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特发性高草酸尿症大鼠肝脏差异表达基因的筛选研究
目的 从基因水平探索特发性高草酸尿症(IH)的发病机制,筛选可能导致其发病的相关基因.方法应用含有26 962条大鼠全基因组寡核苷酸芯片,研究3只IH模型大鼠和3只正常大鼠肝脏组织基因表达谱的差异性,同时进行生物信息学分析.结果 在IH模型大鼠与正常大鼠肝脏组织之间存在差异表达基因147条,其中上调基因123条,下调基因24条,包括细胞受体、免疫相关、细胞信号和传递蛋白、代谢蛋白、发育相关等多种基因.结论 基因芯片能有效筛选出IH模型大鼠肝脏中的差异基因,显著的基因差异表达与其发病机制可能存在相关性.
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特发性高草酸尿症大鼠肝脏差异蛋白质的筛选
目的 寻找特发性高草酸尿症大鼠肝脏组织差异表达的蛋白质.方法 取3只雄性特发性高革酸尿症大鼠和3只正常对照雄性大鼠,分别取其肝脏组织约300 mg后提取其中的总蛋白.以荧光差异显示凝胶电泳(DIGE)技术分离肝脏中的全部蛋白质,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)和DeCyderTM v6.5软件进行蛋白质的分析和鉴定.结果 总共筛选出21个差异表达蛋白质点,其中11个蛋白质点在特发性高草酸尿症组表达上调,10个蛋白质点下调.终有18个差异蛋白质点被鉴定确认.结论 筛选出的这些差异蛋白质可能与特发性高草酸尿症有关.
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特发性高草酸尿大鼠模型的建立
目的 建立特发性高草酸尿(IH)的大鼠模型.方法 将第1代72只SD大鼠(雌雄各半)分别置于大鼠代谢笼中,在适应饮食5 d后收集连续2 d的24 h尿,用离子色谱仪测定24 h尿草酸排泄量.将第1代大鼠中尿草酸排泄量高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配,按同样的方法检测其子代(作为近交系)的24 h尿草酸排泄量,再选择尿草酸排泄量高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配.依此类推,连续对每代大鼠进行检测、筛选和近交传代至第5代.结果 根据第1代大鼠的检测值确定大鼠24 h尿草酸排泄量的正常值范围(x ±2s):雄性为(4.82±2.94) mg;雌性为(5.21±3.26) mg.第5代近交系大鼠24 h尿草酸排泄量(x ±s):雄性为(12.54±2.46) mg (n=16);雌性为(13.51±2.63) mg (n=16).将24 h尿草酸排泄量高于正常值范围且在2.5倍以内的大鼠定义为IH大鼠,则在第5代近交系大鼠中,雌、雄性IH大鼠的出现率均超过90%.结论 该实验建立的IH大鼠模型可稳定传代,可用于IH的病因学研究.
