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  • PKCε信号通路介导甘青铁线莲活性成分APG抗心肌缺血再灌注损伤的机制研究

    作者:冯颖达;冯建宇;杨阳;狄守印;张伟;陆云阳;汤海峰;朱艳荣

    目的 研究不同浓度甘青铁线莲活性成分APG对H9C2大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的机制.方法 体外培养H9C2大鼠心肌细胞,经2 μM/L和4 μM/L的APG预处理24 h后,建立缺氧复氧损伤模型(I/R)(缺氧45 min,复氧3 h).采用CCK-8法检测细胞活力,检测细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)的释放量、丙二醛(MDA)的释放量和细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力;采用Western Blot法检测细胞内蛋白激酶Cε(PKCε)、Caspase-3、Bax和Bcl-2表达情况,使用特异性PKCε抑制剂CHE观察PKCε信号通路在此过程中的作用.结果 I/R处理可抑制H9C2细胞活性,细胞培养基中LDH、MDA含量升高,SOD活力降低(与Control组比较,P<0.05).抑制PKCε表达,上调Caspase-3表达,下调Bcl-2/Bax比例(与Control组比较,P<0.05).2 μM/L和4 μM/L的APG预处理均可发挥细胞保护作用,降低LDH与MDA释放量,提高SOD活力(与I/R组比较,P<0.05).此外,APG处理对抗了I/R损伤引起的PKCε表达下调,抑制Caspase-3表达,提高了Bcl-2/Bax比例(与I/R组比较,P<0.05).CHE处理后细胞活力下降,Caspase-3表达上调,Bcl-2/Bax比例下降,凋亡增加(与APG+I/R组比较,P<0.05).结论 甘青铁线莲中活性成分APG可减轻心肌缺血再灌注损伤,其机制可能是激活PKCε相关信号通路,终抑制心肌细胞凋亡.

  • 响应面法优化超声提取甘青铁线莲总黄酮工艺

    作者:李杨;张伟;赫雪锋;汤海峰

    目的 通过响应面法优化甘青铁线莲总黄酮的超声提取工艺.方法 在乙醇体积分数、提取时间、液料比3个单因素试验的基础上,对总黄酮提取率建立Box-Behnken中心组合试验设计,模拟二次回归模型,通过响应面分析,对超声提取甘青铁线莲总黄酮工艺进行优化.结果 通过模型分析和可行性修正,发现乙醇体积分数对于总黄酮提取率影响为显著,得到佳提取条件为乙醇体积分数80%,提取时间44 min,液料比30.5∶1,大提取率可达1.266%.结论 响应面法能够有效优化甘青铁线莲总黄酮的超声提取工艺.

  • 甘青铁线莲的黄酮苷类成分研究

    作者:张伟;陆云阳;李媛;海文利;文爱东;汤海峰

    目的 研究甘青铁线莲Clematis tangutica全草的黄酮类成分.方法 甘青铁线莲全草经乙醇提取,依次用石油醚、水饱和正丁醇萃取,对正丁醇部位采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱及半制备型HPLC等方法进行分离,根据理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构.结果 分离并鉴定了6个黄酮苷类化合物,分别为芹菜素-7-O-β-D-(-6"-p-香豆酰基)-吡喃葡萄糖苷(1)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、异荭草素(3)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃半乳糖苷(4)、木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)和芹黄春(6).结论 化合物1为首次从铁线莲属中获得,所有化合物均为首次从该种植物中获得.

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