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辽宁省2008～2014年流行腮腺炎病毒SH和HN基因特征分析
为了解辽宁省流行的腮腺炎病毒基因特征,本研究将辽宁省2008～2014年分离到32株流行性腮腺炎病毒(Mumps virus,MuV),应用逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)针对SH和HN基因进行扩增,并对产物进行序列测定.将32株MuV与从GenBank下载的世界卫生组织(WorldHealth Organization,WHO) MuV 12个基因型27个参考株一起对SH和HN蛋白基因分子流行病学研究.除MuVi/Liaoning.CHN/16.11为G基因型外,辽宁省2008～2014年31株MuV分离株均属于F基因型.与疫苗Jeryl-Lynn株和S-79株相比,F基因型MuV在SH基因氨基酸上12个位点发生变异,在HN基因上有27个氨基酸发生变异.F基因型MuV在HN基因464～466位上增加了1个N-糖基化位点,在抗原相关位点121、122、123、279、287、336、356、442上亦发生变异,提示有可能对腮腺炎病毒的抗原性产生影响.
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辽宁省2008～2011年流行性腮腺炎野病毒SH蛋白基因特征分析
本研究用Vero/Slam细胞从辽宁省2008～2011年流行性腮腺炎暴发和散发患者的临床标本中分离到13株流行性腮腺炎野病毒(Mumps virus,MuV),应用逆转录聚合酶链反应(RT- PCR)针对MuV分离株的SH基因的316个核苷酸片段进行扩增,并对该产物进行序列测定.将这13株MuV与从GenBank下载的世界卫生组织(WHO)MuV基因型参考株一起进行分子流行病学研究.结果提示:除2011-015株外,辽宁省2008～2011年12株MuV分离株均属于F基因型,核苷酸和氨基酸同源性为94.9％～100％和83.3％～100％.与F基因型参考株序列相比,核苷酸和氨基酸同源性分别为92.4％～97.2％和96.5％～84.2％.表明2008～2011年辽宁省流行的F基因型MuV发生较大的型内变异.另外还发现F基因型MuV在SH基因上存在着特异性突变(CNt65,C Nt105,G Nt137,C Nt192,C Nt239,GNT262),而其它基因型MuV在这些位点上均未发生改变.F基因型MuV在SH基因编码的氨基酸保守位点也发生变化.如:第2位上由S→P,第6位上由P→L,第23位上由T→N,第48位上由L→P/R.与基因分型有关的氨基酸三联体,2008-01-007毒株也发生了改变,由IML变为TMP.2011-015株病毒与F基因型参考株平均核苷酸和氨基酸同源性分别为87.5％和79.8％,与G型参考株平均核苷酸和氨基酸同源性分别为96.8％和97.4％,属于G基因型.该基因型为中国内地首次发现.
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呼吸道合胞病毒SH蛋白免疫原性初步研究
目的 研究SH蛋白表达质粒pJW4303/SH/His在1小鼠体内的免疫原性,为呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗研制提供基础.方法 纯化质粒pJW4303/SH/His体外转染293T细胞,Western blot法检测蛋白表达;同时免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测体内抗SH蛋白抗体;通过体外法研究小鼠免疫血清对RSV感染的影响.结果 所构建质粒pJW4303/SH/His在体外能够正常表达,免疫机体后刺激血清产生相应抗体,该免疫血清对RSV的体外感染有一定抑制作用.结论 核酸质粒pJW4303/SH/His通过免疫小鼠,表现出较强的免疫原性,所产生的针对SH蛋白的抗体能够影响RSV对293T细胞的感染.
