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溴氰菊酯对大鼠脑组织脑源性神经生长因子表达的诱导
目的研究溴氰菊酯(DM)对中枢神经系统损害的机制.方法用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、流式细胞分析及免疫组化技术检测溴氰菊酯对大鼠大脑皮层和海马脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响.结果大鼠经DM一次大剂量(DM1)和多次小剂量(DM2)处理后,大鼠大脑皮层和海马的BDNF mRNA及蛋白水平均有明显升高.RT-PCR结果表明,DM1和DM2组大鼠皮层和海马BDNF mRNA的水平分别较对照组高出48%、56%、59%、和54%;斑点杂交结果亦显示,DM1和DM2组大脑皮层和海马的BDNF mRNA分别是对照组的186%、161%、148%和158%,与RT-PCR结果基本一致;流式细胞分析结果表明,DM1组和DM2组大鼠皮层和海马BDNF蛋白表达量分别较对照组高53%、8%和45%、46%;免疫组化结果表明,DM1和DM2组大鼠皮层的蛋白水平分别是对照组的129%和147%,与流式细胞分析一致;而海马主要是DM1组的CA1、DG区和DM2组CA3、DG区明显高于对照组.结论 DM在体内明显诱导大鼠大脑皮层和海马BDNF的表达,可能在其神经损伤修复中有重要意义.
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山茱萸多糖对衰老模型大鼠学习记忆能力及海马突触可塑性的影响
目的:观察山茱萸多糖对衰老模型大鼠学习记忆能力、海马脑源性神经生长因子(BDNF),酪氨酸蛋白激酶B(TrkB)蛋白表达及海马长时程增强(LTP)的影响,并探讨其机制.方法:清洁级SD大鼠40只,随机数字表法分为正常组、模型组、山茱萸多糖低、高剂量组,每组10只,采用D-半乳糖(140 mg·kg-1 ·d-1)皮下注射构建大鼠衰老模型,同时正常组、模型组每天给予生理盐水、低剂量组和高剂量组给予山茱萸多糖(0.14,0.28 g·kg-1·d-1)灌胃6周.Morris水迷宫检测学习记忆能力,高频刺激海马CA3区Schaffer侧支,在同侧海马CA1区诱导LTP的方法检测大鼠海马神经元突触可塑性的变化,免疫组化法检测海马神经元BDNF和TrkB蛋白的表达情况.结果:与正常组比较,模型组平均逃避潜伏期明显延长,在目标象限内游泳的距离占总距离的百分比和探索次数明显减少,海马LTP幅度显著降低,海马BDNF和TrkB蛋白表达降低(P＜0.01).高剂量组与模型组比较平均逃避潜伏期明显降低,在目标象限内游泳的距离占总距离的百分比和探索次数明显升高,海马LTP幅度显著升高,海马BDNF和TrkB蛋白表达升高(P＜0.01).结论:山茱萸多糖可通过提高海马BDNF和TrkB的表达及大鼠海马CA1区的LTP,明显改善突触的可塑性,这可能是山茱萸多糖提高学习记忆能力的重要机制之一.
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中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经NGF、BDNF及NT-3蛋白表达的影响
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经神经生长因子(NGF)、脑源性神经生长因子(BDNF)和神经营养因子-3(NT-3)蛋白表达的影响.方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,用不同剂量的糖痹康灌胃,并将甲钴胺作为阳性对照药,16周后取一侧坐骨神经,用Western blot检测坐骨神经中NGF、BDNF和NT-3蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经组织NGF、BDNF和NT-3蛋白表达显著降低(P＜0.01);糖痹康中剂量组与模型组比较,能升高NGF蛋白表达(P＜0.05);糖痹康低、中和高剂量组与模型组比较,能升高BDNF和NT-3蛋白表达(P＜0.01).结论:中药复方糖痹康能够促进糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经NGF、BDNF和NT-3蛋白的表达.
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中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经BDNF蛋白及BDNFmRNA表达的影响
目的:观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经脑源性神经生长因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)蛋白及BDNFmRNA表达的影响.方法:采用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发2型糖尿病大鼠动物模型,用不同剂量的糖痹康灌胃并与甲钴胺对照,16周后取大鼠一侧坐骨神经,用免疫组化法检测坐骨神经中BDNF蛋白的表达及采用RT-PCR方法检测坐骨神经组织中BDNF mRNA的表达.结果:与正常组比较,模型组BDNF蛋白表达显著降低及BDNF mRNA表达显著降低;糖痹康组与模型组比较,能升高BDNF蛋白及BDNF mRNA表达.结论:中药复方糖痹康能够促进糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经BDNF mRNA的转录和蛋白的表达.
