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复方杏仁面膜治疗黄褐斑临床观察
目的:观察复方杏仁面膜治疗黄褐斑的临床疗效.方法:选择女性黄褐斑患者148例,随机分为治疗组(86例)和对照组(62例).治疗组外用复方杏仁面膜,每周2次,对照组外涂复方维A酸霜,每天1次,12周后对其疗效进行比较.结果:治疗组基本治愈36例,显效30例,有效率76.74%;对照组基本治愈17例,显效21例,有效率61.29%,两组比较差异有显著性(P＜0.05).结论:复方杏仁面膜能很好地抑制酪氨酸酶活性,减少黑素的合成,从而起到消除和减轻黄褐斑的作用,方法简单、使用方便,易于推广.
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测定24种植物的提取物对酪氨酸酶活性的影响
目的:测定几种民间药用植物对酪氨酸酶活性的影响.方法:选用24种植物,以多巴为底物,加入植物提取物和蘑菇酪氨酸酶,测定A475,计算酪氨酸酶的抑制百分率.结果:与古方中常用的增白药相比,繁缕的抑制百分率高,绞股蓝、猪秧秧也有抑制作用.结论:繁缕对酪氨酸酶有明显的抑制性,提示它对皮肤有增白效果.
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色素调节剂对体外培养的人表皮黑素细胞的影响
目的 观察几种色素调节剂对体外培养的人表皮黑素细胞形态及功能的影响.方法 体外培养正常表皮黑素细胞,分别加入合适浓度的表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、氢醌(HQ)、烟酰胺(NAA)、α-黑素细胞刺激素(α-MSH)和维生素C磷酸酯镁(AP-Mg)干预细胞72h,测定酪氨酸酶活性和黑素生成量.用黑素体相关蛋白单克隆抗体(NKI-beteb)染色鉴定黑素细胞,观察并摄片.结果 3mmol/L EGCG,0.5mmol/L HQ,6mmol/L AP-Mg与黑素细胞共同孵育72h后,其细胞酪氨酸酶活性及黑素生成受到抑制,但只有EGCG组细胞形态发生变化;50nmol/L α-MSH干预后,细胞酪氨酸酶活性及黑素生成显著增加,形态改变较显著.1mg/mL NAA组细胞酪氨酸酶活性无改变,而黑素生成减少,细胞异形化.结论 EGCG,HQ,NAA,AP-Mg和α-MSH对黑素细胞都有显著的影响,虽然作用于黑素细胞的机制有所不同,但也有一些相似的地方,其具体机理有待于进一步研究.
关键词： 人表皮黑素细胞 酪氨酸酶 黑素生成 表没食子儿茶素没食子酸酯 维生素C磷酸酯镁 -
中药桂枝抑制黑素生成的作用机理研究
目的研究中药桂枝对小鼠黑素细胞系Mel-a黑素生成、酪氨酸酶活性及基因表达的影响,阐明桂枝抑制黑素生成的机理.方法用药物处理Mel-a细胞后进行黑素含量、L-DOPA染色、放免法测定酪氨酸酶活性,western blot 和实时RT-PCR分别测酪氨酸酶及酪氨酸酶相关蛋白的蛋白和mRNA表达水平.选取熊果苷作为阳性对照.结果10μg/ml浓度的桂枝提取物在细胞培养水平对黑素生成有明显地抑制作用,强于20μg/ml浓度的熊果苷.桂枝可以抑制酪氨酸酶mRNA表达;减少这种限速酶的蛋白产量,在细胞量相同的情况下,桂枝明显抑制酪氨酸酶的氧化活性.结论中药桂枝有很强的抑制黑素产生的作用,其作用是通过抑制酪氨酸酶的基因表达、蛋白合成和氧化活性这三方面来实现.
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六种中药复方乙醇提取物对酪氨酸酶激活作用及动物致色素作用的研究
目的探讨中医理法和实验药效的关系及其可能的作用机制,为临床治疗白癜风优化组方提供实验依据.方法离体实验为中药复方乙醇提取物对酪氨酸酶的影响;动物实验选用棕色豚鼠为模型,观察中药致色素作用.结果Ⅰ方、Ⅱ方、Ⅲ方、Ⅵ方对酪氨酸酶有激活作用(P＜0.05);6种中药复方均使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多(P＜0.05);Ⅱ方、Ⅲ方、Ⅵ方中药使豚鼠表皮内Dopa阳性细胞增多(P＜0.05).结论对酪氨酸酶具有激活作用的中药组成复方并不一定对酪氨酸酶有激活作用;中药复方在离体和活体上的作用并不完全平行,提示中药对黑素生成的机理,不仅限于对酪氨酸酶的激活作用.
