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细胞培养基底刚度对人原代脐静脉内皮细胞增殖率及经登革病毒感染后释放 NO、ET-1的影响
目的：探讨细胞培养基底刚度在登革病毒（ Dengue virus，DENV）感染人原代脐静脉内皮细胞（ HUVEC）中的影响。方法利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺制备模拟正常人血管内皮细胞基底刚度的水凝胶[（0±4）kPa]，MTS法检测细胞的增殖，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，常规方法鉴定增殖登革病毒2型（DENV-2），DENV-2（MOI＝10）感染人原代脐静脉内皮细胞，MTS法比较种植在传统塑料基底与水凝胶上的HUVEC被DENV-2感染后对细胞增殖率的影响，并通过硝酸还原酶法检测两组细胞释放一氧化氮（NO）的水平以及双抗体夹心ELISA法检测内皮素-1（ET-1）的表达。结果自重弯曲法测得2％双丙烯酰胺和40％丙烯酰胺配比水凝胶的弹性模量为（3030±0．44） Pa；血管内皮细胞经登革病毒感染后其细胞增殖率与培养基底刚度呈正相关；两组不同刚度基底培养的细胞生长周期和细胞凋亡率无明显差异，但可引起NO和ET-1水平的变化。结论实验结果证实基底刚度可影响人原代HUVEC的增殖效率及释放的NO与ET-1浓度的变化，血管内皮受损后，其分泌合成的血管活性物质减少，参与了登革热的致病发生。同时水凝胶模型的建立为研究DENV感染的体外模型提供一定的新思路。
关键词： 基底刚度 登革病毒 人原代脐静脉内皮细胞 增殖 细胞因子 -
基底刚度对人宫颈癌HeLa细胞生长影响的体外研究
目的 探讨基底刚度变化对宫颈癌HeLa细胞生长的影响.方法 将人宫颈癌HeLa细胞株培养于基底刚度为0.5、5.0、25.0 kPa水凝胶培养皿和基底刚度约为1.0×106kPa的普通塑料/玻璃培养皿中.采用倒置显微镜和环境扫描电子显微镜观察细胞的形态、结构,采用单光子激光共聚焦显微镜观察细胞骨架,采用CCK-8法检测细胞增殖活性并绘制生存曲线.结果 随着基底刚度的增加,细胞铺展面积增加,细胞贴壁愈加牢固,细胞形态呈多边形或梭形;不同基底刚度组的长直径/短直径、铺展面积比较,差异均有统计学意义(F=15.54、77.21,P﹤0.01);随着基底刚度的增加,细胞伪足逐渐丰富且纤长,细胞骨架应力纤维表达增多;以48 h培养为基础计算细胞倍增时间后显示,0.5、5.0、25.0、1.0×106kPa基底刚度上培养的HeLa细胞的倍增时间分别为60.40、39.43、27.79、26.34 h,细胞倍增时间随着基底刚度的增加而缩短,细胞增殖加快.结论 较大的基底刚度更利于人宫颈癌HeLa细胞铺展、细胞骨架分布和细胞增殖.
关键词： 人宫颈癌HeLa细胞 基底刚度 细胞生长 -
基底刚度对血管内皮细胞生长与增殖的影响
目的:以细胞生长所粘附的胞外基底的力学特性为对象,通过将人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)接种于不同刚度的基底上,借以阐明基底刚度对其生长和生物学活性的影响.方法:以双丙烯酰胺和丙烯酰胺复合物为原料,构建不同基底刚度基底膜,经灭菌且胶原交联后接种HUVECs,分别进行MTT试验、鬼笔环肽细胞染色以及流式细胞技术检测细胞的生长周期.结果:随着基底刚度的增强,HUVECs增殖的速度明显受到抑制(P＜0.01);且细胞形态和生长周期也出现相应的变化.结论:基底刚度的改变在HUVECs的生长和增殖方面均有较大的影响,这可为进一步解释动脉粥样硬化中血管内皮细胞形态和功能紊乱提供了相应的生物力学依据.
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生物材料表面性能调控干细胞分化的研究进展
The differentiation of stem cells into target cells in a particular region is an important prerequisite for the organ construction and tissue engineering.The processes are multi-directionally regulated by the surface properties of biomaterials,and among them the influences of mechanical rigidity and surface morphology of biomaterials on morphological characteristics,focal adhesion assemblies,and cytoskeletal structure of cells are considered to be the most important factors in regulating the differentiation of stem cells into specific cell lineages.This review summarizes the progresses on this topic in the past few years,which may provide a reference to the design of the biomaterials in regenerative medicine and tissue engineering.
