欢迎来到360期刊网!
学术期刊
  • 学术期刊
  • 文献
  • 百科
电话
您当前的位置:

首页 > 论文范文 > 正文

HSP90基因表达情况与妊娠期高血压疾病中发生发展相关性分析及其临床意义

时间:2020-02-20 09:47:00 来源: 浏览:58

  HSP90基因表达情况与妊娠期高血压疾病中发生发展相关性分析及其临床意义

  蒋静,刘登辉,吴晓丽 湖南省妇幼保健院妇产科,湖南长沙410000

  关键词:妊娠期高血压疾病;热休克蛋白90;血清;胎盘组织

  中国图书分类号:R714. 246文献标识码:A文章编号:1001-4411( 2018) 13 -3060 -04:doi:10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411. 2018.13.61

  妊娠期高血压疾病是一种妊娠期特有疾病,其发病率较高,在我国可高达9%,严重威胁孕妇和胎儿的生命健康[1、2]。妊娠期高血压疾病患者的主要表现为高血压、蛋白尿、水肿等,严重时可能会出现抽搐、昏迷,但其具体发病机制目前尚不完全清楚,这也是目前妇产科医师研究的重点和难点[3。4]。热休克蛋白90(HSP90)参与多种信号途径中的激酶、核受体和p53等转录因子活性的调节活动,在细胞的生长发育、分化以及蛋白质合成等生理代谢过程中均发挥着重要作用[5-6],但目前针对HSP90与妊娠期高血压疾病关系的研究报道比较少见。为此,本研究选取本院收治的妊娠期高血压疾病患者作为研究对象,检测血清及脐血HSP90水平和胎盘组织HSP90 mRNA及蛋白表达情况,探讨分析HSP90与妊娠期高血压疾病的关系。

  1 资料与方法

  1.1 资料来源 选取2015年3月- 2016年12月湖南省妇幼保健院收治的妊娠期高血压疾病患者114例,其中妊娠期高血压患者36例,轻度子痫前期患者40例,,重度子痫前期患者38例。纳入标准:①诊断符合第7版《妇产科学》中有关妊娠期高血压疾病的标准;②均为初次分娩;③分娩方式为剖宫产;④患者及家属知情同意并签署同意书。排除标准:不愿提供胎盘组织者。同时选取正常剖宫产产妇40例作为对照组,各组产妇年龄、孕周比较,差异均无统计学意义(均P>O. 05),见表1。

  表1各组产妇一般资料比较(i±s)

表1各组产妇一般资料比较(i±s)

  1.2实验方法

  1.2.1 标本采集所有研究对象均采集空腹静脉血约2 ml,并在剖宫产时抽取脐静脉血约2 ml,自然抗凝后以3 000 r/min离心10 min,取上清液利用酶标仪(德国拜发仪器公司,型号为880)采用酶联免疫吸附法测定血清中HSP90水平,检测试剂盒购自北京中杉金桥生物有限公司,具体检测步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。

  所有研究对象均在剖官产时取胎盘组织,大小为1 cmxl cmxl cm.应避开坏死和钙化区域,立即置入-196℃液氮罐内冷冻保存。

  1.2.2 RT-PCR检测 取部分胎盘组织利用Trzoli提取试剂盒提取总RNA,利用逆转录试剂盒逆转录为DNA,在聚合酶的作用下进行扩增,引物如下:上游5’-ACAGGTGAGACCAAGGACCA-3’,下游5’- GTC-CAGCCATATGTGCTTGT-3’;B- actin上游:5 7一GC-CATGTACGTAGCCATCCA -3 7,下游:5 7- GAACCGCT-CATTGCCGATAG-3 7。扩增条件如下:95℃5 min后以95℃、15 s进行变性、60℃、60 s进行退火、72℃5 min后30 s进行延伸,此为1个循环,共进行40个循环,电泳后得到目的条带的光密度值,然后与空白对照的光密度值进行比较,最终得出HSP90mRNA的表达水平,具体检测步骤严格按照试剂盒说明书进行,计算方法如下:目标化合物mRNA表达水平=目标化合物mRNA灰度值/[3 -actin灰度值。

  1.2.3 Western blot检测取部分胎盘组织制备蛋白样,并取约75 pdg以10010十二烷基硫酸钠(SDS)聚丙烯酰胺凝胶进行电泳,分离后转移至孔径为0.45 pdm的聚偏二氟乙烯( PVDF)膜,置于5%脱脂奶粉中封闭2h;加入一抗后4℃孵育过夜,以0.5% TBS-T溶液洗膜3次后再加入HRP标记的二抗进行反应,以0.5%TBS-T溶液洗膜3次用化学发光法进行显色,并采用软件进行灰度值分析,计算HSP90蛋白与B- actin的灰度比值,计算方法如下:目标蛋白表达水平=目标蛋白灰度值/[3 -actin灰度值。

  1.3统计学分析采用统计学软件SPSS 19.0进行统计分析,计量资料用(x+s)表示,组间比较使用单因素方差分析,两两比较采用LSD检验。相关性采用Spearman秩相关或Pearson相关分析。检验水准仪=0. 05。

  2结果

  2.1 各组外周血及脐血IISP90水平 重度子痫前期组外周血及脐血HSP90分别为(1.67+0. 44) ng/ml和(0. 47 +0. 10) n~ml,明显高于对照组、妊娠期高血压组和轻度子痫前期组(均P<o. p="" 05)。见表2。