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Z-十八碳-9-烯-丙磺酰胺对小鼠B16细胞黑素生成的抑制作用
目的 探讨Z-十八碳-9-烯-丙磺酰胺(propane-2-sulfonic acid octadec-9-enyl-amide,N15)对黑素生成的影响及机制.方法 以N15为受试物,小鼠B16黑素瘤细胞为研究对象.不同浓度N15(10 ～ 140μmol/L)处理B16细胞72h,MTS检测细胞增殖情况;酶标法测定B16细胞内黑素含量和酪氨酸酶活性,免疫印迹法检测酪氨酸酶的蛋白表达.结果 10 ～ 100μmol/L浓度的N15对B16细胞的增殖没有影响;50μmol/L和100μmol/L浓度的N15对B16细胞内黑素生成的抑制率分别为18.69％和26.66％,对酪氨酸酶活性的抑制率分别为11.62％和45.16％,对酪氨酸酶蛋白表达的抑制率分别为16.34％和34.34％,与α-MSH组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 N15能有效抑制小鼠黑素瘤细胞B16黑素的生成,其机制可能与其抑制酪氨酸酶的活性有关.N15是一种高效的黑素合成抑制剂,可作为美白化妆品的添加剂.
关键词： Z-十八碳-9-烯-丙磺胺 小鼠B16黑瘤细胞 酪氨酸酶 黑素合成 -
紫铆花素对人黑素瘤细胞A375生物活性及线粒体膜电位的影响
目的 观察紫铆花素对人黑素瘤细胞A375细胞增殖、细胞周期、酪氨酸酶活性、黑素合成及线粒体膜电位的影响.方法 用不同浓度紫铆花素处理人黑素瘤细胞A375 48h后,采用MTT法测定黑素细胞增殖率;流式细胞仪测定黑素细胞周期和线粒体膜电位变化;L-DOPA法测定黑素细胞酪氨酸酶活性及NaOH裂解法测定黑素含量变化.结果 与对照组相比,0.1～5.0μg/mL浓度范围紫铆花素与人黑素瘤细胞A375共孵育48h后,能明显促进人黑素瘤细胞A375增殖,具有不同程度提高酪氨酸酶活性、促进黑素合成及调节细胞周期和线粒体膜电位的作用.结论 紫铆花素对体外培养的人黑素癌细胞A375起促进细胞增殖、提高酪氨酸酶活性、增加黑素合成的作用,其作用可能与紫铆花素对细胞周期和线粒体膜电位的调节有关.
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马尔尼菲蓝状菌酵母相黑素生成和酪氨酸酶基因的关系
目的 探讨马尔尼菲蓝状菌酵母相黑素生成和酪氨酸酶(TYR)基因的关系.方法 将马尔尼菲蓝状菌标准株分别在含和不合L-DOPA的不同培养基中37℃避光培养3天,观察菌落形态及颜色变化,应用实时荧光定量PCR测定TYR基因mRNA的表达.结果 (1)标准菌株接种在含和不含L-DOPA的SDA上菌落颜色无明显改变,未见明显黑素产生;(2)标准菌株接种在含有L-DOPA的BHI上菌落颜色深于接种在不含有L-DOPA的BHI的菌落颜色;(3)镜下观察标准菌株接种在含和不合L-DOPA的SDA,BHI上,其酵母样细胞的大小、形态基本一致,均未见被染成黑色.(4) TYR基因表达:接种在含L-DOPA的BHI的标准菌株,其TYR基因表达量高于不合L-DOPA的BHI组,差异有统计学意义(P＜0.05);含和不合L-DOPA的SDA中标准菌株TYR基因表达量均低于同组BHI组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 马尔尼菲蓝状菌在BHI中可以利用L-DOPA合成黑素;在BHI中添加外源性L-DOPA时,马尔尼菲蓝状菌的TYR基因表达上调.
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蒺藜防白丸对体外培养黑素细胞生物学特性的影响
目的 研究蒺藜防白丸对黑素细胞(melanocytes,MC)的形态、增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法 采用倒置显微镜观察细胞形态,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定蒺藜防白丸对黑素细胞增殖的影响,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,NaOH法测定黑素含量.结果 随着蒺藜防白丸浓度的升高,黑素细胞树突变粗短,且数量减少;低浓度(0.001 ～0.5mg/mL)的蒺藜防白丸对黑素细胞增殖影响不显著(P＞0.05),高浓度时(1mg/mL和5mg/mL)抑制作用明显(P＜0.05);低浓度的蒺藜防白丸可以提高酪氨酸酶活性,其中0.05mg/mL时酪氨酸酶活性高(P＜0.05),然而当蒺藜防白丸浓度继续增大,则会对酪氨酸酶活性产生抑制作用;蒺藜防白丸对黑素细胞黑素合成也有类似的影响.结论 蒺藜防白丸高浓度时抑制黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成;低浓度时促进酪氨酸酶活性及黑素合成.