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加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经脑源性神经生长因子表达的影响
目的 观察加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经脑源性神经生长因子(BDNF)表达的影响,探讨其对实验性糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用.方法 用1%链脲佐菌素诱发糖尿病模型,72 h后尾静脉采血测定血糖,凡血糖＞16.7 mmol/L者纳入实验.造模稳定1周后,加味补肝汤组予加味补肝汤灌胃[28.6 g/(kg·d)],分别于用药后第4、8周2个时间点处死大鼠,用免疫组织化学法检测坐骨神经中BDNF蛋白的表达,通过Motic Images Advanced彩色图文分析系统测定免疫反应产物BDNF蛋白的灰度值.结果 在4、8周模型对照组坐骨神经中BDNF阳性的表达比正常对照组明显减少(P＜0.05),第8周时BDNF表达比4周时增多.经加味补肝汤治疗后BDNF的阳性表达比模型组表达明显增多(P＜0.05).结论 加味补肝汤能上调糖尿病大鼠坐骨神经中BDNF的表达,对糖尿病大鼠周围神经病变有一定的防治作用.
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补肾活血方对血管性痴呆大鼠海马BDNF mRNA及受体TrkB m RNA表达的影响
目的 探讨补肾活血方对血管性痴呆(VD)大鼠脑海马神经元保护机制.方法 70只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补肾活血高剂量组、补肾活血低剂量组、尼莫地平对照组,每组14只,采用两血管阻断法制备大鼠VD模型,补肾活血高剂量组、低剂量组分别以10.14、5.07 g生药/kg灌服补肾活血方,尼莫地平对照组以11.06 mg/kg灌服尼莫地平,给药30天后,检测各组大鼠水迷宫法行为学、脑海马神经元超微结构及海马组织BDNF mRNA和TrkB mRNA蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠空间学习记忆能力与探索能力下降,表现为逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显减少(P＜0.01),海马神经元BDNF mRNA和TrKB mRNA及蛋白表达下降(P＜0.05,P＜0.01),脑海马神经元超微结构明显受损;与模型组比较,补肾活血高、低剂量组大鼠空间学习记忆能力与探索能力明显改善,表现为逃避潜伏期明显缩短,穿越原平台次数及在原平台停留时间均明显增加(P ＜0.05,P＜0.01),海马神经元BDNF mRNA及受体TrkB mRNA及蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01),改善脑海马神经元超微结构.结论 补肾活血方可提高脑海马神经元BDNF及受体TrkB表达,保护脑海马神经元,改善VD大鼠学习与记忆能力.
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加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层组织内差异表达基因的影响
目的 观察加巴喷丁对神经病理性疼痛小鼠脑皮层基因表达差异的影响.方法 120只小鼠随机分为对照(C)、假手术(S)和模型(M)组,各组再按不同给药分为生理盐水(P)和加巴喷丁(G)两个亚组(终分为C+P、C+G、S+P、S+G、M+P、M+G六组).部分坐骨神经结扎2周后开始腹腔给药,给药4周后留取大脑皮层.通过手术侧足行为学和机械痛阈的改变来确认神经病理性疼痛模型成功及观察加巴喷丁的疗效.选择S+P、M+P和M+G三组做基因表达差异检测,并用实时PCR验证部分表达有显著差异的基因.结果 M+P和S+P相比较,脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因显著下调.M+G和M+P相比较,上述基因显著上调.结论 加巴喷丁镇痛的脑机制可能与脑源性神经生长因子、神经肽Y、Pleiotrophin等基因的上调有关.
