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卵巢和腹壁子宫内膜异位症雌孕激素受体亚型的表达研究
目的 通过检测子宫内膜位症患者正常和异位内膜中的雌孕激素受体亚型的表达,探讨其与子宫内膜异位症发病的关系.方法 收集经临床和病理确认的育龄期卵巢子宫内膜异位症52例和腹壁瘢痕子宫内膜异位症6例为实验组;育龄期正常子宫内膜36例为对照组.应用免疫组织化学方法检测异位和在位子宫内膜组织中雌激素受体亚型(ERα、ERβ1、ERβ2)、孕激素受体亚型(PRA、PRB)表达.结果 卵巢异位内膜腺上皮组ERβ1、PRA、PRB表达均明显低于对照组,腹壁异位子宫内膜组的ERβ1、PRB表达也明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);此外卵巢异位内膜间质细胞ERβ1、PRB表达均明显低于对照组,腹壁异位子宫内膜组的ERβ1、ERβ2、PRB表达也明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 无论是卵巢还是腹壁子宫内膜异位,异位内膜性激素受体亚型表达与正常内膜存在明显差异,提示与内膜异位症发病有密切关系.
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孕激素受体a、b在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义
目的探讨孕激素受体a（PR-a）、孕激素受体b（PR-b）在乳腺浸润性导管癌（IDC）中的表达及其与各临床病理指标的相关性，探讨PR亚型与预后的关系。方法采用免疫组化法检测100例IDC组织中PR-a、PR-b的表达，分析其与雌激素受体α（ER-α）、雌激素受体β（ER-β）、人类表皮生长因子受体2（HER-2）、核增殖抗原Ki-67、淋巴结转移、细胞学分级、TNM分期及脉管癌栓的相关性，研究PR-a/PR-b比值与各指标的关系。结果PR-a阳性55例（55%），PR-b阳性58例（58%）。PR-a与HER-2、Ki-67的表达呈正相关（P<0.05），与淋巴结转移负相关（P<0.05），与ER-β及脉管癌栓负相关（P<0.01），与ER-α、细胞学分级、TNM分期无相关；PR-b与淋巴结转移、细胞学分级、TNM分期负相关（P<0.05），与HER-2、Ki-67及脉管癌栓亦呈负相关（P<0.01），与ER-α、ER-β无相关。PR-a/PR-b＞1者32例（48.5%），=1者18例（27.3%），<1者16例（24.2%）。PR-a/PR-b>1组的HER-2、Ki-67、高细胞学分级、高TNM分期、淋巴结阳性率高于PR-a/PR-b≤1组（P<0.05）。结论 PR-b的表达与HER-2、Ki-67、淋巴结转移、细胞学分级、TNM分期及脉管癌栓均呈负相关，而PR-a与各指标的相关性各不相同，PR-b阳性及PR-a/PR-b≤1可作为IDC预后良好的指标。
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子宫内膜异位症孕激素受体B基因失活与CpG甲基化的关系
目的 探讨子宫内膜异位症孕激素受体B(progesterone receptor,PRB)基因失活与CpG甲基化的关系.方法 采用甲基化PCR法检测62例子宫内膜异位症患者(病例组)和33例宫颈上皮内瘤样变行子宫切除患者(对照组)在位子宫内膜孕激素受体PRA与PRB CpG的甲基化率,免疫组化法测定PRA和PRB的阴性表达率,并分析甲基化与PRA和PRB的阴性表达率的相关性.结果 病例组与对照组患者在位子宫内膜PRA的甲基化率间差别无统计学意义(P＞0.05),而PRB的甲基化率间差别有统计学意义(P＜0.01).病例组与对照组患者PRA的阳性表达率间差别无统计学意义(P＞0.05),而PRB的阳性表达率间差别有显著性意义(P＜0.01).病例组患者PRB的甲基化与免疫组化PRB的阴性表达率相关(P＜0.01).结论 CpG甲基化可能与子宫内膜异位症患者PRB基因表达缺失而致病有关.
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雌激素硫酸基转移酶及孕激素受体蛋白表达与子宫肉瘤发病关系研究
目的 探讨雌激素硫酸基转移酶(SULT1E1)和孕激素受体蛋白(PR)在子宫肉瘤组织中的表达并分析其与子宫肉瘤发病的相关性.方法 选取2001-2010年中国医科大学附属盛京医院妇产科收治的子宫肉瘤病人石蜡病理切片46例(子宫内膜间质肉瘤31例,子宫平滑肌肉瘤15例),取宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ级或子宫脱垂病人的正常子宫肌层组织石蜡病理切片20例作为对照.用免疫组化法对子宫肉瘤组织的SULT1E1、pR蛋白进行检测.结果 子宫内膜间质肉瘤组及子宫平滑肌肉瘤组分别与正常子宫肌层组SULT1E1蛋白阳性率比较,差异均有统计学意义(均P＜0.05);子宫内膜间质肉瘤组与子宫平滑肌肉瘤组PRA蛋白、PRB蛋白阳性率比较差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).子宫内膜间质肉瘤组织中SULT1E1与PRA、PRB蛋白之间均呈负相关关系(分别r=-0.389,P=0.031;r=-0.421,P=0.018).结论 子宫肉瘤的发生、发展与子宫肉瘤组织SULT1E1蛋白表达降低或缺失有关;在子宫内膜间质肉瘤组织中SULT1E1的表达与孕激素受体A、B表达均呈负相关.
