超抗原SEA和SEB对正常人TCRVβ基因的限制性取用
摘要: 金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)作为一种超抗原,以MHC非限制性及TCR Vβ特异性的方式激活T细胞.本文用定量PCR方法,分析SEA和SEB刺激的正常人外周血淋巴细胞T细胞抗原受体Vβ的取用格局.揭示在不同HLA遗传背景下,SEA刺激的淋巴细胞均选择性地取用Vβ3和Vβ6两种基因片段,而SEB刺激的淋巴细胞则优势表达Vβ2、Vβ8和Vβ9.通过比较分析,Sigma产的SEB刺激淋巴细胞后则优势表达Vβ3、Vβ4、Vβ16和Vβ20,提示外周血淋巴细胞在超抗原作用下发生寡克隆扩增.
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内蒙古地区汉族支气管哮喘与ADAM33基因多态性的关系
为研究内蒙古地区汉族人群ADAM33基因T1、T2、V4、S2位点不同基因型及等位基因频率的分布并探讨ADAM33基因多态性与支气管哮喘的关系,选用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术对汉族哮喘患者178例进行ADAM33基因多态性的检测,与195例健康汉族(对照组)进行比较,筛选有意义的基因,同时根据病情严重程度将哮喘组分为轻、中、重度组,比较不同程度组基因型分布差异.结果显示内蒙古地区汉族人群均可检出T1、T2、V4、S2位点的3种基因型,T2、V4位点基因型及等位基因的两组比较差异无统计学意义,而T1、S2位点基因型及等位基因的两组比较差异有统计学意义,各位点基因型在轻、中、重度组分布频率差异无统计学意义.由此证明ADAM33基因T1、S2位点多态性在中国内蒙古地区汉族哮喘人群中可能发挥作用,而V4、T2位点多态性可能与内蒙古地区汉族人群哮喘无关;各位点基因多态性可能与汉族哮喘严重程度无关.
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活化素A在原发性干燥综合征患者中的表达分析研究
本研究旨在初步探讨活化素A在原发性干燥综合征(primary Sj(o)gren's syndrome,pSS)患者唇腺组织及外周血中的表达情况.选择上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔黏膜科收治的60例pSS患者和30例对照者作为研究对象,采用ELISA检测血清活化素A的表达情况;采用实时荧光定量PCR分析PBMC中活化素A及相关受体mRNA的表达情况;采用免疫组织化学染色法分析唇腺组织样本中活化素A的表达情况.结果显示pSS患者血清及唇腺组织中活化素A的水平明显高于对照者(P<0.05);pSS患者PBMC活化素A βA亚基mRNA表达水平显著升高(P<0.01),但活化素Ⅰ型受体(activin receptorⅠ,ACVR Ⅰ)A和活化素Ⅱ型受体(activin receptor Ⅱ,ACVR Ⅱ)A的mRNA表达水平明显低于对照者(P<0.05),而A CVRⅠB、ACVRⅡB及其信号通路相关分子Smad2和Smad3的mRNA表达水平与对照者差异无统计学意义(P>0.05).研究结果表明活化素A在pSS患者组织和外周血中表达异常,可能参与了pSS的发生、发展.
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HCV核心抗原的化学发光法检测在丙型肝炎诊断中的应用研究
应用化学发光法(chemiluminescent immunoassay,CLIA)检测来自住院及门诊220例样本的HCV-cAg、HCV-Ab,并对其进行HCV-RNA定量分析,以了解HCV-cAg在HCV诊断中的应用价值.结果表明,第一组75例高危人群筛查样本中HCV-Ab有15例阳性(20%),HCV-cAg 6例阳性(8.0%),HCV-RNA 7例阳性(9.3%).第二组70例确诊组样本中HCV-Ab 66例阳性(94.3%)、HCV-cAg 62例阳性(88.6%)、HCV-RNA 60例阳性(85.7%).第三组75例健康人群的筛查样本中HCV-Ab 5例阳性(6.7%)、HCV-cAg 2例阳性(2.7%)、HCV-RNA无阳性病例.HCV-Ab和HCV-cAg联合检测阳性率与HCV-RNA比较差异有统计学意义(P<0.05).在筛查HCV感染时,CLIA法检测HCV-cAg的检出时间早于HCV-Ab,HCV-cAg与HCV-Ab联合检测对术前患者HCV筛查更具有临床价值.
