Gefitinib靶向治疗非小细胞肺癌的现状与展望

Gefitinib是一个选择性EGFR酪氨酸激酶抑制剂,凭其独特的作用机制和较轻的毒性反应而成为非小细胞肺癌(NSCLC)靶向治疗的热点之一.本文对gefitinib的作用机制、临床前研究、临床研究、不良反应和疗效预测因子等进行回顾.更深入的研究有助于准确评价gefitinib在NSCLC治疗中的地位.

Gefitinib获得性耐药产生时非小细胞肺癌上皮性标志EGFR及E-cadherin表达的变化

[目的]了解gefitinib获得性耐药产生时非小细胞肺癌上皮性标志EGFR及E- cadherin表达的变化.[方法]采用逐步递增药物浓度、间歇作用体外诱导法诱导人肺腺癌NCI- H1975细胞株gefitinib获得性耐药；倒置显微镜下观察亲本细胞株和耐药细胞株在gefitinib作用前后的细胞形态学变化差异；细胞计数法描绘耐药细胞株和亲本细胞株的生长曲线并计算群体倍增时间；免疫细胞化学法检测耐药细胞株及亲本细胞株的EGFR及E-cadherin蛋白表达状态,并比较二株细胞间两种蛋白表达的差异.[结果]历时6个月诱导建成人肺腺癌gefitinib耐药细胞株NCI -H1975/GR.Gefitinib作用后耐药细胞株NCI - H1975/GR的细胞形态变化与亲本株NCI - H1975有所不同；在gefltinib的作用下,NCI - H1975/GR细胞体积变小,部分细胞变为纺锤形；NCI - H1975/GR细胞株群体倍增时间延长7.14 h(P ＜0.05)；免疫细胞化学结果显示:与亲本株比较,虽然耐药细胞株NCI - H1975/GR细胞细胞膜EGFR蛋白的表达无明显变化,但在细胞浆的表达明显增高；E -cadherin在细胞膜的表达明显降低.[结论]非小细胞肺癌产生gefitinib获得性耐药后EGFR蛋白在细胞浆积聚；而以E- cadherin为代表的上皮分化标记表达减弱.

吉非替尼和西妥昔单抗联合治疗非小细胞肺癌的体外实验研究

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在非小细胞肺癌中高度表达并且参与其病理过程.目前针对于表皮生长因子受体开发了两种治疗肺癌的药物,-种是EGFR小分子抑制剂吉非替尼(Gefitinib),另-种是EGFR单克隆抗体西妥昔单抗(Cetuximab).然而,Gefitinib、Cetuximab联合治疗肺癌的效果以及具体机制还不是很清楚.本实验旨在研究Gefitinib、Cetuximab对人肺癌细胞A549、H460、H1299、SPC-A、95C、95D细胞增殖、细胞周期与凋亡、侵袭转移及相关蛋白表达的影响,并探讨其相应的分子机制.方法:CCK8法检测各细胞对Gefitinib、Cetuximab的IC50.流式细胞技术观察细胞凋亡状况;Transwell实验检测细胞侵袭和迁移黏附情况;Western blot检测Gefitinib、Cetuximab对增殖相关信号通路蛋白表达的变化.结果:1 nmol/L Gefitinib和5 μmol/L Cetuximab对A549细胞生长抑制率大概为30%和40%,而两者联合使用的抑制率能够达到50%以上.5 μmol/L Gefitinib和10 nmol/LCetuximab单独及联合作用对A549细胞迁移率降低约为18%、22%和35%.通过Western blot检测到Gefitinib、Cetuximab处理组的P-AKT、p-EGFR、p-MAPK蛋白量较对照组明显下降.结论:Gefitinib和Cetuximab能够抑制肺癌细胞生长和迁移,并且有着良好的协同作用,提示两药联合使用临床肺癌治疗可能具有很大的潜力.

消化道肿瘤靶向治疗进展

分子靶向治疗药物是近年来肿瘤治疗发展热点的研究领域,以低毒高效的特点逐步成为临床肿瘤治疗的重要部分,目前大量的临床试验集中于研究该类药物的疗效和毒副反应.本文综述了消化道分子靶向治疗药物的新研究进展.

