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巨噬细胞加帽蛋白与胃癌细胞增殖及迁移能力的关系
目的:探讨巨噬细胞加帽蛋白(macrophage-capping protein,CapG)对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响.方法:采用real-time PCR方法检测了4种胃癌细胞AGS、BCG823、PHM82、MNK45中CapG基因的表达情况,选择低表达并且易转染的AGS细胞作为研究对象,设计针对CapG的特异性引物并合成重组质粒.构建可以表达CapG的慢病毒包装系统,通过侵染人胃癌细胞系AGS,建立可稳定表达CapG的细胞株.通过CCK8实验分析过表达CapG基因对AGS细胞的生长和增殖能力的影响,细胞划痕以及Transwell小室实验分析过表达CapG基因对AGS细胞迁移能力的影响.结果:过表达CapG后,AGS细胞的生长速度略低于对照组,但二者间差异无统计学意义(t=2.424,P=0.073).划痕试验显示CapG实验组划痕间距相对于对照组明显缩小,两组平均缩小距离分别为336.99 μm和45.54 μm,差异有统计学意义(t=14.97,P=0.004).Transwell试验显示CapG实验组和对照组穿膜细胞数目分别为176个和70个,CapG实验组显著多于对照组,差异有统计学意义(t=40.00,P<0.001).结论:过表达CapG基因对胃癌细胞系AGS细胞的生长和增殖无显著影响,过表达CapG基因能促进胃癌细胞系AGS细胞的迁移.
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巨噬细胞加帽蛋白对结直肠癌生物学特性的作用
目的 了解巨噬细胞加帽蛋白(CapG)在结直肠癌组织中的表达,探讨其对结直肠癌细胞增殖、迁移能力的影响.方法 收集2015年9月10日至2016年3月2日行结直肠癌手术治疗的84例患者的临床资料和组织标本,其中结直肠癌组织标本84份,结直肠癌旁正常组织(对照)19份.采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织和癌旁正常组织中CapG的表达情况.将结直肠癌HCT116细胞分为阴性对照组和小干扰RNA组,分别转染阴性对照序列和靶向CapG的序列.采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测干扰效果.采用MTT法、细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测干扰CapG后对细胞增殖和迁移的影响.统计学分析分别采用t检验、Wilcoxon秩和检验和Kruskal-Wallis H检验.结果 CapG在结直肠癌组织的阳性表达率为95％(80/84),高于癌旁正常组织(5/19),差异有统计学意义(U=-6.123,P=0.023).CapG在结直肠癌患者不同发生部位、有无淋巴结转移、不同分化程度和不同临床分期中的表达差异均有统计学意义(H=10.683,U=2.668,H=12.182,U=-3.247;P均＜0.05).阴性对照组和小干扰RNA组的HCT116细胞增殖速度差异均无统计学意义(P均＞0.05).小干扰RNA组HCT116细胞株的划痕愈合率为(27.40±1.58)％,低于阴性对照组的(64.40±1.25)％,差异有统计学意义(t=31.790,P＜0.01).小干扰RNA组HCT116细胞株的穿膜细胞数为57.0±2.0,少于阴性对照组的110.0±6.7,差异有统计学意义(t=13.290,P＜0.01).结论 结直肠癌组织中CapG表达增高,其高表达可能与结直肠癌的转移密切相关.
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巨噬细胞加帽蛋白与肺癌患者转移预后的关系
目的:探讨巨噬细胞加帽蛋白(CapG)在肺癌临床病理特征、癌细胞转移和患者预后中的价值.方法:S-P免疫组化法检测63例有完整资料的肺癌患者癌组织标本及相应癌旁组织CapG蛋白表达,分析CapG蛋白与肺癌患者临床病理特征和转移预后的关系.结果:CapG蛋白肺癌细胞胞浆及胞核阳性表达为33.3% (21/63),并与肺癌组织学类型、肿瘤分化程度、肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及抽烟有关(P<0.05); Kaplan-Meier生存分析显示CapG蛋白阳性患者生存率较阴性患者为低(P<0.05),Cox风险比例模型显示淋巴结转移及CapG蛋白阳性可显著增加肺癌患者的死亡风险(P<0.05).结论:CapG基因在肺癌发生发展中起重要作用,与肺癌转移及低生存率有关,可作为临床早期发现肺癌转移及预测预后的指标.
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结直肠癌中巨噬细胞加帽蛋白的表达及其临床病理学意义
目的:检测巨噬细胞加帽蛋白(CapG)在结直肠癌及癌旁正常组织中的表达,探讨其在结直肠癌发生、发展中的作用.方法:采用实时定量逆转录PCR法检测30例结直肠癌及癌旁正常组织中CapG mRNA的表达水平的差异,分析结直肠癌组织中CapG mRNA表达水平与临床病理特征之间的关系.结果:结直肠癌组织CapG mR-NA的表达量(0.240±0.029)高于对应癌旁正常组织(0.130±0.011),但差异无统计学意义(t=1.616,P=0.241).CapG mRNA在结直肠癌中的表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移等因素无关联性(t=0.591,0.841,-1.420,0.425,-1.366;P=0.559,0.408,0.167,0.674,0.183);而与肿瘤部位、分化、分期相关(F=3.642,t=2.412,t=-2.479;P=0.040,0.023,0.019),其中CapG mRNA在左半结肠癌(0.560±0.002)、右半结肠癌(0.250±0.009)及直肠癌(0.150±0.004)中表达水平存在依次减少差异,而以左半结肠中表达高,差异具有统计学意义(F=3.642,P＜0.05).结论:结直肠癌中CapG差异表达可作为判断肿瘤恶性程度的指标.
关键词： 结直肠癌 巨噬细胞加帽蛋白 实时定量逆转录聚合酶链反应
