miR-506对肝癌细胞恶性表型的影响

目的：探讨微RNA-506（microRNA-506，miR-506）对肝癌细胞活性、增殖和侵袭等恶性表型的调控作用。方法以肝癌细胞系HepG2和QGY-7703为模型，依处理方式不同分别分为细胞常规培养（细胞对照）组、pcD?NA3空载体对照组、转染pcDNA3/pri-506过表达miR-506（过表达miR-506）组、pSIH1空载体对照组及转染pSIH1/TuD-506抑制miR-506（抑制miR-506）组。实时定量逆转录PCR检测细胞内miR-506的表达水平。分别用CCK-8实验、体外集落形成实验和Transwell侵袭实验检测各组细胞的活性、集落形成能力和侵袭能力。结果在肝癌细胞系HepG2和QGY-7703中，与对应的空载体对照组相比，过表达miR-506组的细胞内miR-506表达水平升高，而抑制miR-506组的细胞内miR-506表达水平降低（P＜0.05）；过表达miR-506组细胞活性降低且形成集落的数量和穿过Transwell微孔的细胞数量均减少，而抑制miR-506组细胞活性升高且形成集落的数量和穿过Transwell微孔的细胞数量均明显增加（P＜0.05）。与细胞对照组相比，pcDNA3空载体对照组和pSIH1空载体对照组均不影响以上各指标（P＞0.05）。结论 miR-506抑制肝癌细胞的活性、集落形成能力和侵袭能力等恶性表型，在肝癌细胞中发挥抑癌基因的作用。

miR-506对胃癌细胞增殖和转移的影响

目的 探讨miR-506对胃癌细胞增殖和转移的抑制作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测5株胃癌细胞系(MKN-45、SGC-7901、BGC-823、NCI-N87和AGS)中miR-506的表达量,以永生化的正常胃黏膜上皮细胞GES-1为对照.通过脂质体转染的方法在SGC-7901细胞系中瞬时转染miR-506和anti-miR-506上调和下调miR-506表达,通过CCK-8实验观察细胞增殖能力改变,通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验观察细胞运动迁移和侵袭能力的变化.结果 miR-506在各胃癌细胞中的表达量相对于正常胃黏膜上皮细胞GES-1显著降低(P＜0.05).过表达miR-506可显著抑制SGC-7901细胞的增殖、迁移和侵袭能力,与阴性对照的差异有统计学意义(P＜0.01).抑制miR-506表达则可促进增殖、迁移和侵袭能力(P＜0.01).结论 胃癌细胞系中miR-506明显降低,上调miR-506可以抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,下调则逆转上述过程.

miR-506通过靶向Slug调节上皮间充质转化对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用

目的 探讨miR-506通过靶向Slug调节上皮间充质转化对乳腺癌细胞侵袭和转移的抑制作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测8株乳腺癌细胞系(MCF7、BT474、SK-BR-3、MDA-MB-453、MDA-MB-468、HCC1937、BT549和MDA -MB -231)中miR-506的表达量,以正常乳腺上皮细胞MCF10A为对照.通过脂质体转染的方法在MDA-MB-231和BT549细胞系中瞬时过表达miR-606模拟物(设阴性对照),通过划痕实验、Transwell迁移和侵袭实验观察细胞运动能力的变化；观察MDA-MB-231和BT549细胞系转染miR-506前后细胞形态学变化；Western blotting法检测E-cadherin、Vimemin和Slug蛋白表达的变化.荧光素酶报告基因分析实验检测M DA-MB-231细胞中miR-506过表达对野生型荧光素酶活性的影响.结果 miR-506在各乳腺癌细胞中的表达量相对于正常乳腺上皮细胞MCF10A显著降低(P＜0.01).miR-506过表达显著抑制MDA-MB-231和BT549细胞的迁移和侵袭能力,与阴性对照的差异有统计学意义(P＜0.01).MDA-MB-231和BT549细胞瞬时转染miR-506 48 h后发生明显的形态学改变；Western blotting结果显示miR-506过表达在MDA-MB-231和BT549细胞中均上调E-cadherin的表达,下调Vimentin的表达.Western blotting检测结果显示MDA-MB-231细胞转染miR-506后Slug蛋白水平明显低于阴性对照；荧光素酶报告基因分析结果显示miR-506过表达显著抑制野生型荧光素酶的活性.结论 在乳腺癌中,miR-506可以通过靶向转录因子Slug诱导细胞发生上皮间充质转化,进而抑制细胞的侵袭和转移能力,这是miR-506参与乳腺癌发生和发展的可能途径之一.

