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过表达TRAIL联合特异性沉默Eag1的协同抗骨肉瘤作用
目的：检测过表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体( TNF-related apoptosis-inducing ligand， TRAIL )联合特异性沉默 Ether à go-go 1( Eag 1)基因对骨肉瘤的影响。方法分别构建名为 Ad5. eGFP、CRAd5. siEag、CRAd5. TRAIL 和 CRAd5. TRAIL / siEag1的腺病毒载体并检测其抗骨肉瘤的作用。结果Ad5. eGFP 对 MG-63细胞中的 Eag 1和 TRAIL 表达无明显影响，CRAd5. siEag 仅可抑制 Eag 1的表达，CRAd5. TRAIL 仅可过表达 TRAIL，而 CRAd5. TRAIL / siEag1既能沉默 Eag 1又能过表达 TRAIL。细胞增殖实验结果显示：CRAd5. TRAIL / siEag1比 Ad5. eGFP、CRAd5. TRAIL 或 CRAd5. siEag1能更有效地抑制骨肉瘤细胞增殖。同时，对人成骨细胞 hFOB 1.19无明显细胞毒性。CRAd5. TRAIL / siEag1组 Caspase-3/7活性为(39693.33±1922.96) RLU，Ad5. eGFP、CRAd5. siEag1和 CRAd5. TRAIL 组 Caspase-3/7活性分别为：(2832.83±375.99)、(3242.50±329.97)和(15583.17±698.54) RLU。统计学分析显示 CRAd5. TRAIL / siEag1组 Caspase-3/7活性明显高于其它三组( P＜0.001)。此外，CRAd5. TRAIL / siEag1还可有效地诱导 MG-63细胞中 PARP 裂解物表达。局部注射第8天，CRAd5. TRAIL / siEag1组裸鼠肿瘤的体积为(231.19±25.96) mm3，Ad5. eGFP、CRAd5. siEag1和 CRAd5. TRAIL 组裸鼠肿瘤体积分别为：(504.68±102.32)、(365.85±47.60)和(355.48±35.34) mm3，CRAd5. TRAIL 组裸鼠肿瘤体积与其它三组相比差异均有统计学意义( P＜0.05)。第10、12和14天，CRAd5. TRAIL / siEag1组裸鼠肿瘤的体积分别为：(367.82±39.52)、(470.18±60.11)和(631.52±61.22) mm3，Ad5. eGFP、CRAd5. siEag1和 CRAd5. TRAIL 组裸鼠肿瘤体积分别为：(826.57±130.60)、(1284.69±243.50)和(1762.06±180.36) mm3，(552.12±64.39)、(721.82±108.20)和( 949.20±124.70) mm3，(524.03±43.47)、(653.54±56.22)、(896.44±93.64) mm3。与其它三组相比，CRAd5. TRAIL / siEag1可更有效地抑制裸鼠骨肉瘤生长。TUNEL 实验结果显示：CRAd5.TRAIL / siEag1的凋亡指数为(27.33±2.07)%，而Ad5. eGFP、CRAd5. siEag1和 CRAd5. TRAIL 组的凋亡指数分别为(2.68±0.64)%，(8.49±1.06)% 和 (15.99±1.94)%，CRAd5. TRAIL / siEag1组与其它三组相比可有效地促进骨肉瘤凋亡( P＜0.001)。结论过表达 TRAIL联合特异性沉默 Eag 1基因可产生协同抗骨肉瘤作用，因此 CRAd5. TRAIL / siEag1腺病毒载体可作为一个有效的骨肉瘤基因治疗工具。
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TRAIL 对人胃癌耐药细胞株 SGC-7901/VCR多药耐药基因 GST-π表达的影响