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赤芍与菟丝子对豚鼠黑素细胞酪氨酸酶活性及mRNA表达的影响
目的 探讨赤芍与菟丝子对豚鼠皮肤黑素细胞酪氨酸酶活性及mRNA基因表达水平的影响,为应用中药治疗白癜风等色素减退性皮肤病提供实验依据.方法 利用棕黄色豚鼠背部皮肤色素实验动物模型,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性,然后采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测药物干预前后豚鼠皮肤中酪氨酸酶及相关蛋白-1 mRNA表达水平的变化.结果 赤芍与菟丝子均呈剂量依赖性地促进酪氨酸酶活性的增加;与正常对照组相比,1g/(kg·mL)的赤芍、菟丝予组酪氨酸酶及相关蛋白-1mRNA表达水平上升,且差异有统计学意义(P＜0.01);与阳性对照组8-MOP相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 赤芍、菟丝子的乙醇提取液均可上调豚鼠皮肤黑素细胞酪氨酸酶活性及促进mRNA表达,促进皮肤黑素生成.
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α-硫辛酸对体外培养的黑素细胞影响的实验研究
目的建立正常人表皮黑素细胞体外培养体系,研究α-硫辛酸对体外培养的黑素细胞的影响.方法采用MTT法测定α-硫辛酸对黑素细胞活力的影响,以左旋多巴为底物测定酪氨酸酶活性,NaOH裂解法测定黑素合成,并与茶多酚的结果进行比较.结果α-硫辛酸对黑素细胞活力有抑制作用,能使细胞增殖力降低,酪氨酸酶活性减弱,黑素合成减少.结论α-硫辛酸对体外培养的黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素生成都有抑制作用,这为临床应用α-硫辛酸治疗色素性疾病提供了实验依据.
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中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达的调节
目的探讨中药滋补肝肾方治疗白癜风的分子学作用机制.方法采用定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,观察中药滋补肝肾方对鼠B16黑素瘤细胞株酪氨酸酶mRNA表达的影响.结果中药滋补肝肾方能使黑素瘤细胞酪氨酸酶mRNA表达水平增加.结论中药滋补肝肾方能上调黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达水平,这是其治疗白癜风的药理作用机制之一.
关键词： 白癜风 酪氨酸酶 中药 逆转录-聚合酶链式反应 -
川芎嗪对正常人黑素细胞黑素合成的抑制作用
目的了解川芎嗪对黑素细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法采用黑素细胞体外纯培养技术,在药物处理后的细胞中掺入3H-TdR测定细胞增殖情况,用氧化DOPA反应测定酪氨酸酶活性,NaOH法测量黑素生成量.结果随着药物浓度增加,黑素细胞增殖降低,但浓度过高(＞500μg/ml)则显示其毒性作用.细胞酪氨酸酶活性及黑素生成量同药物浓度成反比.结论川芎嗪在较低的相对安全浓度下(50～400μg/ml)即可有效抑制黑素细胞增殖,降低酪氨酸酶活性,从而减少黑素合成.
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外用皮肤脱色剂的研究进展
影响黑素代谢的药物都可以作为脱色剂用于治疗色素异常性皮肤病.熊果苷、壬二酸、曲酸及其衍生物、甘草黄酮、氢醌等通过竞争和/或非竞争机制抑制酪氨酸酶活性,减少黑素生成;雏生素C及其衍生物、α-硫辛酸、α-生育酚等则通过抗氧化作用干扰黑素合成;维A酸主要通过阻止黑素向角质形成细胞的转运而发挥作用;不饱和脂肪酸可刺激细胞更新,促进含黑素颗粒的角质形成细胞脱落,而产生脱色作用;部分中药单体或方剂通过不同途径发挥脱色的作用.