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高脂饮食减弱胶原诱导性关节炎小鼠体液免疫应答的初步研究
探讨高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导肥胖对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠体液免疫应答的影响及机制.通过给予C57BL/6小鼠喂饲高脂肪成分饲料(40%)构建小鼠肥胖模型,在此基础上构建小鼠CIA模型.通过临床积分、病理组织染色评估CIA小鼠疾病活动度;应用microCT分析骨质骨量情况;ELISA检测血清炎性因子和免疫球蛋白水平;流式细胞术分析T、B淋巴细胞亚群.进一步采用腹腔注射T细胞依赖性抗原4-羟基-3-硝基苯基乙酰基(NP)嵌合的钥孔嘁血蓝素(NP-KLH)及非T细胞依赖性抗原NP-Ficoll来评估HFD小鼠对抗原的免疫应答能力.结果显示,短期HFD促进CIA小鼠体质量增加,血清中瘦素和IL-6升高,并显著降低CIA小鼠关节炎的发病率,减轻关节滑膜区炎性细胞浸润程度和关节、胫骨的骨质破坏.HFD显著下调CIA小鼠的血清免疫球蛋白(IgG1、IgG2b和IgG3)和B细胞亚群(B220+ IgM+ IgD-和B220+ CD5+ CD11 b+B细胞)的产生.此外,HFD显著减弱了小鼠对免疫原的应答,特别是对T细胞依赖性抗原及免疫球蛋白的产生能力.因此短期HFD可通过降低B细胞的数量、减弱机体对抗原的免疫应答能力而降低CIA的发生和发展.由此饮食可能是调控慢性炎症状态和体液免疫应答的重要影响因素.
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急性期带状疱疹和带状疱疹后遗神经痛患者T细胞亚群表达的差异
探讨急性期带状疱疹(herpes zoster,HZ)及带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)患者外周血T细胞亚群水平是否存在差异,采用流式细胞术检测研究对象(急性期HZ 46例、PHN 15例、健康对照18例)外周血中CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD8+ CD28+T、CD8+ CD28-T细胞水平并进行比较分析.结果显示,急性期HZ组CD4+T细胞水平明显低于健康对照组(P<0.05);PHN组CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD8+ CD28+T细胞水平较健康对照组均显著下降(P<0.05);与急性期HZ组相比,PHN组CD3+T、CD8+T、CD8+ CD28+T细胞水平均明显降低(P<0.05).60岁以上的HZ患者CD8+ CD28+ CTL水平较60岁以下患者明显降低(P<0.05).躯干发病HZ患者组CD8+ CD28+ CTL水平较面部发病者显著下降(P<0.05).以上结果提示急性期HZ和PHN患者都存在不同程度的T细胞亚群水平下降,以PHN患者尤为显著;CD8+ CD28+ CTL水平下降与PHN的发生、HZ患者发病年龄及发病部位可能有一定的联系.
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布地奈德联合西替利嗪对哮喘轻中度发作患儿外周血TLR4及STAT1表达的影响
探究布地奈德联合西替利嗪对哮喘轻中度患儿的疗效以及对外周血TLR4、信号转导因子和激活因子1(signal transducer and activator of transcription 1,STAT1)表达和炎性因子的影响.以2014年1月至2016年12月在我院接受治疗的116例轻中度急性哮喘患儿作为本次研究对象,随机分为对照组和观察组,每组58例.对照组进行布地奈德雾化治疗,观察组在此基础上口服西替利嗪.比较两组患儿治疗前后的肺功能、临床疗效、血清IL-6、IL-8和TNF-α水平,检测外周血TLR4、STAT1 mRNA的表达水平,观察治疗期间不良反应.观察组总有效率为94.83%,显著高于对照组81.03%(P<0.05).治疗后,两组患儿的FEV1%、PEF%、FVC%显著提高,并且观察组显著高于对照组(P<0.05).两组患儿血清IL-6、IL-8和TNF-α水平、外周血TLR4、STA T1 mRNA表达均显著下降,且观察组均显著低于对照组(P<0.05).两组均未发生明显不良反应.由此布地奈德联合西替利嗪能有效改善轻中度哮喘患儿的肺功能,缓解临床症状,下调TLR4、STAT1 mRNA表达,降低血清IL-6、IL-8和TNF-α释放,安全有效,具有较高的临床应用价值.
