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人心肌肌钙蛋白Ⅰ测定标准化的研究进展
人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin I,cTnI)被定为诊断心肌损伤的确定标志物,具有特异性好、灵敏度高的优点.但由于它在人血清中不稳定、极易被降解和存在形式多样等诸多因素,不同试剂盒对同一份标本的测定结果会出现显著差异,因此cTnI测定的标准化工作成为目前研究的热点,各国科学家在此方面做了大量的工作.
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人心肌肌钙蛋白Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立
目的建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)化学发光免疫分析方法.方法用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体,经DEAE-23层析和(NH4)2SO4沉淀纯化后,用碳化二亚胺(EDC)法标记辣根过氧化物酶,Sephadex G-200纯化.优化鲁米诺-H2O2-肉桂酸发光体系,建立了cTnI化学发光免疫分析法.用该法检测138例正常人及病人血清标本,确定正常值参考范围,并与肌ISA法比较.结果所得抗体的滴度为1:8 000.优化后的发光体系为:鲁米诺(4.5 mmol/L),H2O2(7.5 mmol/L),四苯硼钠(0.8 mmol/L),肉桂酸(0.4 mmol/L),比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了1.19和1.05倍.本法检测灵敏度为0.2 ng/ml,线性范围为0.4~50 ng/ml,批内CV平均9.0%,批间CV平均11.8%,回收率为104.2%.Hb浓度在0~50 nmol/L,T-Bil在0~15μmol/L,TG在0~2.0 mmol/L对测定结果无影响.与ELISA比较,两法结果一致(P>0.05),相关系数r=0.9852(P<0.01).用BioCheck标准品为校正物,确定临床诊断参考范围为<2.12 ng/ml,诊断符合率为96.2%.结论建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验.
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严重创伤病人心肌肌钙蛋白Ⅰ释放的发生率及其意义
背景:严重创伤病人中肌钙蛋白Ⅰ释放的发生率和意义及其机制尚不明确.本试验前瞻性研究此类病人中肌钙蛋白Ⅰ释放的特征及其与休克、心肌挫伤和病人预后的关系.
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人心肌肌钙蛋白Ⅰ的生物学特性及其检测的研究进展
心肌肌钙蛋白I(cTnI)为心肌细胞损伤敏感性和特异性强的标志物之一,在急性心肌梗死(AMI)、心肌炎等疾病中,已作为判断心肌细胞损伤的重要指标,也是公认的协助急性冠脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)危险分层和反映其预后的主要生化标志.本文就cTnI的分子生物学特性及其临床检测做一综述.
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抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体制备中免疫抗原的选取
目的获得与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ没有交叉反应的抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ(HcTnⅠ)特殊位点的单克隆抗体.方法选择了包括牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(BcTnⅠ)、根据HcTnⅠ氨基酸序列的亲水性设计的4个钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联肽段和一个八倍体多肽分子(MAP)等6种代用抗原,通过免疫、杂交和筛选,获得了能分泌抗(HcTnⅠ)的IgG型抗体的杂交瘤细胞株,并对得到的抗体进行了特异性鉴定.结果用其中4种抗原免疫得到了抗HcTnⅠ的IgG型单抗的细胞株,其中的3种合成肽可以得到分泌抗HcTnⅠ特殊位点的IgG型单抗细胞株.结论为临床上检测cTnⅠ以诊断急性心肌梗塞,提供了可能抗体.