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HPLC测定红花中羟基红花黄色素A的含量
目的:建立HPLC法同时测定红花中羟基红花黄色素A的含量.方法:采用Kromasil C<,18>(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈:0.1%H<,3>PO<,4>=10:90,流速1.0 ml/min,检测波长403 nm,柱温为30℃.结果:羟基红花黄色素A在0.89～10.68μg/ml的范围内呈良好的线性关系(r=0.999 0).结论:本测定方法快捷,简便,准确,重现性好.
关键词： 高效液相色谱法 羟基红花黄色素A(HSYA) 红花 -
羟基红花黄色素A促内皮细胞增殖的机制研究
目的 探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对低氧条件下犬血管内皮细胞(VEC)血管内皮生长因子(VEGF)相关信号传导通路的影响.方法 在低氧条件下以ELISA法观察VEGF抗体及其两种酪氨酸受体(Flt-1和KDR)的抗体对HSYA促VEC增殖作用及分泌VEGF水平的影响;生物分子相互作用分析法检测HSYA与VEGF、Flt-1和KDR的相互作用;硝酸还原酶法测定VEC培养液中NO、NOS的量.结果 10μg/mL VEGF、Flt-1和KDR的抗体均能明显抑制HSYA的促EC分泌VEGF作用;生物分子相互作用分析结果证实,HSYA与VEGF、Fit-1及KDR均无明显结合;HSYA在1mmol/L浓度下能够明显促进低氧条件下VEC培养中的NO水平,而对NOS水平没有明显影响.结论 在低氧条件下,HSYA促VEC增殖的作用与VEGF及其相关信号传导通路有关,但HSYA与VEGF及其受体无明显结合,提示可能存在与VEGF及其相关信号传导通路相关的HSYA作用靶点.
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羟基红花黄色素A对实验性心肌梗死大鼠的保护作用及机制
目的 研究羟基红花黄色素A(HSYA)对大鼠缺血心肌的保护作用及其作用机制.方法 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,观察HSYA对大鼠心肌梗死面积(MIS),血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血栓烷B2(TXB2)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响.结果 与模型组比较,HSYA明显减小急性心肌梗死大鼠MIS,显著提高血清NOS活性,明显增加NO及6-Keto-PGF1α的量,显著降低血清CK-MB、LDH、TXB2及AngⅡ水平.结论 HSYA对急性缺血心肌具有保护作用,其机制与HSYA调节NO、6-Keto-PGF1α、TXB2和Ang Ⅱ的水平,从而增加心肌供血供氧,减轻心肌细胞损伤、凋亡有关.
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羟基红花黄色素A对常氧/低氧犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响
目的 探讨羟基红花黄色素A(HSYA)对常氧/低氧两种条件下体外培养的犬胸主动脉内皮细胞增殖的影响.方法 采用内膜消化刮取法获取犬胸主动脉内皮细胞;在常氧(21%)/低氧(10%)两种条件下,分别以噻唑蓝(MTT)法观察HSYA对血管内皮细胞(VEC)增殖的影响,血管内皮生长因子(VEGF)作为阳性对照.结果 常氧条件下HYSA 1、0.1 mmol/L在72、96、120 h时对VEC有明显促增殖作用;低氧条件下HYSA 1、0.1、0.01mmol/L在24、48 h时对VEC有明显促增殖作用,且具有浓度和时间依赖性.HYSA 1 mmol/L与VEGF 2.6×10-7mol/L在同样条件下对VEC的促增殖作用强度相当.结论 在常氧/低氧两种条件下,HSYA均具有明显促VEC增殖作用,且在低氧条件更为明显.
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羟基红花黄色素A缓解大鼠心肌细胞凋亡作用的研究
目的 以整体和离体实验观察羟基红花黄色素A(HSYA)缓解心肌细胞凋亡的作用.方法 以异丙肾上腺素(ISO)造成人鼠急性心肌缺血,以TUNEL法检测心肌组织细胞凋亡,免疫组化法和RT-PCR法观察心肌组织中bax、bcl-2基因表达的变化;用缺精缺氧/再复氧模型诱导原代培养心肌细胞凋亡,以PI 流式细胞法观察凋亡情况,以Rhodamine 123荧光法考察线粒体膜电位的变化.结果 60、120、240 mg/kg HSYA ip给药可以减轻心肌缺血大鼠的线粒体肿胀、核凝集及固缩,降低心肌细胞凋亡率(P＜0.01),下调心肌组织Bax蛋白(P＜0.05)及bax mRNA的表达(P＜0.01).0.64、1.3、2.5 mmol/L HSYA可减少缺氧/再复氧造成的细胞凋亡(P＜0.05),且可缓解该损伤造成的心肌线粒体膜电位下降(P＜0.05).结论 抑制心肌细胞凋亡是HSYA缓解心肌缺血的重要机制.
关键词： 羟基红花黄色素A(HSYA) 凋亡 心肌缺血 线粒体 -
有机试剂法制备羟基红花黄色素A
目的：初探有机试剂法制备HSYA的优工艺。方法本文采用高效液相法，以 HSYA含量为指标，比较冷提、热提、超声提取的提取效果，采用正交试验优选佳提取工艺，考察沉淀试剂及用量，并考察不同除杂方式的效果。结果佳制备工艺为：14倍量DMSO常温避光搅拌30min除杂，抽滤；滤渣加入14倍量DMSO浸泡1h，在80℃下，密闭热提50min，抽滤，滤渣加入12倍量DMSO，在80℃下，密闭热提50min，抽滤，合并滤液；滤液加入3倍量乙酸丁酯，离心，沉淀用适量乙醇洗涤，干燥，终沉淀物纯度为14.56％。结论本实验首次以非水溶媒为提取溶剂制备HSYA。该工艺具有操作简单、经济、环保等优点，且为热敏性物质提供了常温浓缩的方法，为 HSYA的工业化生产和新药开发提供了实验依据。
关键词： 羟基红花黄色素A(HSYA) DMSO 提取 纯化 有机试剂 -
羟基红花黄色素A对3T3-L1细胞增殖和分化的影响
目的 研究羟基红花黄色素A (HSYA)对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响.方法 采用MTT法、甘油三酯测定、RT-PCR和双萤光素酶报告基因检测等方法观察HYSA对3T3-L1细胞增殖和分化的影响及其可能的机制.结果 0.01 mg/L～ 10 mg/L HSYA在4 h～96 h抑制3T3-L1细胞的增殖,120 h促进细胞增殖,并具有浓度依赖性.HSYA减少3T3-L1细胞分化过程中脂质和甘油三酯的含量,增加HSL mRNA的表达和启动子活性.结论 HSYA对3T3-L1细胞增殖的影响具有双向性,并通过促进HSL启动子的活性,增加mRNA表达,抑制其分化.
