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测定水中总铁的含量以吐温20作助溶剂的硫氰酸钾比色法
目的 建立操作简便、重现性好、空白值低的测定水中总铁的方法.方法 采用非离子表面活性剂吐温20(Tween20)作助溶剂对硫氰酸钾比色法做进一步改进.结果 改进后的方法测定水中总铁,与当前广泛使用的二氮杂菲法比较,其结果差异无统计学意义(P>0.05),且铁含量在0~25μg范围内线性关系良好.低检出浓度为0.02 mg/L.回收率在94%~100%之间.变异系数为CV=1.9%.结论 该方法操作简便,试剂空白值低,显色稳定,便于推广应用.
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全自动生化分析仪在检测NADH判定系列的酶类时计算因数的测定
ALT、AST、LDH、CPK等酶类的检测,都是基于NADH在酶类催化的偶联反应中吸光度的下降速率与酶的活性成正比这一原理,即酶的活性U/L=ΔA/min.K.其中计算因数K在以往都是根据文献报道的NADH在340nm波长下的摩尔吸光系数(约6220L/mol.cm)推算出来的.但是我们认为,文献报道的值只是一个粗略值,与实际测定条件有一定差距,所以对于每一台生化分析仪都应当通过实测来确定计算因数.下面以OLYMPUS AU400 型全自动生化分析仪检测ALT为例,介绍计算因数的测算方法.
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褪色光度法测定食盐中碘酸盐碘
本文利用在硫酸介质中,碘酸根氧化酸性络蓝K的褪色反应,建立了光度法测定碘的新方法 .试验证明,在1.44~3.50mol*L-1H2SO4介质中,碘浓度在0~60μg/25ml范围与酸性络蓝K褪色的程度呈线性关系,表现摩尔吸光系数为2.19×104L*mol-1 *cm-1,吸光度至少保持24h不变.
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新银盐法测定食用油中微量砷的方法研究
目前,食用油中砷的测定的方法使用国标(GB/T5009.11-96)有二氨基二硫代甲酸银(简称DDC-Ag法)和砷斑法.后者为半定量法.前者使用的显色吸收液,内含有氯仿或吡啶,毒性大且难闻.检测的灵敏度低,其低的检出限仅为0.2mg/kg.本实验用硝酸-硝酸银-聚乙烯醇(PVA-124)-乙醇作为吸收液显色剂,按国标(GB/T5009.11-96)测砷的分光光度法测定,其方法小检出限为0.05mg/kg.由于这种表面活性剂的胶束增溶的作用,提高了显色的灵敏度,其摩尔吸光系数为8.67×104L/mol*cm.
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中小型生化分析仪的摩尔吸光数偏差及校准方法
连续监则法测定酶活性时,测定结果与被监测物的摩尔吸光系数(ε)有直接关系,因此检查生化分析仪ε的准确与否很有必要.我们参考吴文俊等人通过葡萄糖已糖激酶法来测定NAD(P)H的摩尔吸光系数的方法[1],以检查NAD(P)H为监测物的酶类方法的理论ε准确性,另外我们用4-硝基酚(4-NP)标准液直接测定ε以检验ALP测定的准确性,并比较了高、低定值质控血清在ε校正前的分析结果.
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ALT速率法试剂校正半自动生化分析仪F值
半自动生化分析仪F值的校正,国内学者多利用己糖激酶试剂在反应体系中加入已知摩尔浓度葡萄糖标准液,测被检测物NADH+H+在340nm的摩尔吸光系数来检查仪器在340nm下的理论F值[1].我们在ALT速率法试剂中加入已知摩尔浓度的丙酮酸,通过检测反应平衡后吸光度的变化来校正仪器的F值[1],结果令人满意,现报告如下.
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读点前移设置在西门子 ADVIA2400全自动生化分析仪上的应用
酶类的检测过程中,一般采用速率法,即连续监测法,其原理是连续测定酶反应过程中某一反应产物或底物的浓度随时间变化的多点数据,求出酶反应初速度,间接计算酶活性浓度[1]。在西门子 ADVIA2400全自动生化分析仪中,每一个测试的反应时间为10 min,每隔14 s 读取一次吸光度,在反应曲线中记录为一个点,每个反应过程一共有41个点,而连续监测法中,一般根据读取的第28点到第33点之间的连续吸光度变化,即线性反应区吸光度变化值△A,计算每分钟吸光度的变化值(△A/min),从而算出酶活性浓度 U/L=△A/min×V×106ε×v×L ,式中,V-反应体积(mL)、ε-摩尔吸光系数(cm2· mol-1)、v-样品量(mL)、L-比色杯光径(cm)。
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MD-100型半自动生化分析仪测定参数的选择方法
目的为提高MD-100型半自动生化分析仪测定结果的可靠性及准确性.方法用葡萄糖己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法,反应类型速率法和终点法,对MD-100型半自动生化分析仪测定参数进行选择.结果该仪器在340 nm处的摩尔吸光系数ε=6 331±263,CV=4.15%,与NAD(P)H的摩尔吸光系数6 220相比,相差1.8%.葡萄糖己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法,反应达到平衡的时间分别为300 s和720 s.让7名工作人员每人按终点法测得摩尔吸光系数分别为6 459±322,6 427±501,6 507±377,6165±187,6 070±245,6 212±419,6 329±261;CV分别为4.99%,7.81%,5.81%,3.40%,4.05%,6.76%,4.12%.吸液量分别为400,500,600 μl时排空和不排空状态下的吸光度影响率分别为2.82%,0.94%,0.39%和1.66%,0.41%,0.11%.结论应定期对仪器的摩尔吸光系数进行检查与校正,并对使用终点法测试的项目应对反应达到平衡即延迟时间进行选择,提高该仪器测定结果的可靠性和准确性及仪器测试速度.在保证测试结果准确性的前提下,尽量减少试剂用量,降低试验的成本.测定时应设定为非排空状态.