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大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤中P2X受体表达特征的研究
目的：采用实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术，研究P2X受体在大鼠神经胶质瘤和嗜铬细胞瘤及原代培养皮层神经元和星形胶质细胞上的表达差异。方法：取新生1~2 d SD大鼠大脑皮层，分离纯化神经元和星形胶质细胞，并采用实时荧光定量PCR技术，比较P2X受体在大鼠胶质瘤C6细胞、大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC-12细胞、星形胶质细胞和皮层神经元上的表达差异。结果：C6细胞P2X2、P2X3和P2X5表达水平显著高于星形胶质细胞，P2X4、P2X6和P2X7表达水平显著低于星形胶质细胞，PC-12细胞P2X1、P2X2、P2X3和P2X6表达水平显著高于皮层神经元，P2X5和P2X7表达水平则显著低于皮层神经元。此外，还发现P2X2、P2X5和P2X6在C6和PC-12细胞上的表达水平存在显著差异。结论：大鼠胶质瘤和嗜铬细胞瘤细胞表达多种P2X受体，且与原代培养细胞存在表达差异，提示核苷酸介导的信号传递系统可能作为潜在的肿瘤治疗靶点。
关键词： P2X受体 大鼠皮层神经元 星形胶质细胞 大鼠胶质瘤 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 -
骨髓基质干细胞移植对大鼠胶质瘤局部微环境的影响
目的:探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)移植对脑胶质瘤模型大鼠(荷瘤大鼠)胶质瘤的影响.方法:观察BMSCs培养上清液对C6胶质瘤细胞增殖活性、细胞周期的影响.观察脑内移植BMSCs对胶质瘤核增殖抗原(PCNA)表达阳性率、脑内胶质瘤微血管计数的影响及荷瘤鼠生存期的改变.结果:BMSCs培养上清液对胶质瘤细胞增殖没有明显的影响;BMSCs可抑制肿瘤边缘及卫星灶的肿瘤增殖,对肿瘤内部的细胞增殖没有明显影响.移植BMSCs后肿瘤边缘及卫星灶的微血管计数未见明显改变.移植BMSCs后的荷瘤大鼠脑内胶质瘤水肿有所减轻.结论:BMSCs移植可轻度抑制荷瘤鼠脑内胶质瘤细胞的增殖.
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乌骨藤粗提物对大鼠胶质瘤C6细胞的体外实验研究
目的 观察乌骨藤粗提取物(MTE)不同组分对大鼠C6胶质瘤细胞增殖情况的影响,探讨其作用机制.方法 采用新型四氮唑盐法(MTS)检测MTE的Fr1、Fr2、Fr3组分对C6细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测Fr2对C6细胞凋亡和周期的影响;采用荧光定量PCR(qPCR)技术检测不同浓度Fr2对C6细胞的Bax、Bcl-2表达的影响.结果 MTE的Fr1、Fr2、Fr3均能显著抑制C6细胞的增殖(JP＜0.05),与阳性对照组5-氟尿嘧啶(5-FU)相比抑制率也较高(P＜0.05),其半数抑制浓度分别为:60.32、52.30、83.83 μ g/ml.经80、160 u g/ml的Fr2处理24 h后,可有效促进C6细胞早期和晚期凋亡(P＜0.05),其周期被阻滞在G2期;Fr2相同方式处理后,C6细胞中Bax表达水平分别提高到(124.80±7.68)％和(380.30±6 91)％;Bcl-2表达水平分别降低到(84.20±3.10)％和(34.20±4.80)％(P＜0.05).结论 MTE能够显著抑制C6胶质瘤细胞的增殖,其中主要有效成分Fr2能够诱导C6细胞发生G2期周期阻滞,并通过影响Bax和Bcl-2的表达,促进其凋亡.
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大鼠C6脑胶质瘤生长规律的MRI与病理学观察
目的 建立稳定可靠的大鼠C6脑神经胶质瘤模型,并运用1.5 T MRI观察脑胶质瘤瘤体生长的变化规律,为进行脑胶质瘤的在体实验研究提供基础.方法 C6胶质瘤细胞培养后,采用立体定向仪尾状核种植C6胶质瘤细胞,建立C6脑胶质瘤大鼠模型50只,分为4组,分别于第7 d(n=10),第14 d(n=10),第21 d(n=10)处死,后1组自然死亡(n=20)用于生存分析.用1.5 T MRI作扫描成像动态观察接种后第7、14、21 d时肿瘤的MRI瘤体生长变化,并于MRI检查后立即处死各组大鼠将大体病理结果 同MRI瘤体积进行比较.结果 本研究应用立体定向尾状核接种C6胶质瘤细胞,所有接种大鼠均有胶质瘤生长(100%),免疫组化GFAP染色阳性,肿瘤在14～21 d生长迅速,25 d后大鼠开始出现死亡.1.5 T MRI能够较好地显示大鼠大脑正常组织及结构、瘤体和瘤周水肿区.MRI测量瘤体和大体病理结果 相近.结论 采用立体定向法向大鼠尾状核接种C6神经胶质瘤细胞成功率达100%;1.5 T MRI能够较好地反映大鼠脑胶质瘤生长的变化,为脑胶质瘤的在体实验研究提供基础;于第14～21 d之间行相关医学干预是合适时机.
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立体定向建立大鼠C6脑胶质瘤模型
我们采取不同细胞数C6单细胞悬液建立模型,探讨各种接种细胞数量的优劣.一、材料和方法1.材料:雄性Wistar大鼠65只,体重200～250g;大鼠胶质瘤C6细胞系由华中科技大学附属协和医院杨林博士后惠赠.苏木素-伊红(HE)染色试剂、兔抗人C-erbB1蛋白多克隆抗体和S-100B蛋白多克隆抗体及SABC试剂盒购于武汉博士德公司.
