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C57小鼠 LATl 真核表达载体的构建及其对Neuro-2a 细胞的影响
目的：构建C57小鼠L型氨基酸转运载体1（ LAT1）的真核表达载体，转染Neuro-2a肿瘤细胞进行表达，探讨LAT1对Neuro-2a细胞增殖及凋亡的影响。方法采用RT-PCR扩增出LAT1全长目的基因，定向克隆pcDNA3.1表达载体，构建pcDNA3.1-LAT1重组表达质粒，通过脂质体法将阳性克隆转染Neuro-2a细胞，经G418筛选获得稳定表达株后，用RT-PCR和western blot 蛋白印迹法检测LAT1的表达情况。通过MTT法检测各组Neuro-2a细胞的增殖情况，并借助流式细胞仪检测LAT1对Neuro-2a细胞增殖和凋亡的影响。结果成功构建小鼠pcDNA3.1-LAT1真核表达载体，酶切和测序证实其序列正确，并成功转染Neuro-2a细胞建立稳定转染细胞系。MTT法显示转染重组质粒pcDNA3.1-LAT1的Neuro-2a细胞增殖速度显著高于对照组（P ＜0.05），且流式细胞术检测转染组对Neuro-2a细胞具有促进增殖抑制凋亡的作用。结论转染 pcDNA3.1-LAT1质粒的Neuro-2a细胞能成功表达LAT1蛋白，且LAT1对Neuro-2a细胞的增殖和凋亡均有显著影响，为进一步研究LAT1的生物学作用奠定了重要基础。
关键词： L型氨基酸转运载体1 真核表达载体 neuro-2a细胞 增殖 凋亡 -
Ⅰ期肺腺癌中LAT1的表达及临床意义
目的 探讨L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)在Ⅰ期肺腺癌组织中表达的预后意义.方法 回顾性分析141例经外科治疗的Ⅰ期肺腺癌患者临床病理资料,采用免疫组化MaxVision法检测LAT1和Ki-67的表达,分析它们与患者的临床病理特征及预后的关系,并检测了LAT1和Ki-67表达的关系.结果 141例Ⅰ期肺腺癌组织中LAT1和Ki-67表达阳性率分别为67.4%和56.0%.LAT1表达与疾病分期(P=0.002)、胸膜侵犯(P=0.038)、肿瘤复发转移(P=0.003)及Ki-67表达有相关性(P=0.037).单因素分析提示:肿瘤大小(P=0.017)、临床分期(P=0.000)、脉管侵犯(P=0.013)、复发转移(P=0.000)、LAT1(P=0.000)及Ki-67表达(P=0.017)为预后相关因素(P<0.05);而Cox多因素回归分析表明,临床分期(P=0.045)、复发转移(P=0.013)、LAT1表达(P=0.029)为独立预后因素.结论 LAT1的表达与Ⅰ期肺腺癌的临床分期、复发转移、预后以及癌细胞增殖密切相关,LAT1高表达提示预后不良.
关键词： 肺肿瘤 腺癌 Ⅰ期 L型氨基酸转运载体1 预后 -
氨基酸转运体L型氨基酸转运载体1在肿瘤中的研究进展
氨基酸转运体是介导氨基酸跨膜转运的膜蛋白.L型氨基酸转运载体1(LAT1)是L型氨基酸转运载体中的重要成员,主要负责转运大分子支链氨基酸和芳香族的中性氨基酸,包括一些必需氨基酸,如亮氨酸等.LAT1在恶性肿瘤中呈过度表达,能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和肿瘤血管的形成.LAT1在医学、营养学、动物学等生命科学领域有着重要的研究意义.
关键词： 氨基酸转运体 L型氨基酸转运载体1 肿瘤 -
LAT1及CD98hc在胃癌细胞SGC-7901中的表达及LAT1对其细胞生物学行为的影响
[目的]观察L型氨基酸转运载体1(LAT1)与其异二聚体CD98hc在胃癌细胞SGC-7901中的表达及LAT1对细胞增殖与迁移能力的影响.[方法]将胃癌细胞SGC-7901分为1、10、100μmol/L BCH干预和空白对照共4组,RT-PCR、1F与Western blot检测胃癌细胞SGC-7901中LAT1与CD98hc mRNA、蛋白的表达.不同浓度的BCH作用于胃癌细胞SGC-790148h后,新型四唑氮盐(MTS)比色法检测各组细胞生长情况,流式细胞仪检测各组细胞周期分布情况,Transwell细胞迁移小室检测各组细胞迁移能力的变化.[结果]LAT1及其异二聚体CD98hc在胃癌细胞SGC-7901中呈高表达.与空白对照组相比,随着BCH浓度的提高,胃癌细胞SGC-7901的增殖能力与迁移能力逐渐降低.细胞周期分析发现,BCH处理的胃癌细胞组S期细胞减少,而G0/G1期细胞增加(P＜0.05).[结论]LAT1及其异二聚体CD98hc在SGC-7901细胞中有表达,LAT1可能促进SCC-7901细胞的增殖,加快细胞周期进程,增强SGC-7901细胞的迁移能力.