  表2各组外周血及脐血HSP90水平(x+s,ng/ml)

表2各组外周血及脐血HSP90水平(x+s,ng/ml)

  注:a.与对照组比较,JD<0 05I}J.与妊娠期高血压组比较,P<0. 05;c.与轻度子痫前期组比较,P<o. p="" 05。

  2.2 各组胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白表达比较各组胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白相对表达比较,差异有统计学意义(_P<0.05),其中重度子痫前期组胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白表达量分别为(1. 408+0. 118)和(1.104 +0. 153),明显高于对照组、妊娠期高血压组和轻度子痫前期组(P<0.05)。见表3和图1。

  表3各组胎盘组织HSP90 mRNA表达比较(i±s)

表3各组胎盘组织HSP90 mRNA表达比较(i±s)

  注:a.与对照组比较,P<0. 05;b'j妊娠期高血压组比较,P<0. 05;c.与轻度子痫前期组比较,P<o. p="" 05。

  2.3相关性分析将患者血清、脐血HSP90水平及胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白表达与疾病严重程度进行Spearman秩相关分析,结果显示血清、脐血HSP90水平及胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白表达与疾病严重程度呈正相关(r。=0. 355、0.273、0.341和0. 339,P<o. p="" 05)。

  注:M:Markcr;1:对照组;2:妊娠期高血JK组;j:轻度子痫前期组;4:重度子痫前期组

图1各组胎盘组织HSP90 mRNA表达

  图1各组胎盘组织HSP90 mRNA表达

  3讨论

  3.1 研究背景妊娠期高血压疾病包括妊娠期高血压、子痫、子痫前期、慢性高m压并发子痫前期以及慢性高血压,我国有报道发病率约为9.4%,国外报道为7%~12%,发病率较高l∽娟。妊娠期高血压疾病患者多表现为高血压、蛋白尿、水肿,轻者无症状或轻度头晕,伴轻度蛋白尿或水肿,血压轻度升高;重者头痛、恶心、呕吐、持续性右上腹痛等,血压升高明显,水肿明显,蛋白尿增多,甚至昏迷、抽搐,严重影响母婴健康。妊娠期高血压疾病是孕产妇和围生儿发病和死亡的主要原因之一,但其具体发病机制目前尚不完全清楚,一般认为与遗传易感性、胎盘缺血、免疫适应不良和氧化应激反应等有关,而研究探讨妊娠期高血压疾病的机制对于疾病的治疗具有重要意义。

  3.2 HSP90与妊娠期高血压疾病的关系分析 热休克蛋白( HSPs)是在哺乳动物中广泛存在的一类热应急蛋白质,当有机体暴露于高温环境时,就会由热激发合成此种蛋白来保护有机体自身”。按照蛋白的大小,热休克蛋白共分为五类,分别为HSP110、HSP90、HSP70、HSP60以及小分子HSPs,大多HSPs均具有分子伴侣活性。HSP90参与多种信号途径中的激酶和核受体家族、p53等转录因子活性的调节,在细胞的生长、发育、分化过程中发挥重要的功能。研究14表明,HSP90可通过与100多种底物蛋白质的相互作用,参与蛋白质合成、折叠运输和分解等过程,并在膜功能、细胞骨架的功能和应激条件下对细胞的保护等起着重要的生物学作用。也有研究。15-表明,HSP90可能与妊娠期高血压疾病的发生和发展有一定的关系,子痫、子痫前期患者的HSP90水平明显高于正常孕妇,与本研究结果基本一致。同时,本研究分析发现,1 14例妊娠期高血压疾病患者的外周血及脐血HSP90水平明显高于对照组,其胎盘组织HSP90 mRNA和蛋白表达量也明显高于对照组,提示妊娠期高血压疾病患者HSP90表达升高,其与疾病的发生有一定关系。本研究推测,妊娠期高血压疾病患者氧化损伤、胎盘缺血缺氧及全身免疫反应可能会增加HSP90的表达,进而导致血液循环和脐带血中HSP90水平升高。

  子痫前期是妊娠期高血压疾病的五种状况之一,子痫前期又可依据患者的严重程度分为轻度子痫前期和重度子痫前期两种。本研究1 14例妊娠期高血压疾病患者中共有38例为重度子痫前期,40例为轻度子痫前期。进一步分析发现,重度子痫前期组外周血及脐血HSP90明显高于对照组、妊娠期高血压组和轻度子痫前期组,而重度子痫前期组胎盘组织HSP90mRNA和蛋白表达量也明显高于对照组、妊娠期高血压组和轻度子痫前期组,提示HSP90与娠期高血压疾病的发展过程也关系密切,随着患者病情的加重,其HSP90表达水平更高,但其具体机制目前尚不清楚。本研究限于研究样本的不足,对于HSP90与妊娠期高血压疾病发生和发展的具体关系仍需作进一步的深入研究。

  综上所述,妊娠期高血压疾病患者中HSP90的表达升高,与疾病的发生发展有一定关系,值得进一步研究。


相关推荐

最新文章

360期刊网

专注医学期刊服务11年

客服正在输入...

  • 我是360期刊网在线指导老师,请问您想咨询什么等级的期刊(省级、国家级、核心、SCI)?我们提供以下服务:

  • 1.学术期刊服务
    2.SCI期刊服务
    3.论文指导服务

  • 现在咨询抢0元论文评估名额

x
立即咨询