关键词： 神经病理性疼痛 加巴喷丁 脑源性神经生长因子 神经肽Y pleiotrophin -
减压对大鼠脊髓压迫性损伤后脱髓鞘病变和BDNF表达的影响
目的 观察脑源性神经生长因子(BDNF)对脊髓压迫性损伤(CSCI)后有髓神经纤维脱髓鞘病变的影响,为阐明BDNF对神经纤维脱髓鞘病变修复提供实验基础.方法 将大鼠均分成4组:正常组、假手术组、压迫组和减压组.用自行设计的压迫器制作大鼠脊髓压迫模型.压迫组作脊髓压迫12 h,减压组作脊髓压迫1h,假手术组仅作脊髓显露,不作压迫.用锇酸染色观察CSCI后1、3和7d有髓神经纤维变化情况;Western blot和免疫荧光双标检测BDNF和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达.结果 压迫组和减压组都出现脱髓鞘病变,并随着时间的延长,髓鞘逐渐水肿、变性、MBP崩解.BDNF表达量在CSCI后随时间延长也逐渐降低(P＜0.05),但与压迫组相比较,减压组脱髓鞘病变较轻且MBP和BDNF降低幅度小而缓慢(P＜0.05).结论 CSCI后尽早减压可减轻脱髓鞘的发生,且可能与BDNF的表达有关.
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微生物法制备单唾液酸四己糖神经节苷脂的机制和方法
单唾液酸四己糖神经节苷脂(GM_1)是含有单个唾液酸的酸性鞘糖脂,被认为是除脑源性神经生长因子和层粘蛋白外,对神经系统损伤具有显著临床疗效的生物药物.GM_1主要来源于哺乳动物含丰富神经的脑组织,经有机溶剂提取和柱层析分离精制获得.
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脑源性神经营养因子基因沉默对HeLa细胞增殖和凋亡的影响
目的 以高表达脑源性神经营养因子(BDNF)的官颈癌细胞系HeLa细胞为模型,筛选针对BDNF基因的有效干扰RNA序列,并观察BDNF基因沉默对HeLa细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计和构建两个针对人BDNF基因的siRNA真核表达载体,经酶切鉴定和DNA序列分析鉴定后用脂质体Lipofectamine 2000介导转染,将空载体质粒pGenesil-1和两个重组质粒pGenesil-shRNA-BDNF1、pGenesil-shRNA-BDNF2分别转染人人HeLa细胞(依次命名为P_0、P_1和P_2组);采用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测BDNF表达的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖水平;流式细胞仪和Hoechest 33258染色检测细胞凋亡.结果 成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体.P_1组与未转染、P_0、P_2组相比,BDNF mRNA表达水平(F=48.19,P<0.01)和BDNF蛋白表达水平(F=13.74,P<0.01)均明显降低,P_2组则未达实验预期的干扰目的 (P>0.05).通过MTT实验,发现P_1组细胞生长速度明显减慢,增殖高峰后移;流式细胞术检测证实早期凋亡率P_1组[(53.4±4.2)%]明显高于未转染组[(0.8±0.4)%]、P_0组[(5.1±1.8)%]和P_2组[(7.9±2.4)%;F=269.77,P<0.01].结论 BDNF基因高表达于官颈痛细胞系HeLa细胞,BDNF基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡并抑制其增殖,提示BDNF基因可能成为恶性肿瘤治疗的新靶点.
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早期丰富环境刺激对脑瘫大鼠脑发育的影响
目的:研究丰富环境刺激对脑瘫大鼠脑发育的影响.方法:给予LPS组28只孕16、17日龄大鼠连续两天腹腔注射脂多糖350 μg/kg,制备脑瘫动物模型,对照组8只注射等量生理盐水.15日龄两组仔鼠利用神经行为学检测鉴定脑瘫动物模型,并检测脑源性神经生长因子(BDNF)表达.将脑瘫鼠随机分为干预组、非干预组.对干预组进行丰富环境刺激27天,非干预组和对照组常规饲养.结果:干预组与非干预组比较悬吊试验、斜坡试验、旷场试验、拒俘试验、学习能力、记忆能力有显著性差异(P＜0.05与P＜0.01);干预组与正常对照组比较斜坡试验、姿势、肌张力、学习能力有显著性差异(P＜0.05与P＜0.01).15日龄脑瘫组与对照组比较,BDNF表达无显著性差异(P＞0.05);42日龄干预组与非干预组、对照组比较均有显著性差异(P＜0.01).结论:丰富环境刺激可使脑瘫大鼠肌力、兴奋性、环境适应能力、记忆能力明显增强,达到正常化水平;平衡能力、协调能力、学习能力(或得分)明显增强,但未达到正常化水平;干预组BDNF表达较非干预组、正常对照组明显增加,但未能改善姿势、肌张力、不自主运动能力.
