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氟西汀通过上调海马内溴结构域蛋白4的表达改善慢性束缚应激所致小鼠的抑郁样行为
目的 探讨氟西汀(FLX)对慢性束缚应激(CRS)所致小鼠抑郁样行为及海马内溴结构域蛋白4(BRD4)表达的影响.方法 24只雄性昆明小鼠随机分为生理盐水对照(NS)组、抑郁模型(CRS)组、氟西汀干预(CRS+FLX)组.慢性束缚应激3周建立小鼠抑郁模型,应激的第8天至第21天CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射氟西汀(10 mg/kg),NS组及CRS组注射等体积生理盐水.采用糖水偏好实验、喷糖实验、强迫游泳实验、新旧事物识别实验和旷场实验检测各组小鼠行为变化;采用Western blotting及Real-time PCR法检测小鼠海马BRD4蛋白和mRNA的表达情况.结果 与NS组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P＜0.01),喷糖实验舔糖时间缩短(P＜0.05),强迫游泳不动时间增加(P＜0.01),新事物辨别指数降低(P＜0.0001),抗抑郁药FLX干预可逆转CRS所诱导的上述抑郁样行为表现(P＜0.05);与NS组相比,CRS组小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达明显下调(1.0000±0.04577比0.08337±0.01658;1.0000±0.04379比0.6672±0.03193,P＜0.05),而FLX可上调抑郁小鼠海马BRD4蛋白及mRNA的表达(0.08337±0.01658比0.4983±0.08574;0.6672±0.03193比0.8572±0.03181,P＜0.05).结论 氟西汀可能通过上调海马BRD4的表达改善小鼠抑郁样行为.
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溴结构域蛋白4抑制剂JQ1对肝癌细胞活性的影响
目的:探讨溴结构域蛋白4(bromodomain-containing protein 4,BRD4)抑制剂JQ1对两种不同肝癌细胞系增殖、凋亡的影响.方法:用BRD4抑制剂JQl处理HepG2,Bel-7402细胞株,磺酰罗丹明B(sulforhodamine B,SRB)染色检测细胞活力;EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine)嵌入和Hoechst 33342染色法检测细胞增殖;以流式细胞术和AnnexinV-FITC/PI双染法分别分析细胞周期、细胞凋亡;后用Western blot法观察JQl介导抗增殖作用主要下调蛋白C-myc在蛋白水平上的变化,进一步验证JQ1抑制肝癌细胞增殖的作用.同时探讨JQ1与目前肝癌细胞治疗药物甲苯磺酸索拉非尼片对肝癌细胞的比较和联合作用.结果:BRD4抑制剂JQ1可以以剂量依赖的方式显著抑制HCC细胞系:HepG2细胞和Bel-7402细胞的活力,具体表现为:抑制其细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染法分析发现能促进其凋亡;同时C-myc蛋白表达的也被显著抑制.与JQ1、索拉非尼片单药应用相比,小剂量的JQ1与索拉非尼片联合应用,HCC细胞的生长抑制率增加,凋亡率也增加,提示BR D4抑制剂JQ1联合索拉非尼片对细胞生长的抑制作用要强于JQ1或索拉非尼片单独用药.结论:BRD4抑制剂JQ1可能是一种潜在的可治疗肝细胞癌的新型药物.
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含溴结构域和额外终端域家族蛋白——表观遗传领域的新型治疗靶点
BET (bromodomain and extraterminal)是一类能解读表观遗传密码的蛋白,通过识别和结合乙酰化的组蛋白或非组蛋白,在调节基因转录中发挥重要的作用.BET抑制剂在肿瘤和炎症等临床前疾病模型中表现出良好的疗效,且已有部分抑制剂进入临床阶段,这表明以BET为治疗靶点的药物研发具有可观前景.本文将对BET蛋白的结构功能、BET抑制剂与疾病治疗以及其作为治疗靶点的分子机制等方面进行阐述.
关键词： 含溴结构域和额外终端域家族蛋白 溴结构域蛋白4 表观遗传学 治疗靶点 染色质调节 -
溴结构域蛋白4及其抑制剂的研究进展
近年来,溴结构域及超末端结构(BET)亚家族成员是一类研究较多的靶点.其中,溴结构域蛋白4(BRD4)可调节细胞转录,标记哺乳动物的有丝分裂,调控细胞周期,在癌症的发生、发展,纤维化及炎症过程中发挥着重要的作用.因此,BRD4抑制剂已成为实体瘤、白血病及纤维化等疾病药物研究的热门领域.笔者在综合文献的基础上,主要阐述BRD4的蛋白结构、功能及其抑制剂相关构效关系的新研究进展.