非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体基因突变的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤组织表皮生长因子受体(EGFR)基因突变及其相关因素.方法抽取80例手术切除肿瘤组织DNA,采用巢式PCR方法对编码EGFR基因的第18、19和21外显子片段进行扩增和测序,用Chromas软件分析基因突变或缺失.结果21例肿瘤组织存在EGFR基因突变或缺失,发生率为26.25%,其中13例为EGFR第19外显子阅读框内多核苷酸的缺失,8例为第21外显子2 573位核苷酸点突变.这些突变均为杂合子型.肺腺癌突变率为42.10%(16/38),显著高于鳞癌的9.68%(3/31)和鳞腺混合癌的18.2%(2/11)(χ2=9.702,P ＜0.01);女性患者突变率为48.28%(14/29),显著高于男性患者的13.73%(7/51)(χ2=11.4,P＜0.01);不吸烟者突变率为40%(16/40),显著高于吸烟者的12.50%(5/40)(χ2=7.812,P＜0.01).EGFR基因突变与患者年龄、TNM分期等因素无关.Logistic回归分析提示患者性别和组织类型是影响EGFR突变的2个主要因素.结论NSCLC存在EGFR基因的突变或缺失,其中以女性、腺癌和不吸烟患者突变率较高.

非小细胞肺癌的靶向性治疗

靶向性治疗是指使用药物特异性干扰参与肿瘤发生和进展的异常分子或生物学通路.治疗非小细胞肺癌的靶向药物包括EGFR家族抑制剂,血管生成抑制剂,信号传导抑制剂,凋亡诱导剂,类花生酸(eicosanoid)通路抑制剂.获得批准上市的有Gefitinib和Erlotinib,但更多的在进行临床试验.

Gefitinib治疗一线/二线化疗失败的晚期非小细胞肺癌

1.文献类型治疗2.证据水平1b3.文献来源Fukuoka M, Yano S, Giaccone G, et al. MultiInstitutional Randomized Phase Ⅱ Trial of Gefitinib for Previously Treated Patients With Advanced NonSmall-Cell Lung Cancer[J]. J Clin Oncol 2003;21(12):2237-2246

表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂Gefitinib对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤生长作用的实验研究

背景与目的:Gefitinib是一种喹唑啉类化合物,它是一种口服的选择性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,已被美国FDA批准用于治疗晚期非小细胞肺癌.我们在体外的研究结果显示Gefitinib对鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE2和SUNE1以及鼻咽高分化鳞癌细胞株CNE1的增殖皆有明显的抑制作用.本实验通过体内研究方法初步探讨Gefitinib对鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤的生长有无抑制作用,同时探讨Gefitinib与细胞毒药物顺铂合用在体内对鼻咽癌生长的影响.方法:将处于对数生长期的CNE2细胞制成1×107/ml的细胞悬液,取0.2 ml的CNE2细胞悬液接种于裸鼠右侧腋窝皮下,7天后肿瘤体积在100～200 mm3之间,根据性别分层,按肿瘤体积大小将裸鼠随机分成溶剂对照组、Gefitinib(100 mg/kg)组、Gefitinib(200mg/kg)组、DDP组、Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组.每组动物数8只,雌雄各半.Gefitinib灌胃给药,1周内连续5天,连用4周;DDP腹腔注射给药,每周1次,共4次.药物处理前及处理后每2天测量每只裸鼠肿瘤的长、宽大垂直直径的大小,计算肿瘤体积.用药结束后2天,处死裸鼠,取出肿瘤组织,称重,计算抑瘤率.结果:治疗后各组裸鼠肿瘤体积的生长曲线显示溶剂对照组的生长速度在各时间点上均快于治疗组.进一步统计学分析显示治疗结束时,Gefitinib(200 mg/kg)组的肿瘤体积明显小于溶剂对照组(P=0.02);而Gefitinib(100 mg/kg)组和溶剂对照组相比,肿瘤体积的变化则无显著性差异(P=0.163),DDP组以及Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组的肿瘤体积皆明显小于溶剂对照组(P值分别为0.007和0.001),DDP组与Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组的肿瘤体积的比较则无显著性差异.Gefitinib(100 mg/kg)组抑瘤率26.3%,Gefitinib(200 mg/kg)组抑瘤率30.6%,DDP组抑瘤率45.7%,Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组抑瘤率54.8%.Gefitinib(100mg/kg)组与溶剂对照组相比,治疗结束后平均瘤重无显著性差异;Gefitinib(200 mg/kg)组、DDP组、Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组与溶剂对照组平均瘤重皆有显著性差异,DDP组与Gefitinib(100 mg/kg)+DDP组平均瘤重无显著性差异.结论:Gefitinib对CNE2鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤的生长具有抑制作用,其与DDP合用未能显著增强DDP的抗CNE2鼻咽癌荷瘤裸鼠移植瘤的效果.

