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原因不明复发性流产中CD4+ Notch1+T细胞与IL-10的相关性分析
探讨原因不明复发性流产(URSA)中CD4+ Notch1+ T细胞(Notch1+占CD4+T细胞的比例)与白介素-10 (IL-10)表达水平的相关性.以雌性CBA/J×雄性Balb/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,采用流式细胞术检测6例未孕CBA/J雌性小鼠、6例正常妊娠模型孕14天CBA/J雌性小鼠和6例自然流产模型孕14天CBA/J雌性小鼠脾细胞中CD4+ Notch1+T细胞,同时运用ELISA法检测其血清中IL-10的表达水平.相比于未孕组,正常妊娠模型中CD4+Notch1+T细胞比例减少,而自然流产模型中CD4+Notch1+T细胞比例增加,正常妊娠模型与自然流产模型中CD4+Notch1+T细胞比例差异有统计学意义(P＜0.05).CD4+Notch1+T细胞比例与IL-10负相关(r=-0.568,P＜0.05).结论: CD4+ Notch1+T细胞可能参与原因不明复发性流产发病机制,拮抗Notch1+表达有可能成为治疗URSA新途径.
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过继转输正常妊娠孕鼠的T细胞抑制自然流产孕鼠对胚胎的排斥
目的观察过继转输正常妊娠孕鼠的T、B细胞对小鼠自然流产孕鼠妊娠预后的影响.方法以♀CBA/J×♂BALB/c为正常妊娠模型,♀CBA/J×♂DBA/2为自然流产模型,于孕9 d,采用单向混合淋巴细胞反应分析两组孕鼠脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及上清液IL-2分泌水平,以研究孕鼠母-胎免疫耐受状态;并于孕14 d观察两种模型的胚胎吸收率.然后,应用免疫磁珠阴性分选两组孕鼠脾脏T细胞和B细胞,并将两种细胞分别转输至孕4 d(着床期)的♀CBA/J×♂DBA/2孕鼠,于孕14 d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率.结果与自然流产孕鼠比较,正常妊娠孕鼠孕9 d脾脏免疫细胞对父系抗原的增殖能力及IL-2的分泌显著下降(P＜0.05),孕14 d胚胎吸收率也显著下降(P＜0.05).与转输自然流产孕鼠的T细胞相比,转输正常妊娠孕鼠T细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率显著下降(P＜0.05);而转输两组B细胞的宿主孕鼠的胚胎吸收率差异无显著性(P＞0.05).结论于孕早期过继转输正常妊娠孕鼠的T细胞能诱导宿主孕鼠母-胎免疫耐受,防止母体对胚胎的免疫排斥,使自然流产模型的妊娠预后达到正常妊娠水平.
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过继妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞治疗不明原因复发性流产
目的 观察过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)对不明原因流产的作用机制及妊娠预后的影响.方法 以雌性CBA/J×雄性BALB/c为正常妊娠模型,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为自然流产模型,磁珠分选雌性CBA/J小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞并流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析细胞纯度.将未孕CD4+CD25+Treg细胞和正常妊娠孕14d的CD4+CD25+Treg分别转输至流产模型孕4d(着床期)的雌性CBA/J孕鼠,于孕14d分别观察宿主孕鼠的胚胎吸收率并测定宿主外周血和母胎界面组织体外培养上清液中Th1Th2/Th3型细胞因子(IFN-γ/TGF-βI/IL-10)水平.结果 与对照组比较,过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞的宿丰孕鼠的胚胎吸收率(11.32%)显著下降;外周血TGF-β 1/IFN-γ中位数(438)和IL-10/IFN-γ中位数(14)显著增加;母胎界而上TGF-β 1中位数(5899.02pg/mL)和IL-10中位数(158.85pg/mL)显著增加,IFN-γ中位数(18.46 pg/mL)显著下降.结论 孕早期过继转输正常妊娠诱导的CD4+CD25+Treg细胞疗法能诱导宿主母胎免疫耐受并调节细胞因子表达,有利于妊娠维持的Th2、Th3应答偏移.
关键词： 小鼠妊娠模型 CD4+CD25+调节性T细胞 过继转输 胚胎吸收率 细胞因子 -
不明原因复发性流产小鼠模型CD4+CD25+Treg的比例及Foxp3表达的变化
目的 分析比较小鼠正常妊娠模型和流产模型中CD4+CD25+调节性T细胞CD4+CD25+Treg的比例、Foxp3蛋白表达水平及胎盘吸收率,探讨CD4+CD25+Treg与不明原因复发性流产的关系.方法 以雌性CBA/Jx雄性Balb/c为对照组,以雌性CBA/J×雄性DBA/2J为流产组,各10对,于妊娠第14天采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析CD4+CD25+Treg在CD4+细胞中所占比例,Western blot检测并比较2组CD4+T细胞中Foxp3的表达,并观察2组小鼠的胎盘吸收情况.结果 流产组CD4+CD25+Treg所占比例为(10.1±0.59)％低于对照组(15.5±0.78)％(P＜0.05).流产组胚胎吸收率为(25.6±3.5)％,明显高于对照组(2.4±1.6)％(P＜0.01).流产组Foxp3谱带密度相对值为0.30±0.018,低于正常组的0.68±0,025(P＜ 0.05).结论 小鼠的自然流产模型建立成功,流产组孕鼠CD4+CD25+Treg的比例和Foxp3蛋白表达水平明显低于正常妊娠组,提示流产组高流产率可能与CD4+CD25+Treg数量和Foxp3的表达减少有关,CD4+CD25+Treg细胞的数量减少和功能缺陷可能是不明原因复发性流产的发生机制之一.
