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跑台训练对脑缺血大鼠脑组织Reelin、PI3KCA及突触素表达的影响
目的:观察脑缺血大鼠跑台运动训练后神经功能恢复情况及磷脂酰肌醇-3-激酶α亚单位(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit alpha isoform,PI3KCA)、Reelin及突触素表达的变化.方法:选取健康雄性SD大鼠54只,随机分为假手术组、缺血对照组及运动训练组.采用线栓法大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)方法造成局灶性脑缺血模型.运动训练组于造模后第3天进行16 d的跑台训练(15 m/min,每日30 min).运用改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,mNSS)对3组动物进行神经功能评分.采用HE染色观察各组海马神经细胞形态;运用免疫组化方法检测各组Reelin及PI3KCA阳性细胞数;Western blot检测各组缺血皮质Reelin及突触素蛋白水平.结果:MCAO术后19 d,运动训练组mNSS评分较缺血对照组明显降低(P＜0.05).HE染色显示,假手术组海马神经细胞结构完整;缺血对照组海马神经细胞出现异常变化,细胞体积缩小,核不规则,细胞排列散乱,大量变性;运动训练组海马神经细胞结构基本正常,细胞排列尚整齐.免疫组化显示,运动训练组大鼠缺血侧脑组织Reelin及PI3KCA阳性细胞数均高于缺血对照组,差异有统计学意义(18.27±4.03 vs.7.53±2.03,P＜0.01;10.27±1.62 vs.5.40±1.84,P＜0.01).Western blot检测运动训练组Reelin及突触素蛋白表达明显高于缺血组和假手术组,差异有统计学意义(P＜0.05);而缺血组较假手术组Reelin及突触素蛋白的表达水平虽增加,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论:跑台运动训练可改善局灶性脑缺血大鼠神经功能评分,上调脑组织Reelin、PI3KCA及突触素的表达,促进脑缺血后的神经功能恢复.
关键词： 脑缺血 跑台训练 Reelin 磷脂酰肌醇-3-激酶α亚单位 突触素 -
小鼠小脑片层化过程中神经元迁移及reelin的可能调节作用
目的:观察小鼠小脑皮质片层化过程细胞迁移,探讨片层化、细胞迁移和reelin蛋白之间的关系.方法:不同年龄的小鼠172只,应用免疫荧光、Nissl和HE染色法对小脑形态结构及片层化、细胞迁移情况进行观察.结果:(1)小脑片层化:E15-E16的后脑主要由神经上皮构成,P0时小脑皮质基本形成了外颗粒层、分子层、浦肯野细胞层和颗粒层,P5时浦肯野细胞层形成2～3层细胞,分子层仍有大量细胞.P20时基本形成了小脑的典型三层结构.(2)细胞迁移过程:浦肯野细胞大约在E18时开始迁移,至P7时基本完成迁移,胞体形成均一的1～2层细胞结构.同时,小年龄时NeuN阳性细胞主要见于内颗粒层和外颗粒层,P7后阳性细胞只定位在内颗粒层,迁移基本停止.(3)野生鼠(WT)和reeler小鼠比较:约P14时,WT小鼠小脑形成分子层、浦肯野细胞层及颗粒层.但是在reeler小鼠,小脑分叶不良,浦肯野细胞未迁移至目的地,排列紊乱;内颗粒层(GL)细胞分布松散、不均一.结论:在小鼠小脑的片层化形成过程中,Reelin蛋白可能参与神经细胞增殖和迁移的调控过程.
