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D-酪氨酸联合万古霉素对体外耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及生物膜的消除作用研究
目的 观察D-酪氨酸(D-tyrosine)联合万古霉素对体外培养耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其生物膜的消除作用,旨在为假体周围感染(PJI)的临床治疗提供可行性依据.方法 导片法建立体外M RSA生物膜模型,将实验分为空白组,D-酪氨酸组,万古霉素组,联合组(D-酪氨酸+万古霉素),每组干预1h、6h、12h、24h后分别用结晶紫及荧光染色,分别在高倍镜及激光共聚焦显微镜(CLSM)下观察不同组M RSA及其生物膜的变化情况.结果 除空白组外其他组中细菌密度随时间增加而降低,D-酪氨酸和联合组明显,每组之间均有统计学差异;12小时内万古霉素组及联合组中死菌比例会随着时间增加而增加,且联合组与万古霉素组比较有统计学意义(P<0.05),12小时后万古霉素组死菌比例无明显变化,联合组死菌比例进一步增加.结论D-酪氨酸对体外培养M RSA生物膜具有分散作用;D-酪氨酸联合万古霉素对生物膜中的M RSA具有更好的消除作用.
关键词： 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 细菌生物膜 D-酪氨酸 万古霉素 假体周围感染 -
D-酪氨酸与3,3'-二氨基二丙基胺对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜形成与分散的影响
目的 探讨生物膜分散物质D-酪氨酸与3,3'-二氨基二丙基胺对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜的影响.方法 从住院患者痰标本中分离并筛选出40株多重耐药鲍曼不动杆菌,用96孔板培养结合结晶紫染色法观察其生物膜形成能力并绘制生物膜生长曲线,另分析D-酪氨酸与3,3'-二氨基二丙基胺两种分散物质对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜的影响,再进行活菌计数以评估两种分散物质的杀菌效果.结果 40株多重耐药鲍曼不动杆菌有37株成膜能力阳性.生物膜的生长经历指数生长期(0～24 h)、平台期(24 ～42 h)和衰退期(42～54 h)3个阶段.与对照组相比,0.1 mmol/L 3,3'-二氨基二丙基胺作用JYK-0301、JYK-0302和JYK-0303号菌株24h后,吸光度(A570nm)显著降低(t值分别为6.92、9.63和9.01,P值均＜0.05);且用0.1 mmol/L的3,3'-二氨基二丙基胺处理JYK-0301菌株24 h后可使平均活菌计数由3.10×108±8.83×107 CFU/mL减至21.6±10.78 CFU/mL(t =4.31,P＜0.05).与对照组相比,0.1 mmol/L 3,3'-二氨基二丙基胺作用JYK-0301、JYK-0302和JYK-0303的成熟生物膜24 h后A570nm显著减少,差异有统计学意义(t值分别为3.76、5.67和3.98,P均＜0.05);且1 mmol/L的3,3'-二氨基二丙基胺作用JYK-0301成熟生物膜24 h后可使平均活菌计数由2.83×109±1.02×109 CFU/mL减少至1.07×103±8.20×102 CFU/mL(t=6.34,P＜O.05).与未加D-酪氨酸的对照组比较,不同浓度D-酪氨酸作用JYK-0301、JYK-0302、JYK-0303及其成熟生物膜24 h后,A570nm差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 3,3'-二氨基二丙基胺能有效抑制多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜的形成,且能分散成熟生物膜,具有一定杀菌作用.而D-酪氨酸对多重耐药鲍曼不动杆菌生物膜无类似能力.