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督脉电针结合超短波疗法对大鼠脊髓全横断损伤后脑源性神经生长因子和神经轴突生长抑制剂-A表达的影响
目的:通过检测大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能恢复情况和脑源性神经生长因子(BDNF)、神经轴突生长抑制剂-A(Nogo-A)的表达来探讨联合应用督脉电针和超短波疗法对SCI的作用机制.方法:复制并评价脊髓全横断损伤大鼠模型,100只雌性大鼠随机分为5组:假手术组、SCI组、SCI+督脉电针组、SCI+超短波组、SCI+督脉电针+超短波组(n=20),检测各组7d、14d、21d、28d这4个时间点BDNF和Nogo-A表达,对各组大鼠进行BBB评分.结果:与模型组相比,各治疗组的BBB评分显著增加,联合组在术后第7d、14d、21d、28d较超短波组和督电组BBB评分显著增加,具有显著性差异(P＜ 0.01).与模型组相比,各治疗组BDNF的表达均显著增加,Nogo-A的表达均显著减少,联合组在术后第7d、14d、21d、28d较超短波组和督电组BDNF的表达显著增加,Nogo-A的表达显著减少,具有显著性差异(P＜ 0.01).结论:①联合应用督脉电针与超短波治疗,能够提高SCI后BDNF的表达及抑制Nogo-A的表达来促进神经的修复.②联合疗法对大鼠运动功能恢复更佳.
关键词： 脊髓损伤 督脉电针 超短波 脑源性神经生长因子 神经轴突生长抑制剂-A -
血液中脑源性神经生长因子与疾病和运动的关系
脑源性神经生长因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)是体内含量高的生长因子之一,在人体中枢神经系统和血液中都有一定表达.人体神经系统和血液BDNF水平与许多神经系统疾病包括抑郁、阿尔茨海默病、精神分裂症及脑损伤和脊髓损伤功能恢复有关[1],BDNF还可以影响物质代谢和能量消耗,与糖尿病发生发展相关.运动可以影响神经系统和血液中BDNF的含量,从而在上述疾病的康复治疗中产生作用.BDNF联系了运动、神经功能和能量物质代谢,因此具有重要意义.本文主要总结血液中BDNF水平与运动和疾病的关系,以便更深入的探讨运动在这些疾病康复中的分子机制.
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丁苯酞对局灶性缺血预处理诱导脑缺血耐受影响的实验研究
丁苯酞是一种新型抗脑缺血药物,前期的研究已证实丁苯酞能够增强大鼠缺血预处理(ischemicpreconditioning,IP)后神经营养因子家族中的碱性成纤维细胞因子(bFGF)的表达[1].在此基础上,我们于2011年2月采用免疫组织化学方法检测神经营养因子家族中的另一成员——脑源性神经生长因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及其上游的转录调控因子磷酸化的环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(phosphorylated cyclic AMP responsive element binding protein,p-CREB)在局灶性脑缺血耐受动物模型的脑梗死灶周围的表达,并采用蛋白质印迹(Western blotting)方法检测p-CREB/总cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)表达,探讨丁苯酞局灶性缺血预处理诱导脑缺血耐受中可能的保护机制.
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脑源性神经生长因子转基因细胞移植和大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后细胞凋亡的影响
目的:探讨大鼠脊髓损伤后腺病毒介导的脑源性神经生长因子(AxCA-BDNF)体外转基因成肌细胞移植和静脉内注射大剂量甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡的影响.方法:120只Wistar大鼠分为:脊髓挫伤组(A组),脊髓挫伤后AxCA-BDNF基因转染的成肌细胞移植组(B组),脊髓挫伤后静脉内注射大剂量MP治疗组(C组),脊髓挫伤后同时应用AxCA-BDNF和MP组(D组).手术后1、3、7、14、28d用行为学和电生理检查观察大鼠功能恢复情况,并用计算机图像分析技术对脊髓损伤区细胞凋亡(TUNEL法)和Bcl-2蛋白表达(免疫组化法)进行定量分析.结果:四组中均发现凋亡细胞及Bcl-2蛋白阳性表达细胞,图像分析发现四组凋亡细胞核数为A组＞B组＞C组＞D组;Bcl-2免疫反应阳性细胞表达顺序为D组＞C组＞B组＞A组,大鼠后肢功能恢复和电生理检查也有类似的变化趋势.结论:体外转基因成肌细胞移植和大剂量MP都能抑制大鼠脊髓损伤后的细胞凋亡,促进大鼠后肢功能恢复,两者联合应用具有协同作用.