关键词: 西替利嗪 布地奈德 儿童哮喘 TLR4 信号转导因子和激活因子1 -
金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF通过激活固有免疫增强小鼠抵抗金黄色葡萄球菌感染
Cathelicidin抗菌肽系多物种保守的具有天然广谱抗微生物活性的小分子多肽.本研究旨在探究金环蛇抗菌肽cathelicidin-BF是否可以激活宿主抗金黄色葡萄球菌感染免疫.在金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)感染前24、8和4h给C57BL/6小鼠腹腔注射抗菌肽cathelicidin-BF(10 mg/kg),或等体积PBS为对照,0h经腹腔注射S.aureus或耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA),18 h后计数小鼠腹水菌落形成单位(colony forming unit,CFU).实验发现抗菌肽cathelicidin-BF注射组小鼠腹水细菌CFU显著低于对照组,表明预注射cathelicidin-BF能显著增强小鼠抗S.aureus感染.为明确抗菌肽是否通过调节小鼠固有免疫应答而达到抗菌效果,流式分析注射抗菌肽后小鼠腹水中各免疫细胞亚群发现:cathelicidin-BF显著促进了单核/巨噬细胞和中性粒细胞在腹腔的富集.进一步分析发现,抗菌肽在体内可促进小鼠腹腔中单核细胞及中性粒细胞趋化因子CCL2、CXCL1、CXCL2表达;体外则以剂量依赖方式促进小鼠巨噬细胞分泌趋化因子.Cathelicidin-BF还能激活小鼠腹腔巨噬细胞MAPK和NF-κB信号通路.以上结果表明,抗菌肽cathelicidin-BF可通过增强小鼠巨噬细胞/中性粒细胞固有免疫加强小鼠抗S.aureus感染.
关键词: 抗菌肽 cathelicidin-BF 金黄色葡萄球菌 固有免疫 -
PBMC组蛋白乙酰化在强直性脊柱炎中的作用
为研究强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者PBMC组蛋白乙酰化水平,探究其在AS发病中的作用,收集32例AS稳定组患者、26例AS活动组患者和25例正常对照者的静脉血,采用H3/H4乙酰化检测试剂盒检测PBMC组蛋白H3、H4乙酰化水平,RT-PCR检测AS患者PBMC组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyltransferase,HAT)和去乙酰基转移酶(histone deacetylase,HDAC)基因的mRNA表达水平.与正常对照组比较,AS活动组和AS稳定组患者PBMC组蛋白H3、H4均呈低乙酰化水平(P<0.05);AS活动组和AS稳定组患者PBMC的P300、CREBBP和HDAC2mRNA表达水平均明显降低(P<0.05).AS患者PBMC组蛋白H3、H4乙酰化水平与AS疾病活动度指数(ASDAS)呈正相关(P<0.05).AS患者PBMC组蛋白乙酰化异常,且与AS的发生、发展有一定相关性.
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IL-23及其受体与类风湿关节炎疾病活动的相关性分析
为探讨血清IL-23水平与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病情活动相关性及对患者外周血NK细胞功能的影响,选取本院2015年2月至2016年4月收治的RA患者80例作为观察组,选择健康者80例作为对照组,对两组入选者行血清IL-23、外周血NK细胞及相关指标检测,回顾性分析检测结果显示观察组患者IL-23显著高于对照组(t=87.217,P<0.05);观察组IL-23R在NK细胞的表达率为(1.23±0.28)%,显著低于对照组的(4.53±1.07)%(t=21.097,P<0.05);稳定与轻度、中度、重度活动组以及X线分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组患者IL-23水平均呈递增趋势,且两两对比差异显著(P<0.05);观察组患者IL-23水平与RF、ESR、CCP、CRP、DAS28评分均表现为显著正相关(P<0.05),由此IL-23水平与RA病情进展密切相关.
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Tfh及IL-2与IL-17在老年2型糖尿病患者外周血中的变化及其临床意义
探讨老年2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,Tfh)、CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞的数量变化以及IL-2和IL-17等细胞因子含量差异并与患者血糖水平做相关性分析.采用流式细胞仪检测100例老年T2DM患者外周血CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞水平并与150例老年非糖尿病患者进行比较.分析淋巴细胞亚群与患者空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、餐后2h血糖(2 hour plasma glucose,2 h PG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA1C)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment-insulin resistance, HOMA-IR)及胰岛β细胞功能指数(homeostasis model assessment beta, HOMA-β)之间的相关性;采用ELISA方法检测外周血IL-2和IL-17水平.老年T2DM患者外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD4+T细胞/CD8+T细胞的比值以及NK细胞均低于健康对照组,并与血糖呈负相关.老年T2DM患者外周血Tfh、CD8+T细胞以及IL-17水平均高于健康对照组.老年T2DM的发病机制可能是随着年龄增高与长期高血糖导致免疫功能异常,外周血CD4+T细胞/CD8+T细胞水平下降以及Tfh和IL-17水平增高进一步加剧了细胞和体液免疫调节紊乱,致使胰岛细胞不断被破坏.