关键词： 子宫肉瘤 孕激素受体A 孕激素受体B 人雌激素硫酸基转移酶 免疫组化 -
miR-23及孕激素受体蛋白在子宫肌瘤组织中表达及临床意义研究
目的 探讨miR-23和孕激素受体(PR)蛋白在子宫肌瘤组织中的表达及临床意义.方法 分别用realtime-PCR法及western blot法对2013年12月至2014年6月中国医科大学附属盛京医院30例子宫肌瘤组织、30例相应肌瘤包膜外子宫肌层组织及10例因子宫脱垂行子宫切除术的子宫肌层组织中的miR-23和PR蛋白进行检测,并用SPSS17.0统计分析软件对检测结果进行统计及相关性分析.结果 miR-23在相应包膜外子宫肌层组及正常子宫肌层组表达显著高于子宫肌瘤组织(P＜0.001).孕激素受体A(PRA)、孕激素受体B(PRB)蛋白在相应包膜外子宫肌层组及正常子宫肌层组表达显著低于子宫肌瘤组织(P＜0.001).比较相应包膜外子宫肌层组与正常子宫肌层组中PRA、PRB蛋白的相对含量,PRA相对含量差异无统计学意义(P=0.198),PRB相对含量差异有统计学意义(P=0.035).在子宫肌瘤组织中,PRA、PRB蛋白表达差异无统计学意义(P=0.389).miR-23与PRA蛋白表达之间存在负相关关系(r=-0.754),与PRB蛋白相对含量之间无相关关系(r=-0.394)结论 miR-23与PR共同促进子宫肌瘤的发生与发展.PR为miR-23的靶基因之一,miR-23可能通过转录水平导致PRA蛋白增多.
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PRB介导子宫内膜癌细胞对MPA敏感性的作用机制研究
目的：明确孕激素受体B ( PRB)介导子宫内膜癌细胞对醋酸甲羟孕酮( MPA)的敏感性,及观察干扰 PRB表达,MPA对内膜癌细胞生物学行为的影响。方法利用慢病毒载体系统转染对孕激素敏感的 Ishikawa 细胞,干扰 PRB表达,实时荧光定量PCR ( qPCR)及Western blot检测Ish-ikawa细胞PRB的mRNA和蛋白水平。 MTT法、流式细胞技术( FACS)、Transwell法分别检测MPA对内膜癌细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响；Western blot 检测MPA对子宫内膜癌细胞丝裂原活化蛋白激酶( MAPK)/细胞外信号调节激酶( ERK)信号通路的影响。结果慢病毒载体介导的RNA干扰Ishikawa细胞明显抑制了PRB的mRNA和蛋白表达水平(P<0.01)；MPA对Ishikawa细胞具有抑制增殖、侵袭,并促进凋亡的作用( P<0.01)；干扰PRB表达后,孕激素作用则相反,且激活MAPK/ERK通路。结论 PRB介导了子宫内膜癌细胞对 MPA 的敏感性,干扰 PRB 的表达, MPA可通过激活ERK1/2-MAPK通路,影响内膜癌细胞的生物学行为。
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子宫腺肌病中孕激素受体B表达及甲基化的研究
目的:探讨子宫腺肌痛中孕激素受体B(progesterone receptor B,PR-B)表达及其甲基化在疾病发生中的作用.方法:用免疫组化法测定PR-B的表达,甲基化特异性基因扩增(methylation-specific PCR,MSP)方法检测50例子宫腺肌病患者在位与异位内膜和18例输卵管不孕或良性卵巢囊肿患者子宫内膜中PR-B的甲基化状态,并分析甲基化与PR-B表达的相关性.结果:子宫腺肌病患者在位和异位内膜PR-B表达明显低于对照内膜(P<0.01);子宫腺肌病异位内膜中PR.B甲基化比率显著高于对照内膜(P<0.05);且子宫腺肌病在位和异位内膜中PR-B甲基化状态与PR-B表达相关(P<0.05).结论:PR-B低表达及其甲基化可能与子宫腺肌病的发生有关.
