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白介素-1α及与白介素-11、白血病抑制因子和胶质细胞源性神经生长因子联合诱导人神经干细胞向多巴胺神经元的分化
目的探讨细胞因子白介素-1α(IL-1α)及与白介素-11(IL-11)、白血病抑制因子(LIF)和胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)联合应用对体外诱导人神经干细胞定向分化为多巴胺神经元的影响.方法采用无血清培养技术和单细胞克隆技术、免疫荧光双标技术.结果对照组仅有极少量的神经干细胞分化为不成熟的多巴胺神经元;IL-1α组分化的多巴胺神经元较多,但细胞形态欠成熟;联合因子组分化的多巴胺神经元多,细胞较为成熟. 结论IL-1α具有诱导人神经干细胞向多巴胺神经元分化的作用,联合应用IL-1α、IL-11、LIF和GDNF对人神经干细胞向成熟的多巴胺神经元分化具有协同作用.
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GDNF、TGF-β1联合治疗帕金森病的实验研究
目的采用阳离子脂质体介导的方法,探讨胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)基因联合治疗对帕金森病(PD)的疗效和两者的相互影响.方法用6-羟基多巴(6-OHDA)破坏SD大鼠一侧黑质,建立帕金森病模型,并分为对照组、GDNF治疗组、GDNF+TGF-β1治疗组.通过立体定向仪将DOTAP脂质体包裹的GDNF cDNA、TGF-β 1 cDNA注入大鼠的纹状体,观察阿朴吗啡(APO)诱导的旋转行为,应用RT-PCR、Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测GDNF在脑内表达的变化.结果治疗2周后,PD大鼠旋转行为明显减轻(P《0.01).治疗后4周,GDNF+TGF-β 1组症状进一步减轻,而GDNF组没有继续改善.RT-PCR、Western blot显示,与GDNF组相比,联合治疗组GDNF在mRNA、蛋白水平均有较高的表达.结论阳离子脂质体介导GDNF、TGF-β 1能改善帕金森病症状,TGF-β 1是GDNF重要的联合因子.
关键词： 胶质细胞源性神经生长因子 转化生长因子-β1 阳离子脂质体 帕金森病 联合因子 -
胶质细胞源性神经生长因子与慢传输性便秘
慢传输型便秘(STC)至今病因未明.肠神经系统(ENS)可独立调节肠道功能,其在慢传输型便秘中的改变具有重要意义.胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)不仅可促进多种神经元的存活与分化,而且对多种原因造成的神经损伤具有明显的保护作用.此文主要从肠神经系统的功能变化和胶质细胞源性神经营养因子的营养作用这两方面来阐述与功能性便秘之间的相关性.
关键词： 慢传输型便秘 肠神经系统 胶质细胞源性神经生长因子 -
组蛋白去乙酰化酶1和胶质细胞源性神经生长因子在老龄小鼠LPS-PD模型中的表达特点
目的 观察老龄和脂多糖(LPS)刺激二次打击致小鼠PD模型脑组织中组蛋白去乙酰化酶1(SirT1)和胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)的表达水平.方法 C57BL/6小鼠随机分为老年LPS-PD组(n=8)、青年LPS-PD组(n=8)、老年对照组(n=8)、青年对照组(n=8).PD模型制作:LPS 20 μL(1 μg·μL-1),两侧鼻孔滴入,隔日1次,共60 d.对照组用等量生理盐水滴鼻.采用动物行为学爬竿实验测定小鼠行为变化.Western blot检测小鼠脑组织中酪氨酸羟化酶(TH)、SirT1和GDNF表达,免疫组织荧光法检测黑质纹状体区TH表达,分析老龄和LPS刺激作用下多巴胺神经元丢失与SirT1、GDNF表达量的变化.结果 与青年对照组比较,老年LPS-PD组爬竿实验时间延长为显著,TH、GDNF和SirT1表达下降为显著(P＜0.01);老年对照组和青年LPS-PD组运动时间显著延长,TH、SirT1表达显著下降(P＜0.05),SirT1表达与TH表达呈正相关性.青年LPS-PD组GDNF表达显著高于青年对照组(P＜0.05).老龄和LPS二.次打击作用均可导致多巴胺神经元显著丢失,运动协调能力下降.脑内GDNF和SirT1表达量随年龄增长而下降,与多巴胺神经元丢失相平行;但青年LPS-PD组GDNF呈代偿性高表达.结论 老龄和LPS二次打击下PD模型多巴胺神经元的丢失可能与GDNF和SirT1神经保护因子表达下降有一定相关性.