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腺相关病毒介导的脑源性神经营养因子基因对大鼠海马神经元树突生长的影响
目的 研究重组腺相关病毒介导的脑源性神经营养因子基因(rAAV-BDNF)的表达对体外培养的大鼠海马神经元树突生长的影响.方法 取孕18 d大鼠建立体外培养的海马神经元模型,感染rAAV-BDNF病毒.在检测了BDNF稳定的表达水平后,用MAP2染色法来标示神经元树突形态.用荧光显微镜采样,统计胞体约15～20 μm的MAP2阳性细胞初级树突的数目和长度.对照组神经元为感染表达绿色荧光蛋白的腺相关病毒.结果 感染rAAV-BDNF的海马神经元初级树突数目为(14±3)个,对照组的初级树突数目为(6±1)个.rAAV-BDNF感染的海马神经元树突总长度为(1500±150)μm,对照组的树突总长度为(700±50) μm,两组无论是树突数目还是长度,差异均有统计学意义(t=3.088和6.238,均P<0.05).结论 rAAV-BDNF转染大鼠体外培养的海马神经元后,能起到促进树突生长的作用.
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甘露醇预处理后骨髓问充质干细胞移植对血管性痴呆大鼠认知功能及脑源性神经生长因子表达的影响
目的 探讨甘露醇预处理后骨髓间充质干细胞(BMSCs)静脉移植对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能及脑组织中脑源性神经生长因子(BDNF)表达量的影响.方法 全骨髓培养结合细胞贴壁法分离纯化大鼠BMSCs.取健康雄性sD大鼠79只,随机分为假手术组(10只)和模型组(69只).采用间隔3d分别结扎双侧颈总动脉法制备VD模型.造模后4周,将纳入的32只模型组大鼠随机分为甘露醇预处理BMSCs移植组(简称甘露醇预处理组;尾静脉注射甘露醇1.5 g/kg,预处理10～30min后,经尾静脉注射1X106/ml BMSCs 1 m1)、BMSCs移植组(注射等量的BMSCs,不注射甘露醇)和培养基对照组(注射等量的基础培养液).剔除死亡大鼠,上述3组分别有9、11、8只,假手术组7只纳入统计.干预后4周,采用Morriss水迷宫实验检测大鼠认知功能,酶联免疫吸附法检测大鼠脑组织中BDNF的含量.结果 ①4组相同时间点的比较,BMSCs移植组比培养基对照组逃避潜伏期缩短(均P<0.01),平台象限滞留时间延长(P<0.05);甘露醇预处理组比BMSCs移植组逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),平台象限滞留时间延长(P<0.05),且均与假手术组水平接近(P>0.05).②在额叶皮质和海马区,BMSCs移植组的BDNF含量均高于培养基对照组(P<0.01);甘露醇预处理组则高于BMSCs组(P<0.01),但均低于假手术组的水平(P<0.01).结论 与单独静脉注射BMSCs比较,甘露醇预处理后BMSCs静脉移植治疗VD大鼠模型,认知功能改善程度更佳;额叶皮质和海马中BDNF的表达量更高.