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溴结构域蛋白4在哮喘上皮-间质转化中作用的研究进展
气道炎症和气道重塑是支气管哮喘的重要特征,慢性气道炎症可以通过诱导上皮-间质转化(EMT)参与支气管哮喘气道重塑过程.溴结构域蛋白4(BRD4)是哺乳动物体内一种重要转录调节因子,近年越来越多证据表明,其可能是通过核因子-κB/RelA信号通路调控哮喘气道重塑过程.本文总结了BRD4调控哮喘EMT的研究进展,旨在进一步探讨哮喘的分子机制,为哮喘的防治提供新的策略.
关键词： 上皮-间质转化 哮喘 气道重塑 溴结构域蛋白4 核因子-κB/RelA信号通路 -
BRD4和MMP-13在胃癌中的表达及其临床意义
背景:溴结构域蛋白4(BRD4)已被证实参与了细胞恶性转化以及肿瘤细胞的侵袭、转移过程,但其在胃癌中的作用尚未见文献报道.目的:探讨BRD4、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在胃癌组织中的表达及其与胃癌临床病理特征和预后的关系.方法:收集进展期胃癌组织83例、早期胃癌组织45例、胃癌前病变组织42例和正常胃黏膜上皮组织38例,采用免疫组化方法检测BRD4、MMP-13表达,分析进展期胃癌组织中两者表达的相关性以及两者与肿瘤临床病理特征和患者预后的关系.结果:BRD4和MMP-13在进展期胃癌组织中的表达水平显著高于早期胃癌、癌前病变和正常胃黏膜上皮组织(P＜0.05),两者表达水平呈显著正相关(r =0.258,P=0.019),且表达阳性者预后显著差于表达阴性者(P＜0.05).BRD4表达与进展期胃癌的淋巴结转移相关(P＜0.05),多因素分析显示其为影响进展期胃癌患者预后的独立危险因素(OR=10.696,95％ CI:1.137～100.609,P=0.038).结论:胃癌组织中高表达的BRD4可能通过调控MMP-13信号通路促进胃癌恶性进展,影响患者预后.
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溴结构域蛋白4特异性抑制剂JQ-1对人增生性瘢痕的影响
目的·探究溴结构域蛋白4 (BRD4)特异性抑制剂JQ-1对人增生性瘢痕的影响及其可能机制.方法·收集人皮肤增生性瘢痕标本,原代培养皮肤瘢痕成纤维细胞,并进行传代培养,予以0.1、0.5、1.0、2.0、2.5、12.5 μmol/L不同浓度的JQ-1干预48 h,CCK-8试剂盒、细胞划痕试验和ELISA法分别检测JQ-1对成纤维细胞增殖、迁移、Ⅰ型胶原蛋白(COL Ⅰ)分泌量及TGF-β1的蛋白水平.36只裸鼠构建瘢痕动物模型,将临床上获得的瘢痕组织(1.0 cm×1.0 cm×0.5 cm)移植于裸鼠背部皮下.继续饲养4周后,将裸鼠分成2组,JQ-1组和DMSO组,分别每日予以0.5 μ mol/L JQ-1及0.1％ DMSO的瘢痕内多点注射,1mL/只.天狼猩红染色和免疫组织化学法分别观察瘢痕中COL Ⅰ/Ⅲ及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化情况.结果·细胞实验表明:①0.5 μmol/L及以上浓度JQ-1对成纤维细胞增殖有明显抑制作用(均P＜0.01).②JQ-1可抑制成纤维细胞的迁移活性(均P＜0.01).③JQ-1可抑制成纤维细胞COL Ⅰ的分泌及TGF-β1的产生(均P＜0.01).动物实验表明:①JQ-1组COL Ⅰ/Ⅲ总含量较DMSO组显著下降,且COL Ⅰ/Ⅲ比值下降(均P＜0.05).②JQ-1组α-SMA的含量较对照组明显下降(均P＜0.05).结论·JQ-1可抑制体外人瘢痕成纤维细胞的增殖、迁移、COL Ⅰ的分泌及TGF-β1的产生;其对裸鼠体内的人瘢痕组织中COL Ⅰ/Ⅲ的分泌及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转化亦有抑制作用.