背景：肿瘤细胞的多药耐药现象是导致进展期胃癌化疗失败的重要因素之一。肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）能增强化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用，并逆转耐药细胞株为敏感细胞株，但其确切机制尚不清楚。目的：研究 TRAIL 对人胃癌耐药细胞株 SGC-7901/ VCR 多药耐药基因谷胱甘肽硫转移酶-π（GST-π）表达的影响，探讨其逆转胃癌细胞多药耐药的可能机制。方法：以不同浓度 TRAIL（50、100、200、400μg/ L）干预 SGC-7901/ VCR细胞48 h，采用 RT-PCR 和 ELISA 法检测各组 SGC-7901/ VCR 细胞中的 GST-π mRNA 表达和细胞培养上清液中的GST-π含量。结果：TRAIL 干预能抑制 SGC7901/ VCR 细胞的 GST-π mRNA 表达及其蛋白分泌，抑制作用在一定剂量范围内（≤200μg/ L）具有量效关系。50、100、200、400μg/ L TRAIL 组 GST-π mRNA 相对表达量分别为0.89±0.04、0.77±0.08、0.65±0.06和0.61±0.03，细胞培养上清液中的 GST-π含量分别为（57.56±1.19）ng/ mL、（56.30±0.80）ng/ mL、（31.41±1.65）ng/ mL 和（30.80±1.34）ng/ mL，均低于对照组的1.01±0.13和（58.62±1.38）ng/ mL，差异有统计学意义（P ＜0.05）。结论：TRAIL 可能通过下调 GST-π表达参与了胃癌细胞多药耐药的逆转。
关键词： 胃肿瘤 TNF 相关凋亡诱导配体 谷胱甘肽转移酶 多药耐药 -
肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体及其受体3、4在结直肠癌组织中的表达及意义
目的：探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（TRAIL）信号通路在结直肠癌发病机制中的作用。方法取41例结直肠癌组织（结直肠癌组）和癌旁正常组织（正常组），免疫组化法测定两组组织中TRAIL 及 TRAILR3、TRAILR4蛋白的表达。结果结直肠癌组织 TRAIL、TRAILR3的阳性率与正常组差异均无统计学意义（88％与90％；95％与93％，χ2＝0．125、0．213，均 P ＞0．05），但两者的阳性表达强度显著低于正常组[（0．237±0．036）与（0．289±0．069）；（0．226±0．052）与（0．281±0．068），t ＝4．125、4.025，均 P ＜0.01]；两者的阳性表达强度在低分化癌组织中显著低于高中分化癌[（0．205±0．021）与（0．245±0．034）；（0．185±0．032）与（0．236±0．051），t ＝4．025、2．664，P ＜0．01、P ＜0．05]，但与淋巴结转移无关[（0．235±0.035）与（0．241±0．338）；（0．216±0．048）与（0．231±0．054），t ＝0.448、0．862，均 P ＞0．05]。结直肠癌组TRAILR4蛋白的阳性率和阳性表达强度与正常组差异均无统计学意义[93％与98％；（0．196±0．085）与（0.219±0．061），χ2＝1．051、t ＝1．353，均 P ＞0．05]，还与癌分化程度、淋巴结转移无关[（0．176±0．052）与（0．201±0．091）；（0．194±0．054）与（0．197±0．100），t ＝0．667、0．448，均 P ＞0．05]。结论TRAIL 和TRAILR3在结直肠癌组织中表达下降，且与 Gleason 分级相关，它们可作为结直肠癌的预后指标。
关键词： 结直肠肿瘤 TNF 相关凋亡诱导配体 信号传导 -
慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞表达研究
目的 分析慢性乙型肝炎患者体内NK细胞的表达情况.方法 采集慢性乙型肝炎患者33例及健康对照者35例,分离外周血单个核细胞,采用流式细胞仪测定NK细胞表型及TRAIL(TNF相关凋亡诱导配体)表达水平.结果 慢性乙型肝炎患者与健康对照者相比较,外周血总的NK细胞频率显著降低;CD5brightNK亚群明显上升,而CD56dim亚群明显下降.且NK细胞表达TRAIL比健康对照者明显增高(P＜0.05).结论 高表达TRAIL的NK细胞可能与慢性乙型肝炎患者肝损伤机制相关.
关键词： nK 细胞 慢性乙型肝炎 TNF 相关凋亡诱导配体
