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体外循环血清对A549细胞的损伤和N-乙酰半胱氨酸的影响
目的:研究体外循环血清对肺泡上皮细胞的损伤作用以及N-乙酰半胱氨酸的保护作用.方法:将体外循环术后血清在体外与肺腺癌上皮细胞株A549细胞共同孵育,实验分为对照组、实验组和用药组(n均=8),在2 h、8 h和18 h测定细胞上清液中的丙二醛,并利用电镜、脱氧核糖核酸(DNA)电泳、原位凋亡检测及bcl-2蛋白免疫组化等方法观察A549细胞的损伤情况,用N-乙酰半胱氨酸进行干预研究.结果:实验组与用药组细胞培养液中丙二醛在加入刺激因素后随时间逐渐升高,18小时达到高峰.实验组、用药组与对照组比差异非常显著.用药组与实验组间也有非常显著的差异(P均＜0.01).实验组细胞脱落渐进性增加,细胞呈损伤性改变,部分细胞膜不完整,或细胞边缘模糊不清.透射电镜见A549染色质凝集,它是凋亡特征之一,用药组形态较完整.实验组与对照组相比差异非常显著,用药组成活率明显较实验组高(P＜0.01).实验组DNA电泳后可见明显的梯带,表明DNA碎裂明显.原位凋亡检测示实验组凋亡率明显高于对照组,用药组凋亡率低于实验组(P＜0.01);而免疫组化示实验组bcl-2的积分光密度值和平均光密度值均十分显著的高于对照组(P＜0.01),用药组较对照组也有显著升高(P＜0.05～0.01). 结论:体外循环血清在体外能引起A549细胞凋亡,氧自由基可能起了很重要的作用,N-乙酰半胱氨酸能减轻A549的损伤,体外循环术中应用N-乙酰半胱氨酸等药物可能会减轻术后呼吸功能不全的发生率.
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乌司他丁对人心脏微循环内皮细胞体外循环血清损伤的作用
目的 探讨不同剂量乌司他丁(ulinastatin,UTI)对人心脏微循环内皮细胞(Human Cardiac microvascular endothelial cell,HCMEC)体外循环血清损伤的作用.方法 以体外培养的HCMEC为研究细胞,分为5组:空白对照组;体外循环组;UTI大剂量组(1000 U/mL);UTI中剂量组,(500 U/mL);⑤UTI小剂量组(100 U/mL).每组各9个培养皿.记录各组细胞存活率;检测各组细胞上清液中NO(Nitric oxide)、ET-1(endothelin-1)的含量.结果(1)空白对照组相对细胞存活率高于体外循环组(<0.05),而体外循环组相对细胞存活率低于UTI各剂量组(<0.05),UTI大剂量组相对细胞存活率明显高于UTI中小剂量组(<0.05);(2)体外循环组NO、ET-1均高于空白对照组(<0.05);(3)UTI各剂量组ET-1低于体外循环组(<0.05),而NO均高于体外循环组(<0.05);(4)UTI大剂量组NO明显高于UTI中小剂量组(<0.05),但ET-1明显低于UTI中小剂量组(<0.05);(5)UTI小剂量组与UTI中剂量组在NO差异无统计学意义(>0.05).结论(1)UTI对人体外循环血清损伤HCMEC的有一定的保护作用;(2)体外循环血清损伤HCMEC过程中,大剂量UTI较中小剂量UTI保护作用好.
关键词： 体外循环血清 人心脏微血管内皮细胞 乌司他丁
