DNA结合蛋白A在结直肠癌组织和细胞中的表达及其临床意义
摘要： 目的 研究DNA结合蛋白A(dbpA)基因在结直肠癌组织和细胞中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学方法检测60例结直肠癌患者癌组织及癌旁正常结直肠黏膜组织中dbpA蛋白的表达,采用免疫荧光及反转录PCR法检测结直肠黏膜上皮细胞系FHC、人结直肠腺癌细胞系SW480、RKO、SW620、DLD-1、HT-29、SW1463及患者癌组织、癌旁组织中dbpA mRNA表达,Western blot法检测结直肠癌组织及细胞中蛋白的表达变化.结果 在正常结直肠组织中dbpA蛋白和mRNA无表达或低表达,在结直肠癌组织中dbpA表达明显增高.结直肠癌中dbpA mRNA阳性表达率升高,分别为80.0％(48/60)、10.0％(6/60),dbpA蛋白阳性表达率升高,分别为83.3％(50/60)、10.0％(6/60),差异均有统计学意义(P＜0.01).在FHC细胞中dbpA无表达,在6株结直肠癌细胞中,dbpA不同程度高表达(P＜0.05).dbpA高表达与结直肠癌浸润深度、淋巴结转移、组织学分型及脉管侵犯相关(P＜0.05),dbpA高表达组预后较差(P＜0.05).结论 dbpA的升高可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用,可能是结直肠癌的一个预后指标.
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外阴鳞状细胞癌109例临床分析
目的 分析外阴鳞状细胞癌(简称:鳞癌)的临床资料,探讨外阴鳞癌发病的相关因素.法 回顾性分析109例外阴鳞癌患者的临床资料.结果 外阴鳞癌发病年龄多在50 ～ 69岁,病程多为6～12个月,好发于大阴唇,病灶大小2～4cm,90％以上为高分化鳞癌.按2009年外阴癌FIGO新分期重新划分结果,ⅠB期增多,Ⅱ、Ⅲ期下降.109例患者合并外阴上皮内非瘤样病变99例,白变主要累及大小阴唇,病理类型中外阴硬化性苔藓占60％(59/99).多在病变的10～15年出现癌变.结论 外阴上皮内非瘤样病变与外阴鳞癌关系密切.长时间的病变有发生癌变的风险,定期复查可及早发现癌变.
关键词： 外阴肿瘤 肿瘤 鳞状细胞 外阴上皮内非瘤样病变 -
bcl-2结合抗凋亡基因1及表皮生长因子受体在三阴性乳腺癌中的表达
目的 检测bcl-2结合抗凋亡基因1(BAG-1)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达情况.方法 收集十堰市太和医院2013年10月至2014年8月收治的TNBC患者51例,采用实时定量聚合酶链反应检测TNBC组织及其部分对应癌旁组织中BAG-1 mRNA和EGFR mRNA的表达,分析基因表达与TNBC患者临床病理参数之间的关系.结果 BAG-1 mRNA和EGFR mRNA在TNBC组织中均为高表达状态,相对表达量分别为0.57±0.25、0.61±0.21,其在TNBC组织中的表达水平均高于癌旁组织(0.19±0.12、0.21±0.11),差异均有统计学意义(t值分别为5.12、7.17,均P<0.001).不同临床分期、淋巴结转移TNBC患者的BAG-1 mRNA和EGFR mRNA表达水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),而不同肿瘤直径、年龄的患者两种基因mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 BAG-1 mRNA、EGFR mRNA在TNBC中呈高表达状态,其高表达可能与患者不良预后相关,可作为预测TNBC患者预后的分子指标.
关键词： 乳腺肿瘤 聚合酶链反应 基因表达 bcl-2结合抗凋亡基因1 表皮生长因子受体 -
腮腺混合瘤的超声诊断及其价值
目的:探讨腮腺混合瘤的声像图特征及其临床价值.方法:应用彩色多普勒超声对22例经病理证实的腮腺混合瘤进行观察.结果:实性不均匀12例,实性4例,囊实性5例,囊性1例.彩色多普勒显示:8例表现为0级血流信号,14例表现为Ⅰ级～Ⅲ级血流信号.结论:腮腺混合瘤有显著的声像图特点,彩色多普勒超声有助于提高诊断的正确性.
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表达黑色素瘤相关抗原D4a重组腺病毒的构建及鉴定
目的 构建表达人黑色素瘤相关抗原D4a(MAGE-D4a)基因的重组腺病毒载体并进行鉴定.方法 从胶质瘤细胞系中用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法得到MAGE-D4a基因全长片段,将其导入T载体进行测序,得到准确的序列后再导入腺病毒穿梭质粒中.将穿梭质粒和病毒骨架通过电穿孔导入细菌内进行重组,挑选阳性克隆,提取重组后的质粒,用脂质体法将其在体外转染入HEK293细胞,并在细胞内部包装.扩增收集重组腺病毒Ad-MAGE-D4a,RT-PCR方法检测其体外表达,并用倍比稀释感染法测定腺病毒的滴度.结果 MAGE-D4a基因被导入带有绿色荧光的腺病毒载体中,PCR检测证实其在转染后的HEK293细胞中表达,病毒滴度为2× 108 pfu/ml.结论 成功构建表达人MAGE-D4a基因的重组腺病毒载体,有效转染HEK293细胞并进行基因表达.
