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膀胱输尿管反流基因Rob02在小鼠肾脏发育过程中的表达
目的 观察Robo2在小鼠肾脏发育过程中的表达情况,探讨其在肾脏发育中的作用.方法 应用实时定量RT-PCR技术对胚龄12.5、13.5、14.5、15.5、16.5、17.5、18.5d和生后日龄1d、1周、5周共10组小鼠肾脏组织中的Robo2 mRNA表达水平进行半定量分析.应用免疫荧光技术检测胚龄12.5、13.5、14.5、15.5、16.5、17.5d和成年小鼠肾脏Robo2蛋白表达部位.结果 实时定量RT-P CR结果显示,Robo2蛋白表达水平在胚龄12.5、 13.5、 14.5d时高,随后明显下降,在出生后维持低水平表达.免疫荧光染色结果显示,Robo2初在胚肾的后肾间充质表达,而不在输尿管芽表达,随着胚龄增加及肾脏发育,Robo2表达于后肾间充质细胞膜、围绕输尿管芽的浓缩帽状间充质、逗号形体和S形体以及肾小囊体,终表达于肾小球足细胞.另外,部分早期肾小管上皮细胞也有微弱Robo2表达.在Robo2基因缺失后,肾单位发育异常,部分肾小管、集合管扩张.结论 Robo2通过调控后肾间充质与输尿管芽相互作用在小鼠肾脏发育过程中对肾单位发育起重要作用.
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经典Wnt信号通路在后肾发育中的作用
胚胎学研究发现,输尿管芽与后肾间充质间的相互诱导作用是后肾发育的关键环节.关于调控后肾发育信号通路的研究是近20年来研究的热点.其中,经典Wnt信号通路被认为在后肾发育过程中发挥重要作用,这一信号通路的正常开启与关闭可能与后肾发育及肾脏疾病的发生密切相关.本文主要阐述近年来关于经典Wnt信号通路在后肾发育中作用的研究新进展.
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膀胱输尿管反流相关基因的研究进展
膀胱输尿管反流是先天性肾脏和尿路畸形中常见的一种类型，主要与输尿管膀胱连接部发育异常有关。除非伴有尿路感染症状，或是综合征的一部分，多数患儿临床表现不明显。膀胱输尿管反流的确切病因还不清楚，可能是由基因异常引起，也可能受环境因素影响。膀胱输尿管反流患者后代和同胞间的患病率明显高于正常儿童，提示了基因筛查的必要性。该文将对膀胱输尿管反流相关基因的研究进展及相互作用作一综述。
关键词： 膀胱输尿管反流 先天性肾脏和尿路畸形 基因 输尿管芽 后肾间充质 -
发育生物学在肾脏组织工程中的应用
肾脏发育生物学的研究成果对采用组织工程技术体外再造肾脏组织具有重要的理论指导意义和推动作用.在以往肾脏发育生物学研究中,取得的有关肾脏发育过程中小管分枝发生、间充质细胞-上皮细胞转换以及胚胎期后肾成分体外培养试验的研究成果,为进一步开展工程化肾脏组织体外构建研究奠定了良好基础,提供了新思路和新方法.本研究对肾脏发育生物学研究、肾脏组织工程研究以及发育生物学在工程化肾脏组织构建中的初步应用进行简要综述.
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宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响
目的 研究宫内生理性低氧微环境对哺乳动物胚胎早期肾脏发育的影响.方法 采用大鼠胚胎肾脏体外培养的方法建立肾脏发育模型,应用低氧培养箱模拟胚胎发育早期宫内生理性低氧微环境,免疫荧光染色技术标记胚肾输尿管芽分枝和后肾间充质向上皮转分化过程,激光共聚焦显微镜观察胚肾发育形态学变化;原位末端转移酶标记技术(TUNEL法)检测胚肾细胞凋亡的变化,胸腺嘧啶核苷类似物(EdU)掺入法检测胚肾细胞增殖的变化,实时荧光定量PCR法检测胚肾发育相关基因表达的变化.结果 体外培养条件下低氧(3％～5％O2)微环境显著抑制胚肾发育,输尿管芽分枝和肾小球数目均减少(P＜0.05).低氧(5％O2)条件下胚肾细胞的凋亡程度较常氧下显著减轻,细胞增殖则受到了显著抑制(P＜0.05).低氧增强胚肾后肾间充质Six2阳性干细胞的自我更新,上调Six2、Wt-1等发育重要相关基因的表达,下调Wnt9b和Wnt4等诱导分化相关基因的表达.结论 宫内生理性低氧微环境可能通过影响哺乳动物胚肾发育相关信号通路抑制胚肾干细胞的增殖和分化,从而促进胚肾干细胞维持自我更新.