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EGFR过表达降低人子宫内膜癌细胞孕激素敏感性的研究
目的:检测表皮生长因子受体(EGFR)基因在子宫内膜癌孕激素敏感细胞株Ishikawa及孕激素不敏感细胞株KLE的表达,探讨EGFR基因过表达对人子宫内膜癌细胞孕激素敏感性的影响.方法:实时定量PCR法和蛋白印迹法检测Ishikawa和KLE细胞中EGFR及PR-B mRNA和蛋白的表达.将EGFR全长cDNA真核表达质粒在脂质体介导下转染至Ishikawa细胞,同时以转染空载体和未转染的Ishikawa细胞为对照,分别应用实时定量PCR检测各组细胞EGFR、PR-B mRNA表达的变化,应用蛋白印迹法检测各组细胞EGFR、PR-B蛋白表达的变化;CCK-8法观察转染EGFR基因后Ishikawa细胞对孕激素敏感性的变化.结果:(1)Ishikawa细胞中,EGFR mRNA和蛋白的表达明显低于KLE细胞(P<0.001),而PR-B mRNA和蛋白的表达则显著高于KLE细胞(P<0.001);(2)稳定转染EGFR基因后,Ishikawa细胞中EGFR mRNA和蛋白的表达水平明显高于转染空载体和未转染的Ishikawa细胞(P<0.001),而PR-B mRNA和蛋白的表达水平则显著降低;(3)10-8、10-7、10-6、10-5mol/L的MPA对未转染和转染空载体的Ishikawa细胞的抑制作用显著(P<0.05),但对稳定过表达EGFR的Ishikawa细胞无明显抑制作用(P>0.05).结论:转染EGFR基因能有效提高Ishikawa细胞内EGFR基因的表达,但可下调PR-B基因的表达使Ishikawa细胞对MPA不敏感.
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子宫肌瘤细胞中孕激素受体M、A/B及porin蛋白表达观察
目的 观察子宫肌瘤细胞中孕激素受体M(PR-M)、孕激素受体A/B(PR-A/B)及porin蛋白的表达变化,并探讨其意义.方法 子宫肌瘤切除术中切取子宫肌瘤组织及瘤旁正常子宫平滑肌组织后冰上尽快送实验室,原代培养子宫肌瘤细胞和正常子宫平滑肌细胞并鉴定.取第3代子宫肌瘤细胞(实验组)和正常平滑肌细胞(对照组),采用Western blotting法检测细胞中的PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白,分析PR-M、PR-A、PR-B蛋白与porin蛋白表达的相关性.结果 实验组细胞中PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白相对表达量分别为0.130±0.012、0.432±0.052、0.456±0.045、0.525±0.082,对照组分别为0.086±0.015、0.223±0.036、0.269±0.026、0.202±0.034,实验组细胞中PR-M、PR-A、PR-B蛋白和porin蛋白相对表达量均高于对照组(P均<0.01).实验组中PR-M蛋白与porin蛋白相对表达量呈正相关关系(r=0.464,P<0.05).结论 子宫肌瘤细胞中PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白表达升高,PR-M、PR-A、PR-B、porin蛋白表达异常可能与子宫肌瘤的发病有关,且PR-M蛋白与porin蛋白可能在子宫肌瘤发病中起协同作用.
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子宫肌瘤组织SULT1E1和ERα、ERβ、PRA、PRB受体蛋白的表达及临床意义
目的:探讨子宫肌瘤组织SULT1E1、ERα、ERβ、PRA和PRB受体蛋白的表达及临床意义.方法:应用免疫组化法对30例子宫肌瘤组织、30例相应肌瘤包膜外子宫肌层组织及10例因宫颈CINⅢ级或子宫脱垂行子宫切除术的子宫肌层组织SULT1E1、ERα、ERβ和PRA,PRB受体蛋白进行检测.结果:70例标本中SULT1E1蛋白、ERα/β蛋白、PRA/B蛋白在子宫肌瘤、肌瘤包膜外子宫肌层组织及正常子宫肌层组织中的表达阳性率分别为66.67％、90.00％和100.00％、96.67％、70.00％和70.00％、66.67％、33.33％和30.00％、93.33％、70.00％和60.00％及70.00％、63.33％和70.00％,三组不同组织中五种蛋白阳性率比较均有非常显著性差异(P＜0.05);将ERα/β和PRA/B受体蛋白的表达阳性率分别与SULT1 E1蛋白的表达阳性率比较发现,子宫肌瘤组织中:SULT1E1与ERα蛋白和PRA蛋白之间均存在负相关关系[r=-0.827(P =0.001);r=-0.493(P =0.006)];SULT1E1与ERβ蛋白和PRB蛋白之间均无相关关系[r=0.192(P=0.309);r=-0.538(P =0.510)].结论:SULT1E1可能是子宫肌瘤发生过程中的抑制因素.SULT1E1和雌、孕激素受体亚型ERα、ERβ、PRA、PRB蛋白的表达与子宫肌瘤的发生、发展有关.