miR-506在乳腺肿瘤细胞增殖及转移中的作用

目的 分析miR-506与乳腺癌增殖转移的关系.方法 miR-506 minics/inhibitor/NC瞬转入MDA-MB-231乳腺癌细胞后进行CCK-8细胞增殖,细胞计数,集落形成,Transwell小室实验及Real-Time PCR.结果 miR-506相关核苷酸(mimics、inhibitor、NC)瞬转入细胞后第1天miR-506 inhibitor即显现出促进细胞增殖的效应,第3天后miR-506mimics开始出现明显的细胞增殖抑制效应；集落形成实验中miR-506 mimics组细胞所形成的集落数量明显少于miR-506 inhibitor组和NC组；Transwell小室实验显示三种miR-506 mimics所转染细胞的穿过膜的数量少于miR-506 inhibitor组和NC组.Real-Time PCR显示,与miR-506 inhibitor组相比,miR-506 mimics组p65、MMP2基因表达增高,而RASSF1基因降低.结论 miR-506过表达可以明显的抑制细胞的增殖能力,单克隆集落形成能力和侵袭转移能力,即miR-506高表达可以抑制乳腺癌细胞的恶性表型.这种作用可能与p65、MMP2及RASSF1表达有关.

常见恶性肿瘤发生发展过程中miR-506作用机制研究进展

随着医学科研水平的提高,miRNA逐渐被人们所熟知.其中,miR-506与恶性肿瘤之间的关系成为近些年来研究的热门话题,在大多数恶性肿瘤中,miR-506发挥了抑癌作用,是一项重要的抑癌因素,而在其它一些恶性肿瘤如黑色素瘤中,miR-506极有可能是一种致癌因素.本文对miR-506在几种常见恶性肿瘤中的不同作用进行总结论述,旨在为特定肿瘤治疗拟定作用靶点提供参考.

Metastasis is the main cause of cancer mortality. One of the initiating events of cancer metastasis of epithelial tumors is epithelial-to-mesenchymal transition (EMT), during which cells dedifferentiate from a relatively rigid cell structure/morphology to a flexible and changeable structure/morphology often associated with mesenchymal cells. The presence of EMT in human epithelial tumors is reflected by the increased expression of genes and levels of proteins that are preferentialy present in mesenchymal cels. The combined presence of these genes forms the basis of mesenchymal gene signatures, which are the foundation for classifying a mesenchymal subtype of tumors. Indeed, tumor classification schemes that use clustering analysis of large genomic characterizations, like The Cancer Genome Atlas (TCGA), have defined mesenchymal subtype in a number of cancer types, such as high-grade serous ovarian cancer and glioblastoma. However, recent analyses have shown that gene expression-based classifications of mesenchymal subtypes often do not associate with poor survival. This“paradox” can be ameliorated using integrated analysis that combines multiple data types. We recently found that integrating mRNA and microRNA (miRNA) data revealed an integrated mesenchymal subtype that is consistently associated with poor survival in multiple cohorts of patients with serous ovarian cancer. This network consists of 8 major miRNAs and 214 mRNAs. Among the 8 miRNAs, 4 are known to be regulators of EMT. This review provides a summary of these 8 miRNAs, which were associated with the integrated mesenchymal subtype of serous ovarian cancer.