关键词： 帕金森病 酪氨酸羟化酶 多巴胺 组蛋白去乙酰化酶 胶质细胞源性神经生长因子 -
GDNF对唾液腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中基质降解和黏附能力的影响
目的:探讨GDNF对唾液腺腺样囊性癌(adenoma cystic carcinoma,ACC)嗜神经侵袭(perineural invasion,PNI)中基质降解和黏附能力变化的影响.方法:应用免疫组织化学染色SP法对42例ACC和5例正常唾液腺组织中GDNF、MMP-9、NF-κB、整合素β1的表达进行检测.采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学分析.结果:GDNF在ACC肿瘤细胞的细胞质和肿瘤周围的神经纤维中呈阳性表达.NF-κB、MMP-9、整合素β1在ACC肿瘤细胞的细胞质均呈阳性表达,且可见NF-κB表达于细胞核,整合素β1表达于细胞膜,阳性表达率分别为69.05％(29/42)、66.67％(28/42)和61.90％(26/42).NF-κB、MMP-9、整合素β1的表达在PNI组和非PNI组间差异显著,P值分别为0.005、0.011、0.001.GDNF与NF-κB、MMP-9、整合素β1表达呈正相关,r=0.443,P=0.003;r=0.401,P=0.009;r=0.535,P=0.000.MMP-9、整合素β1与NF-κB表达呈正相关,r=0.501,P=0.001;r=0.429,P=0.005.MMP-9的表达与整合素β1表达呈正相关,r=0.381,P=0.013.结论:GDNF在ACC嗜神经侵袭中促进基质降解和黏附能力改变.NF-κB、MMP-9、整合素β1的表达与GDNF关系密切,共同促使ACC神经侵袭的发生与进展.
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不同温度下体外大鼠睾丸支持细胞胶质细胞源性神经生长因子的表达
目的:通过观察不同温度下体外大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC)胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)表达特点,探讨高温致不育的机制. 方法:采用组合酶消化法和选择性贴壁法分离雄性Wistar大鼠睾丸SC,将分离的SC分别置于不同温度进行体外培养,观察其贴壁、形态学变化,FasL免疫组化鉴定.实验分为对照组(35℃)、实验组(36℃、37℃、38℃、39℃).CCK-8法检测SC增殖情况,HE染色观察细胞形态及结构,RT-PCR、免疫荧光及Western印迹检测细胞GDNF的表达. 结果:本实验条件下,体外分离培养SC纯度=(95.30±2.15)％(n=10),CCK-8实验结果显示,36℃时细胞增殖率高(P＜0.01),＞36℃时,随着温度的提高,增殖率逐渐降低,39℃对细胞增殖具有明显抑制作用(P＜0.01);免疫荧光结果显示,GDNF表达于SC胞质,36℃时荧光强,RT-PCR及Western印迹检测结果显示,高于36℃时,GDNF mRNA及蛋白的表达随着温度的增加而降低,36℃、37℃、38℃、39℃4组与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论:不同温度下,体外培养SC的增殖能力和GDNF表达明显不同.＞36℃时,随着温度的提高,增殖能力受到抑制,GDNF表达水平显著降低.本研究结果证实,高温下大鼠睾丸SC正常功能受到抑制,从而影响生精功能.
关键词： 温度 支持细胞 胶质细胞源性神经生长因子 大鼠 -
低频和高频有氧运动对老年大鼠骨骼肌的影响
目的 探讨低频和高频有氧运动对老年大鼠骨骼肌的影响.方法 选择健康雄性的Wistar大鼠20只,其中青年大鼠(A组)5只,老年大鼠15只,随机将15只老年大鼠分为空白对照组(B组)5只、低频有氧运动组(C组)5只、高频有氧运动组(D组)5只.A组和B组大鼠不做任何处理,C组和D组大鼠分别行低频、高频有氧运动,共8周.第8周运动结束后立刻测量各组大鼠腓肠肌处皮温,并处死大鼠测定腓肠肌质量、血管内皮生长因子(VEGF)与胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)表达,同时观察大鼠腓肠肌形态变化情况.结果 C组和D组大鼠腓肠肌肌纤维明显增粗,间隙变小,形态较A、B组规则;4组VEGF表达组间比较差异有显著性(F=18.37,P＜0.05),各组两两间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);4组腓肠肌内GDNF表达组间比较差异有显著性(F=15.03,P＜0.05),除C、D组间比较差异无显著性外(P＞0.05),其余各组两两间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);4组腓肠肌质量组间比较差异有显著性(F=33.46,P＜0.05),除C、D组间比较差异无显著性外(P＞0.05),其余各组两两间比较差异均有统计学意义(P＜0.05);4组腓肠肌/大鼠体质量比值组间比较差异有显著性(F=128.34,P＜0.05),除C、D组间比较差异无显著性外(P＞0.05),其余各组两两间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 低频和高频有氧运动可显著提高老年大鼠的腓肠肌质量,并提高大鼠腓肠肌组织内VEGF和GDNF的表达,延缓老年大鼠腓肠肌的衰老性改变.
