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1例高敏肾移植受者应用蛋白A免疫吸附治疗的护理
目的 研究葡萄球菌蛋白A免疫吸附治疗对群体反应性抗体(PRA)水平的影响.方法 总结1例采用蛋白A免疫吸附治疗等待肾移植的高敏患者的护理.结果 治疗前患者PRA在75%以上,经过5次吸附治疗,患者PRA明显下降.结论 对等待肾移植的高敏患者而言,蛋白A免疫吸附是一种安全有效的辅助治疗手段.专业的护理才能保证治疗的顺利进行.
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压电免疫传感器两种抗体固定方法的比较研究
目的比较压电免疫传感器两种抗体固定方法的优劣,选择压电免疫传感器抗体敏感膜固定的佳方法. 方法分别采用巯基化方法和蛋白A(SPA)固定法将抗人胰岛素单克隆抗体固定在压电免疫传感器金膜电极表面,比较不同抗体工作浓度、不同浓度标准溶液反应条件下抗体固定量、一致性以及传感器响应能力如频率变化、反应时间、检测线性范围以及反应非特异性等. 结果两种固定方法制备的压电免疫传感器其检测灵敏度、反应时间相当,但巯基化固定方法抗体固定量大、一致性好、检测线性范围较宽、非特异反应低. 结论抗体巯基化法制备的压电免疫传感器具有检测范围宽、非特异反应低等优点,是免疫传感器抗体敏感膜制备的理想方法.
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肾移植后急性体液性排斥反应的治疗
背景:肾移植后急性体液性排斥反应是一类人类白细胞抗原抗体介导的排斥反应,常导致移植物丧失功能.目前,强效免疫抑制剂和B 淋巴细胞抑制剂的应用使急性体液性排斥反应的逆转率明显提高.目的:探讨肾移植后急性体液性排斥反应的治疗方案.方法:对20 例发生急性体液性排斥反应的肾移植受者进行回顾性分析,患者给予抗胸腺球蛋白、蛋白A 免疫吸附和大剂量丙种球蛋白联合治疗,所有患者均在蛋白A 免疫吸附初次治疗前和末次治疗后留血标本测定群体反应性抗体和血清免疫球蛋白IgG,IgA,IgM.结果与结论:20 例患者急性体液性排斥反应均有效逆转.随访48 个月,1 例患者在移植后5 个月时因合并严重的肺部感染而停用免疫抑制剂,继而发生剧烈的急性排斥反应而行移植肾切除,恢复血液透析,其余患者移植肾功能良好,至随访终点时平均血肌酐浓度为(132.6±44.2)μmol/L.提示,抗胸细胞球蛋白联合蛋白A 免疫吸附和大剂量丙种球蛋白能够有效逆转肾移植后急性体液性排斥反应,成功率高,并发症少,且完全逆转的急性体液性排斥反应并不影响移植肾的预后.
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免疫吸附疗法
免疫吸附(immunoadsorption,IA)疗法是近十五年来发展起来的一种新技术,用于治疗一些传统方法难以奏效的疾病.它将抗原、抗体或某些具有特定物理化学亲和力的物质作为配基与载体结合,制成吸附柱,利用其特异性吸附性能,选择性或特异性地清除患者血液中内源性致病因子,从而达到净化血液、缓解病情的目的.2001年,在英国伦敦召开了欧洲第一届免疫吸附研讨会,来自17个国家的200多位专家学者参加了会议,重点讨论了IA在风湿病、肾脏病、神经系统疾病、血液病和心血管疾病中应用的经验.IA已成为一项重要的血液净化技术.现将IA疗法作一简述.