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菟丝子水提物对黑色素合成的影响
目的 研究菟丝子水提物对黑色素合成的影响.方法 以斑马鱼胚胎为模型,检测不同浓度的菟丝子水提物对斑马鱼胚胎黑色素细胞形态、酪氨酸酶活性、黑色素含量的作用,及酪氨酸酶表达的情况.结果 菟丝子水提物可以降低斑马鱼胚胎酪氨酸酶活性,减少黑色素的生成,作用强度与药物浓度呈依赖性,2mg/mL菟丝子水提物与50μg/mL熊果苷作用相似,但对酪氨酸酶蛋白表达并无明显影响.结论 菟丝子水提物可以作用于斑马鱼胚胎黑色素细胞的酪氨酸酶,抑制黑色素合成.
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维药没食子对酪氨酸酶抑制作用的研究
目的：研究维药没食子对酪氨酸酶活性的影响。方法以 L-酪氨酸作为底物,测定来源于没食子药材中的没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物干预前、后酪氨酸酶的活性的变化,计算酪氨酸酶抑制率。结果没食子酸、1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷及没食子总鞣质提取物对酪氨酸酶的活性均具有明显下调作用,其中1,2,3,6-四-O-没食酰基-β-D-葡萄糖苷对酪氨酸酶的抑制作用强。结论该研究为深入开发利用没食子药材中的美白成分提供了依据。
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驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠 B16黑素瘤细胞增殖及黑素生成的影响
目的：研究维药复方驱白艾力勒思亚散（QBALLSYS）乙醇提取物对小鼠 B16黑素瘤细胞增殖、黑素合成以及酪氨酸酶活性的影响。方法以 M TT 法测定培养的 B16黑素瘤细胞的增殖活性；氢氧化钠法测定黑素生成量；体外氧化多巴反应方法测定酪氨酸酶活性。结果与空白对照组相比，驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对 B16黑素瘤细胞的增殖活性、黑素生成量、酪氨酸酶活性均有显著性作用（P＜0．05或 P＜0．01）。驱白艾力勒思亚散乙醇提取物对小鼠 B16黑素瘤细胞的增殖活性有上调作用，对细胞黑素生成以及酪氨酸酶的活性均有不同程度的促进作用。结论驱白艾力勒思亚散的乙醇提取物具有促进黑素细胞增殖和合成黑素的作用。
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他克莫司联合窄谱中波紫外线对黑素细胞黑素合成的影响
目的 评价他克莫司联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人表皮黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.方法 用MTT法筛选他克莫司佳作用浓度,根据对黑素细胞不同干预方法分为:他克莫司组、NB-UVB组、他克莫司+ NB-UVB组,未处理组为对照组.NB-UVB的照射剂量为25 mJ/cm2,以左旋多巴为底物测定酪氨酸酶活性,NaOH法测定黑素合成的影响.结果 他克莫司(10、102、103 nmol/L)对黑素细胞增殖无明显影响(P＞ 0.05),104 nmol/L他克莫司明显抑制黑素细胞增殖(P＜0.05),故选择103 nmol/L为佳浓度用于后续实验；他克莫司(103 nmol/L)、NB-UVB(25 mJ/cm2)、他克莫司+NB-UVB三组酪氨酸酶活性及黑素合成均明显高于对照组(P＜0.05)；他克莫司+NB-UVB组酪氨酸酶活性及黑素合成高于他克莫司组及NB-UVB组(P＜0.05).结论 他克莫司联合NB-UVB可以协同增加黑素细胞酪氨酸酶活性及黑素合成.
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眼皮肤白化病的研究进展与治疗
白化病是以黑色素缺乏为主要临床表现的单基因隐性遗传病,眼皮肤白化病(OCA)是常见的类型.目前研究认为,OCA分四个类型,其发病机制、表现及预后均不同.就治疗而言,目前尚无根治办法,仍以预防为主,对已发生白化病的患者采取一定保护措施.据研究报道,可考虑用转基因技术解决.
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马钱苷调节UVB诱导的表皮黑素单位黑素生成的实验研究
目的:探讨不同浓度马钱苷对中波紫外线(UVB)诱导该模型中黑素生成及其作用的影响.方法:常规体外共培养人黑色素瘤A375、人皮肤角质形成细胞(HaCaT),以UVB20 mJ/cm2照射后加含马钱苷的培养液作用24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖;采用多巴氧化法研究酪氨酸酶活性的变化;比色法测定黑素含量,免疫印迹法测定P38通路蛋白表达.结果:马钱苷0.01μm/L可抑制UVB诱导的表皮黑素单位中酪氨酸酶活性增高,减少黑素生成,其机制可能是通过抑制P38蛋白表达减弱信号通路作用,抑制酪氨酸酶活性而实现的.结论:高浓度马钱苷可明显抑制P38MAPK通路,进而抑制酪氨酸酶活性和黑素生成.
