电泳鉴定.结果RZ人工合成后与pcDNA 3.1连接,酶切电泳及DNA测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入pcDNA 3.1的BamH I和EcoR I位点之间,命名为pcDNA 3.1-RZ.1.3kb的HOGG1基因cDNA保守序列准确克隆于pcDNA 3.1的BamH I和EcoR I酶切位点之间,命名为pcDNA 3.1-HOGG1.结论成功合成HOGG1特异性的锤头状核酶基因并构建了该基因的真核表达载体,以及核酶靶基因的真核表达载体.
关键词： HOGG1 锤头状核酶 真核表达载体pcDNA 3.1
