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乙型肝炎病毒C基因启动子变异检测方法的建立
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(BCP)变异的限制性片断长度多态性(RFLP)检测方法,更好地了解BCP变异的发生与乙型病毒性肝炎(乙肝)的病情、预后以及治疗的影响.方法 结合引物设计软件Primer Premier 5.0,选定保守区域,设计了2对佳引物,建立了HBV BCP变异检测PCR-RFLP的实验方法.结果 对34例不同乙肝患者进行BCP变异检测发现:肝硬化(LC)组和慢性乙型肝炎(CHB)组中发生变异的例数明显高于无症状感染者(Asl)(χ2值分别为6.39和3.98,P＜0.05).并且HBeAg(-)组发生变异的例数明显高于HBeAg(+)组(χ2=4.60,P＜0.05),结论该方法操作简便、敏感度与特异性高、结果可靠,并可用于较大范围调查该变异株的流行情况,为临床进一步诊断和治疗提供了科学的依据,同时对人们进一步了解HBV BCP变异的发病机制具有重要意义.
关键词： 乙型 肝炎病毒 C基因启动子变异 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析 -
慢性乙型肝炎患者血清HBeAg与病毒含量及BCP变异关系的临床研究
目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清HBeAg与病毒含量及BCP变异的关系.方法:分别用定量聚合酶链反应法(PCR)和酶标法(ELISA),检测207例乙型肝炎病毒慢性感染者血清HBV DNA含量与乙肝病毒血清标记物(HBVM);其中74例乙型肝炎病毒慢性感染者采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,检测BCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764碱基G→A联合突变.结果:HBeAg阳性组与HBeAg阴性组血清HBV DNA含量分别为107.407 0±2.383 0和105.079 7±3.538 9拷贝/ml,两组相比差异有统计学意义(P<0.001).在74例乙型肝炎病毒慢性感染者中检出BCP区T1762A1764突变24例(32.4%), BCP变异在HBeAg阴性病例的发生率为42.9%(18/42),显著高于HBeAg阳性病例18.7%(6/32)(P<0.05).结论:HBeAg阳性是乙型肝炎病毒体内复制的指标;但HBeAg阴性不能认为乙型肝炎病毒复制停止,定量HBV DNA可以真实反映HBV感染、复制的情况.