Despite recent improvements to current therapies and the emergence of novel agents to manage advanced non-smal celllung cancer (NSCLC), the patients′overal survival remains poor. Re-chal enging with first-line chemotherapy upon relapse is common in the management of smal celllung cancer but is not wel reported for advanced NSCLC. NSCLC relapse has been attributed to acquired drug resistance, but the repopulation of sensitive clones may also play a role, in which case re-chal enge may be appropriate. Here, we report the results of re-chal enge with gemcitabine plus carboplatin in 22 patients from a single institution who had previously received gemcitabine plus platinum in the first-line setting and had either partial response or a progression-free interval of longer than 6 months. In this retrospective study, the charts of patients who underwent second-line chemotherapy for NSCLC in our cancer center between January 2005 and April 2010 were reviewed. Al the patients who received a combination of gemcitabine and carboplatin for re-challenge were included in the study. These patients were offered second-line treatment on confirmation of clear radiological disease progression. The overall response rate was 15%and disease control rate was 75%. The median survival time was 10.4 months, with 46%of patients alive at 1 year. These results suggest that re-chal enge chemotherapy should be considered in selected patients with radiological partial response or a progression-free survival of longer than 6 months to the initial therapy.

非小细胞肺癌中EGFR基因状态的检测对EGFR-TKIs疗效的预测价值

近几年,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是肿瘤学药物研发的一个重要靶点.EGFR的小分子抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)成为目前非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗的热点.临床研究表明,EGFR-TKIs的临床疗效存在明显的个体差异,EGFR 分子的存在状态影响TKI的疗效.EGFR 外显子突变、EGFR拷贝数增加的患者TKI的疗效较好,而存在KRAS突变患者提示对TKI耐药.

人肺癌EGFR基因突变与Gefitinib耐药相关性研究

背景与目的 以人肺癌细胞株PC9及其耐药子系细胞PC9/AB2、PC9/AB11、PC9/BB4为模型,观察4株细胞对Gefitinib的耐药差异及耐药机制.方法 体外培养细胞测定耐药指数,对4株细胞EGFR基因exon18-21进行测序并在mRNA水平上的测定表达量差异.结果 PC9及其3株耐药子系细胞均存在耐药性差异.PC9及其3株耐药子系细胞均存在19外显子15 bp缺失突变并且耐药细胞株PC9/AB11外显子20存在A→G的点突变.敏感细胞株PC9的EGFR基因在mRNA水平上的表达量明显高于其他3株耐药株.结论 PC9、PC9/AB2、PC9/AB11和PC9/BB4肺癌细胞株对Gefitinib的耐药性存在非常显著的差异,4株肺癌细胞株EGFR基因突变和mRNA表达水平的差异与其与Gefitinib获得性耐药有关.

中国的非小细胞肺癌Gefitinib分子靶向治疗

目的探讨非小细胞肺癌gefitinib分子靶向治疗的国内经验.方法收集国内7个医院未经正式发表的用gefitinib治疗晚期非小细胞肺癌的资料,重点分析广东省肺癌研究所的病例情况.结果自2001年7月至2003年12月,共有282例晚期非小细胞肺癌接受gefitinib治疗.有效率为22.2%～47.7%,疾病控制率为62.6%～81.8%.没有观察到明显的毒副作用.结论gefitinib可安全有效地用于国内的晚期非小细胞肺癌.

EGFR抑制剂gefitinib对人胶质瘤细胞U251抑制作用的研究

背景与目的:使用小分子靶向药物治疗胶质瘤是神经肿瘤领域的研究热点.本文探讨EGFR抑制剂gefitinib对人胶质瘤细胞U251的抑制作用.方法:用不同浓度gefitinib作用于U251细胞72h后,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度gefitinib作用后细胞的生存率;流式细胞术分析不同浓度gefitinib作用U251细胞72h后细胞周期的变化；Western blotting法检测不同浓度gefitinib作用后,U251细胞周期相关蛋白表达量的变化.结果:MTT结果显示与对照相比,不同浓度gefitinib作用U251细胞72h后,细胞增殖抑制率均具有显著性差异(P＜0.05),并呈浓度依赖关系,半数抑制浓度(IC50)为18.01 μmol/L.细胞周期检测结果显示,随着gefitinib 浓度的增加,G0/G1期细胞数逐渐增加,而S+G2/M期细胞的比例明显降低,说明gefitinib阻滞U251细胞于G0/G1期.Western blotting分析结果显示gefitinib对U251细胞的G0/G1期阻滞主要通过下调细胞周期依赖蛋白激酶CDK2 、CDK4与细胞周期素cyclin E的表达,同时上调p21的表达,介导周期阻滞来实现.结论:gefitinib可能通过细胞周期的G0/G1期阻滞,体外抑制人胶质瘤细胞的生长,这为gefitinib治疗恶性脑胶质瘤提供了一定的理论基础.但对于gefitinib的研究还需进一步深入,以明确其治疗机制及疗效.