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Wnt5a基因在乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及其与E-钙黏蛋白、波形蛋白基因的关系
目的：探讨Wnt5a基因在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达及其与E-钙黏蛋白、波形蛋白基因表达的相关性。方法采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测Wnt5a、E-钙黏蛋白mRNA和波形蛋白mRNA在MCF-7细胞和人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中的表达，分析Wnt5a表达与E-钙黏蛋白mRNA、波形蛋白mRNA的关系。结果 MCF-7细胞中，Wnt5a、E-钙黏蛋白mRNA水平均低于MCF-10A细胞[（16.93±2.97）%比（27.47±2.76）%，（12.97±1.35）%比（20.43±2.60）%，均P＜0.05]，波形蛋白mRNA水平高于MCF-10A细胞[（16.53±0.85）%比（6.33±2.08）%，P＜0.05]。在MCF-7细胞中，Wnt5a与E-钙黏蛋白mRNA的表达呈正相关（r＝0.997，P＜0.05），与波形蛋白mRNA的表达呈负相关（r＝-0.998， P＜0.05）。结论 Wnt5a在人乳腺癌细胞株MCF-7中的表达低于人正常乳腺上皮细胞株MCF-10A，其在乳腺癌的发生与发展中可能发挥抑癌基因的作用。 Wnt5a在乳腺癌细胞中的表达与E-钙黏蛋白mRNA的表达呈正相关，与波形蛋白mRNA的表达呈负相关。 Wnt5a可能通过影响乳腺癌上皮细胞的转化导致乳腺癌的侵袭和转移。
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血清鳞状细胞癌抗原和癌胚抗原联合检测对子宫颈癌的诊断及疗效评价
目的 探讨鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)和癌胚抗原(CEA)联合检测对子宫颈癌的诊断、疗效评估、病情监测及预后分析的意义.方法 收集经病理确诊的子宫颈癌患者424例,妇科良性病患者400例,酶联免疫吸附法检测SCC-Ag和CEA水平,同时收集子宫颈癌患者的盆腔彩色超声检查结果并进行分析.结果 子宫颈癌组血清SCC-Ag、CEA及二者联合检测的阳性率[55.9 ％(237 /424)、26.4％(112/424)、61.8％(262/424)]均高于良性病组[12.0％(48/400)、12.5％(50/400)、14.5％(58/400)](均P＜ 0.05).SCC-Ag和CEA联合检测对子宫颈癌诊断的灵敏度(61.8％)高于CEA、SCC-Ag单项检测(55.9％、26.4％)(均P＜ 0.05).治疗前血清SCC-Ag、CEA水平在不同的临床分期、病理分型、浸润深度及淋巴结是否转移的子宫颈癌患者间的差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).Ⅰ、Ⅱ期子宫颈癌患者SCC-Ag与CEA联合检测的阳性率[45.5％(71/156)、73.2％(139/190)]高于超声检查[33.3％(52/156)、51.1％(97/150)](P＜ 0.05).手术、同步放化疗和手术联合放化疗治疗后SCC-Ag水平(中位数为0.34、0.51、0.33 ng/ ml)低于治疗前(0.48、3.44、1.29 ng/ml),CEA治疗后水平(中位数为0.75、0.81、0.71 ng/ ml)低于治疗前(1.22、1.53、1.50 ng/ ml)(P＜ 0.05).三种方式治疗后,SCC-Ag、CEA水平升高及未降至正常范围的子宫颈癌患者中分别有33.3 ％(6/18)、56.5％(13/23)和46.1％(35/76)复发或转移.SCC-Ag阳性患者的生存率低于阴性患者(P＜0.05),而CEA阳性和阴性患者的生存率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 SCC-Ag和CEA联合检测可作为子宫颈癌辅助诊断的首选标志物.SCC-Ag和CEA联合检测可以作为临床分期、病理分型、浸润深度、淋巴结转移及疗效评价、预后判断的重要指标.对于Ⅰ、Ⅱ期子宫颈癌患者SCC-Ag和CEA联合检测的阳性率高于盆腔超声检查.