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缺氧预处理后骨髓源神经干细胞联合脑源性神经生长因子移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的研究
目的：研究缺氧预处理后骨髓源性神经干细胞（source neural stem cels of bone marrow，BMSCs- NSCs）联合脑源性神经生长因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）立体定向移植治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的疗效，为高原地区脑梗死的细胞移植治疗提供动物实验基础。方法72只SD大鼠随机分为缺氧预处理组和常氧组，每组各36只，缺氧预处理组造模前3 d进行低氧预处理（hypoxic preconditioning，HPC）。两组均制作大脑中动脉阻塞再灌注（middle cerebral artery occlusion/reperfusion，MCAO/R）模型。每组分为3个亚组（BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCs-NSCs组和对照组，每组各12只），分别梗死灶同侧尾状核内立体定向移植BMSCs-NSCs+BDNF、BMSCs-NSCs和DMEM/F12培养基。移植后3 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d进行神经功能缺损评分，每个时间点每组取2只大鼠，断头取脑后行免疫组织化学染色，观察5-溴脱氧尿嘧啶（5-Bromo-deoxyuridine，Brdu）阳性细胞的迁移路径，行CD133、Nestin、微管相关蛋白2（microtubule-associated protein 2，MAP-2）、兔抗微管蛋白（β-tubulin）、胶质纤维酸性蛋白（glial fibrilary acidic protein，GFAP）、半乳糖神经酰胺（Galactosylceramidase，Galc）免疫荧光染色，了解骨髓源性神经球分化情况。结果常氧BMSCs-NSCs+BDNF组、常氧BMSCs-NSCs组、缺氧预处理BMSCs-NSCs+BDNF组、缺氧预处理BMSCs-NSCs组7 d、14 d、21 d、28 d和35 d的神经功能评分均显著低于同组3 d时的神经功能评分。移植3 d时缺氧预处理对照组神经功能学评分显著低于常氧对照组（P=0.040）；移植7 d时缺氧预处理BMSCs-NSCs+BDNF组神经功能评分显著低于常氧BMSCs-NSCs+BDNF组（P=0.031）。无论缺氧预处理组还是常氧组，BMSCs-NSCs+BDNF组CD133、Nestin、MAP-2、β-tubul in、GFAP、Galc免疫荧光染色光密度值（integral optical density，IOD）均显著高于BMSCs-NSCs组（均P＜0.001）；BMSCs-NSCs+BDNF组、BMSCs-NSCs移植组各检测指标IOD均高于对照组（均P＜0.001）。结论大鼠缺氧预处理后BMSCs-NSCs联合BDNF立体定向移植可显著提高BMSCs-NSCs的效果。缺氧预处理并不能促进外源性BMSCs-NSCs分化，但却能明显改善大鼠神经功能。
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重组腺病毒载体转导的脑源性神经生长因子在大鼠体外培养海马神经元谷氨酸损伤模型中的保护作用
近年来研究表明,脑缺血缺氧损伤机制与兴奋性氨基酸兴奋毒性、钙超载和细胞凋亡等有关.谷氨酸具有毒性损伤作用,但其是否能够引起细胞凋亡尚不确定.大量文献报道,在细胞培养液中加入谷氨酸可模拟体内兴奋性氨基酸损伤状态,但这种损伤与细胞凋亡的关系尚未完全明了.脑源性神经生长因子(BDNF)是神经营养因子之一,这类因子可促进神经元分化生长,对应激状态也有保护作用,但机制尚不完全明了.
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k252a抑制BDNF - TrkB信号传导通路对电刺激点燃大鼠Arc表达及癫痫发生的影响
目的 探讨BDNF - TrkB信号传导通路与杏仁核电刺激点燃大鼠Arc表达及癫痫发生的关系.方法 雄性SD大鼠随机分为空白组、假手术组、杏仁核点燃组(单纯点燃组、k252a注射组、DMSO对照组).应用Alpha - Lab 4通道信号采集及处理系统记录大鼠脑电活动.运用免疫组化检测其Arc蛋白的表达水平,采用RT - PCR、原位杂交检测Arc mRNA在海马中表达水平.结果 k252a注射组大鼠V级发作持续时间(33.00±1.41)8显著低于单纯点燃组(60.50±2.07)s、DMSO对照组(60.00±1.79)s大鼠V级发作持续时间(P＜0.01).k252a注射组3h、6hArc阳性细胞百分率显著低于单纯点燃组、DMSO对照组3h、6hArc阳性细胞百分率(P＜0.01),12 h时5组间Arc阳性细胞百分率相比表达差异无统计学意义(F =0.684,P＞0.05).RT - PCR、原位杂交结果显示:k252a注射组1h、3 h Arc mRNA表达量显著低于单纯点燃组、DMSO对照组1h、3 h Arc mRNA表达量(P＜0.01).6h时5组间Arc mRNA相比表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 k252a能够抑制BDNF - TrkB 信号传导通路对Arc表达的诱导作用从而使癫痫发作的持续时间缩短.
关键词： 杏仁核 癫痫 活性调节细胞骨架蛋白 k252a 脑源性神经生长因子