关键词： 运动 肌 骨骼 血管内皮生长因子类 胶质细胞源性神经生长因子 -
RA-BMPs信号通道对肠神经系统发育调控的研究进展
肠道神经系统是起源于神经嵴的神经元前体细胞迁移至肠道并演化形成,而起源于神经嵴的前体细胞是多潜能干细胞,它们在肠道内所接触的微环境决定了肠道神经系统的独特性.神经营养因子如胶质细胞源性神经生长因子(zlial derived neu-rotrophic factor,GDNF)、营养以及细胞外基质成分在肠道神经元前体细胞迁移增殖分化中起重要作用.
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LRIG1在胶质瘤细胞系U251细胞中的作用
目的 探讨多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)在胶质瘤细胞系U251细胞中的作用及引起的相关基因变化.方法 以PEGFP-LRIG1质粒转染体外常规培养的U251细胞,同时设PEGFP-N1组和空白组作为对照,RT-PCR检测3组细胞LRIG1、GDNF、拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ)基因表达的变化.Western blotting检测细胞LRIG1蛋白的表达；绘制PEGFP-N1和PEGFP-LRIG1组细胞1～5 d的生长曲线并计算替莫唑胺对2组细胞的抑制率.应用siGDNF和siLRIG1敲低U251细胞中GDNF和LRIGI的表达,同时设单纯siGDNF、siLRIG1组和空白组作为对照,比较细胞增殖率的变化.结果 3组细胞LRIG1基因和蛋白、TOPOⅡ和GDNF基因表达不同,差异有统计学意义(P＜0.05)；与PEGFP-N1组和空白组比较,PEGFP-LRIG1组细胞LRIG1基因和蛋白的表达较高,TOPOⅡ和GDNF基因表达较低,差异均有统计学意义(P＜0.05).细胞生长1～5 d时,PEGFP-LRIG1组细胞计数低于PEGFP-N1组,差异有统计学意义(P＜0.05).加入替莫唑胺培养后,PEGFP-LRIG1组细胞抑制率高于PEGFP-N1组,差异有统计学意义(P＜0.05).Westernblotting结果显示应用siGDNF和siLRIG1敲低LRIG1和GDNF成功.siLRIG1组细胞抑制率高于对照组,siLRIG1 +siGDNF组胞抑制率低于siLRIG1组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 LRIG1可以通过调节GDNF的表达来调节U251细胞的生长；LRIG1可以抑制GDNF、TOPOⅡ的表达,提高胶质瘤细胞对替莫唑胺的化疗敏感性.
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糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织胶质细胞源性神经生长因子的表达及意义
目的 探讨糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)表达及意义.方法 41只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、正常血糖脑缺血再灌注组(NIR)和糖尿病性高血糖脑缺血再灌注(DIR).用链脲佐茵素腹腔注射和线栓法分别诱发大鼠糖尿病和复制大脑中动脉缺血再灌注模型,应用免疫组化法检测再灌注6小时和24小时脑组织GDNF蛋白的表达.结果 大鼠脑缺血再灌注后GDNF主要表达于缺血周边区,NIR组GDNF表达在再灌注6小时组和24小时组均较假手术组和正常对照组表达明显增加(P＜0.05),DIR组GDNF表达在再灌注6小时和组和24小组较NIR组表达明显下降(P＜0.05).结论 大鼠脑缺血再灌注后脑组织GDNF表达增加可能是内源性保护机制;糖尿病性高血糖大鼠脑缺血再灌注后脑组织GDNF表达降低可能是糖尿病加重缺血损伤的机制之一.
关键词： 糖尿病 高血糖 缺血再灌注 胶质细胞源性神经生长因子 -
NGF,BDNF,NT-3和GDNF在背根节不同神经元的配布的免疫组织化学证据
为了探讨神经生长因子、脑源性神经生长因子,神经营养素-3,胶原细胞源性神经生长因子在成年猫背根节神经元不同大小细胞的分布.取L6背根节制成20 μm厚冰冻切片,用上述四种因子抗血清进行免疫组化反应.计数每一种因子阳性大、中、小型(小于42 μm者为小型神经元;42～57 μm者为中型神经元;大于57 μm者为大型神经元)神经元的百分数.结果证明,此四种因子在背根节大、中、小神经元的阳性百分数分别为:1.2±0.7,2.1±0.9,3.3±1.1;1.7±0.4,11.2±1.2,30.0±1.5;26.7±2.2,6.2±1.2,1 3.2±2.9;27.4±3.3,8.1±1.7,20.1±2.4.表明:在成年猫L6背根节仅存在少数神经生长因子阳性细胞,而脑源性神经生长因子则主要配布于中、小神经元,神经营养素-3和胶质细胞源性生长因子的免疫阳性细胞主要是大神经元,但也包括一些中小神经元.提示此四种因子在成年猫背根节的生理功能可能与神经元的不同大小有关.
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GDNF的表达调控与Parkinson病的神经保护治疗
Parkinson病(PD)是一种常见的神经退行性疾病,其主要病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元的变性死亡.作为促进PD多巴胺能神经元存活的首选有效因子,胶质细胞源性神经生长因子(GDNF)的神经保护作用得到多数学者认同.