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结直肠癌多不饱和脂肪酸代谢与△6脱饱和酶关系的研究
目的 了解结直肠癌患者多不饱和脂肪酸(PUFA)代谢状况,探讨PUFA代谢与△6脱饱和酶(D6D)的关系.方法 检测38例结直肠癌患者血红细胞及61例结直肠癌手术切除标本肿瘤组织PUFA的水平,分析ω-6和ω-3代谢途径各脂肪酸比例、D6D指数及两者关联性.结果 结直肠癌患者血红细胞及组织标本ω-6 PUFA代谢占优势,ω-6/ω-3 PUFA总比例分别为4.89和10.15；亚油酸/亚麻酸(LA/ALA)比值分别为101.92和86.16; ω-6/ω-3 LC-PUFA分别为2.86和4.51.ω-6代谢途径中D6D指数在肿瘤组织(t=11.609,P=0.00)及血红细胞(t=-9.151,P=0.00)中均高于ω-3途径代谢.结论 结直肠癌患者PUFA代谢以ω-6PUFA占优势,ω-6脂肪酸代谢途径较ω-3代谢途径活跃,与结直肠癌的发生、发展有一定的关系,可能为结直肠癌的防治提供一种手段.
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5-氮-2'-脱氧胞苷对肺癌A549/DDP细胞凋亡及hMLH1表达的影响
目的 探讨5-氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对耐顺铂(DDP)的人肺癌A549/DDP细胞凋亡及抑癌基因hMLH1表达的影响.方法 以浓度为0.5、5、50μmol/L的5-Aza-CdR处理A549/DDP细胞,常规培养,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察细胞的生长活性,甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测hMLH1基因甲基化状态,以实时荧光定量PCR法检测hMLH1 mRNA的表达,应用流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 5-Aza-CdR能明显抑制肿瘤细胞的生长,随5-Aza-CdR浓度增加、培养时间延长,细胞生长抑制率升高(P＜0.05).细胞凋亡率与5-Aza-CdR剂量呈正相关(P＜ 0.001).5-Aza-CdR处理后hMLH1mRNA表达升高(P＜0.05).A549/DDP细胞hMLH1启动子甲基化阳性,其mRNA为阴性,应用5-Aza-CdR干预培养后,mRNA为阳性.结论 5-Aza-CdR能使hMLH1基因去甲基化,促进细胞凋亡,增强抑癌功能.
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血清总前列腺特异性抗原表达的随龄变化及其在前列腺癌鉴别诊断中的意义
目的：探讨血清总前列腺特异性抗原（TPSA）随年龄的变化及其在前列腺癌（PCa）与前列腺增生（BPH）鉴别诊断中的意义。方法采用电化学发光法检测146例PCa、108例BPH及210名健康体检者的TPSA及游离前列腺特异性抗原（FPSA）。结果年龄与血清TPSA水平呈正相关（r＝0.265，P＜0.01）。 PCa与BPH组的TPSA水平分别为（85.40±56.70）μg／L、（7.90±7.00）μg／L，差异有统计学意义（t＝8.310，P＝0.001）；FPSA水平分别为（5.16±4.90）μg／L、（1.50±1.36）μg／L，差异有统计学意义（t＝3.152，P＝0.030）。对于TPSA水平在4.0～20.0μg／L范围“诊断灰区”的患者，PCa和BPH组的TPSA水平分别为（8.82±4.01）μg／L、（8.41±3.95）μg／L，差异无统计学意义（t＝0.198， P＝0.256）；FPSA 水平分别为（1.18±0.91）μg／L、（2.32±1.20）μg／L，FPSA／TPSA 比值分别为0.12±0.08、0.24±0.23，两组差异均有统计学意义（t＝23.56，P＝0.020；t＝32.45，P＝0.006）。以FPSA／TPSA比值等于0.16为诊断阈值时，对PCa诊断的敏感度和特异度分别为84.4%和79.8%。结论血清TPSA水平随年龄而变化，应以各年龄段的95%位数作为医学决定水平，以提高其诊断PCa的特异性和准确性。对于TPSA水平处于“诊断灰区”的患者， FPSA／TPSA比值对PCa与BPH的鉴别诊断有较大临床价值。
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微波消融联合131Ⅰ肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体注射液治疗对肺癌患者免疫功能的影响
目的 探讨微波消融治疗、131Ⅰ肿瘤细胞核人鼠嵌合单克隆抗体注射液(131Ⅰ-chTNT)放射免疫治疗及二者联合治疗对肺癌患者免疫功能的影响及其抗肿瘤机制.方法 将50例肺癌患者采用数字表法随机分为三组:单纯微波消融治疗组17例、单纯131Ⅰ-chTNT放射免疫治疗组15例、微波消融联合131Ⅰ-chTNT放射免疫治疗组18例,检测所有患者接受治疗前后T淋巴细胞亚群、NK细胞活性和白细胞介素(IL)-2、IL-10、IL-12表达、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化.结果 三组患者治疗后的CD4+值、CD4+/CD8+值、NK细胞活性均高于治疗前(P＜0.05),且联合治疗组与两个单纯治疗组比较差异有统计学意义(P＜0.01).三组患者治疗后的IL-2、IL-12、IFN-γ、TNF-α水平与治疗前比较,升高有统计学意义(P＜0.05),但组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 微波消融联合131Ⅰ-chTNT放射免疫治疗具有提高免疫功能的作用,能大程度地提高肺癌综合治疗疗效.
