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NO提高γ射线对L1210细胞损伤效应及其机制的研究
目的探讨一氧化氮(NO)是否提高γ射线对L1210细胞的损伤效应及其机制.方法将L1210细胞加入隔离培养器内与3T3细胞共培养,收集经γ射线照射后12、24、48和72 h各组L1210细胞,台盼蓝染色观察直接损伤作用,TUNNEL法观察诱导细胞凋亡的情况,流式细胞术检测细胞周期.结果γ射线照射后质粒转染组L1210细胞台盼蓝拒染率下降快,12 h后与空载体组比较差异有统计学意义(P＜0.05),加DEVD-CHO后能够提高台盼蓝拒染率,24 h后有显著的差异(P＜0.05);γ射线照射后质粒转染组细胞凋亡率24 h开始明显升高,与空载体组比较差异有统计学意义(P＜0.05),加DEVD-CHO后细胞凋亡率下降,24 h开始与单独质粒转染组比较差异有统计学意义(P＜0.05);射线照射后质粒转染组细胞G1期快速上升,4 h与空载体组差异有统计学意义(P＜0.05),加DEVD-CHO后G1期上升较单纯质粒转染组慢,4 h两组差异有统计学意义(P＜0.01).结论NO可增强γ射线对L1210细胞的直接损伤作用,出现细胞的G1阻滞,促进细胞凋亡.Caspase-3的活化参与上述作用.
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华蟾素对Jurkat细胞株的体外作用和动物实验研究
目的:通过体外实验和动物实验,探索华蟾素对白血病细胞株的作用.方法:通过四氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst荧光染色法、原位末端标记(TUNEL)法、DNA凝胶电泳及流式细胞术(FCM)观察华蟾素对人白血病细胞株Jurkat的增殖、细胞凋亡、bcl-2表达的影响;在DBA/2小鼠的腹腔中注射L1210细胞,比较治疗组和对照组小鼠的生存期,评价药物疗效.结果:与对照组相比,1:100～1:25浓度的华蟾素能明显抑制Jurkat细胞生长,Hoechst荧光染色可见典型的凋亡形态学改变,TUNEL可见深棕色凋亡细胞,DNA电泳出现凋亡特有的"梯子"式条带,Annexin V/PI双染色的FCM也证实凋亡的存在.在经1:100、1:50、1:25浓度的华蟾素处理2 d后,细胞凋亡率分别为18.78%、24.40%和40.29%.凋亡细胞的bcl-2表达由44.07%下调至16.30%.动物实验中,L1210白血病腹水瘤小鼠经华蟾素治疗后,生存期延长35.90%.结论:华蟾素能抑制Jurkat细胞生长并诱导凋亡,可能是通过下调bcl-2的表达来实现.动物实验证实,华蟾素能延长L1210白血病腹水瘤小鼠的生存期.
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毛脉酸模提取物体内抗肿瘤作用的实验研究
目的:研究毛脉酸模提取物小鼠体内抗肿瘤作用.方法:以S180肉瘤、H22肝癌及L1210白血病作为实验瘤株,观察毛脉酸模50％乙醇提取物和水提取物对于小鼠S180、H22细胞株移植性肿瘤动物模型的抑瘤作用、对于L1210细胞株移植性肿瘤动物模型的生命延长率的影响.结果:毛脉酸模50％乙醇提取物和水提取物对于小鼠S180、H22细胞株移植性肿瘤动物模型的抑瘤作用均大于30％,对于L1210小鼠的生命延长率均在50％以下.结论:毛脉酸模50％乙醇提取物和水提取物能明显抑制S180实体瘤和H22实体瘤的生长,但是毛脉酸模50％乙醇提物和水提取物对于L1210小鼠的生存时间无明显影响.
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L1210克隆细胞mRNA的表达及蛋白电泳图谱分析
目的研究L1210及其克隆细胞mRNA表达的差异,从基因水平探讨质控瘤株的方法.方法用SDS-PAGE电泳观察瘤细胞株的蛋白质电泳图谱;6株生物素标记的探针与瘤细胞进行玻片原位杂交测定瘤细胞mRNA的表达.结果北京肿瘤所L1210蛋白质条带数为32条带,克隆细胞L3F9和L3E11均为31条带;细胞原位杂交证明,北京肿瘤所L1210与6株探针均杂交阳性,但杂交阳性染色强度不同;克隆细胞L3E11与p16、c-jun及p53探针杂交阳性;克隆细胞L3F9与p16,c-fos,c-myc及c-jun探针杂交阳性.结论从北京肿瘤所保存的L1210细胞中获得的2株克隆细胞L3E11和L3F9的蛋白质电泳图谱的条带数一致,但其mRNA 的表达不同; c-fos,c-myc以及p53基因的表达与否可以把这2株克隆细胞区别开来,cDNA探针检测可作为对细胞株进行质量控制的有效方法.