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金黄色葡萄球菌蛋白A Z结构域的原核表达及多克隆抗体的制备
目的：制备金黄色葡萄球菌蛋白A（SpA）Z结构域的原核表达蛋白及其多克隆抗体，并对其进行特异性鉴定。方法：3段SpA-Z结构域经柔性肽（GS）串联连接构成三串联体（SpA-3Z），经原核密码子优化后全基因合成，克隆至pET21a（+）载体，构建pET21a（+）/SpA-3Z重组质粒，测序鉴定；将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），经异丙基硫代-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达重组蛋白，用Ni-NTA亲和层析法纯化并经SDS-PAGE及Western Blot法分析鉴定；纯化的SpA-3Z重组蛋白免疫日本大耳白兔，并分别于免疫前和免疫后采集血清，用ELISA法检测其多克隆抗体的反应和效价，并用Western Blot法分析多克隆抗体结合天然SpA的特异性。结果：成功构建了pET21a（+）/SpA-3Z重组质粒；该重组质粒在原核表达系统表达并获得纯化的SpA-3Z重组蛋白，SDS-PAGE电泳显示该蛋白的分子质量约为21 kDa，与理论分子量大小相符；日本大耳白兔经该蛋白免疫后可产生特异性的多克隆血清IgG抗体，效价可达1：40000；Western Blot法检测结果显示，在分子质量约42 kDa（天然SpA蛋白）处出现单一条带，提示兔多克隆血清抗体可识别天然SpA。结论：SpA-3Z原核蛋白有较好的免疫原性和抗原性，制备的SpA-3Z兔多克隆血清抗体IgG效价高、特异性好，可进一步用于SpA-Z相关的生物学和免疫学等功能研究。
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牛源金黄色葡萄球菌spa基因多态性分型研究
目的 为了研究引起奶牛乳房炎的主要病原菌金黄色葡萄球菌的35个分离株进行spa基因多态性分型研究.方法 在河北、内蒙古、山东、黑龙江、湖北、河南等省份采集奶牛乳房炎奶样,经实验室分离鉴定,从中择35株金黄色葡萄球菌, 采用PCR方法 扩增spa基因的X区域,测序后根据数据库(http://www.ridom.de/spaserver/)进行分型.结果 35株菌可分成11个型,分别为t521型有8株,t518型和t2788型各5株,t246型和t519型各4株,t359型和t2756型各3株,t189型、t224型、t267型、t2759型各有1株;同时发现3个新型,分别为t2788、 t2756、t2759.结论 研究显示spa基因分型方法 具有快速、分辨力强、易于标准化等特点,可用于牛源金黄色葡萄球菌的基因分型及生态学等研究.
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蛋白A免疫吸附在高敏肾移植受者中的应用
目的:研究葡萄球菌蛋白A免疫吸附治疗对群体反应性抗体(PRA)水平的影响.方法:采用SPA吸附系统对8例等待肾移植的高敏患者进行免疫吸附治疗和临床移植观察.结果:治疗前患者PRA在75%以上,经过5～7次吸附治疗,患者PRA明显下降.所有患者都顺利接受移植,术后未发生超急性或急性排斥反应,肾功能得以恢复.结论:对等待肾移植的高敏患者而言,蛋白A免疫吸附是一种安全有效的辅助治疗手段.在术前进行吸附并配合良好的护理措施能阻止超排发生并提高移植物的存活率.
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抗CD52单克隆抗体中残留蛋白A ELISA定量检测方法的验证
目的 验证抗CD52单克隆抗体( 单抗) 中残留蛋白A( ProteinA,ProA) ELISA定量检测方法.方法使用Cygnus公司的Mix-N-Go ProteinA检测试剂盒,对抗CD52单抗中的ProA残留量进行检测,并验证该方法的专属性、准确度、精密度、线性及定量限.结果亲和填料( MabSelect SuRe) 稀释1 000倍后仍检测到含有ProA 1.9 ng /mL;制剂及抗CD52单抗细胞发酵液中未检出ProA;3种不同ProA加标质量浓度6次试验的加标回收率均在80％ ～ 120％之间;3种不同ProA加标质量浓度重复性检测结果及中间精密度检测结果RSD均＜20％;分别对3次ProA残余检测结果绘制的四参数标准曲线,R2均＞0.990;定量限为0.16 ng /mL.结论经验证,抗CD52单抗中ProA残留量的ELISA定量检测方法专属性好,准确度、精密度高且线性良好.
关键词： 抗CD52单克隆抗体 蛋白A 检测 残留物 酶联免疫吸附测定
