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消癌解毒方加入LPS及CD284对人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-kB信号转导通路影响
目的:深入研究中医药抗恶性肿瘤单一信号通路及多靶点联合治疗的机制.方法:经细胞培养、倒置显微镜观察细胞凋亡形态法、MTT法及流式细胞仪检测消癌解毒方及在此基础上加入激动剂脂多糖(LPS)及TLR4阻断剂(CD284)对人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-kB信号转导通路的影响.结果:消癌解毒方具有良好的抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,空白、低、中、高各浓度含药血清组加入LPS后,人肝癌细胞抑制率与凋亡率均较相应浓度含药血清组下降,其中高浓度含药血清剂量组及加入CD284后对人肝癌细胞增殖的抑制作用明显.结论:消癌解毒方的抗肿瘤机制可能是含药血清与CD284能协同作用于人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-kB信号转导通路,抑制核转录因子NF-kB的异常持续活化,促进肿瘤细胞凋亡.
关键词： 消癌解毒方 脂多糖 CD284 TLRs/NF-kB SMMC-7721 -
消癌解毒方加入脂多糖及CD284对人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-κB信号转导通路TLR4等mRNA和蛋白表达的影响
目的:在中医药理论指导下,深入研究中医药抗恶性肿瘤单一信号通路及多靶点联合治疗的机制.方法:中药组与对照组分别以低(3.78g/kg)、中(7.56g/kg)、高(15.12g/kg)剂量消癌解毒方中药及0.9％氯化钠溶液灌胃3d,制备含药血清,经细胞培养,透射电镜观察肿瘤细胞凋亡及坏死微观结构,Western Blot法检测消癌解毒方及在此基础上加入激动剂脂多糖(LPS)及TLR4阻断剂(CD284)对人肝癌细胞SM MC-7721的TLRs/NFκB信号转导通路的影响.结果:高浓度含药血清加入CD284剂量组电镜下可见人肝癌细胞株SMMC-7721变性,水肿,胞质细胞器广泛空泡变,部分细胞碎裂,坏死,胞核溶解,胞膜破裂,细胞器外溢;Western Blot法检测TLR4等mRNA和蛋白表达水平弱.结论:消癌解毒方能够明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,其机制可能是含药血清与C D284能协同作用于人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-κB信号转导通路,抑制核转录因子NF-κB的异常持续活化,促进肿瘤细胞凋亡.
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消癌解毒方加入LPS及CD284对人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-κB信号转导通路等关键基因表达的影响
目的:运用基因芯片高通量筛选技术深入研究消癌解毒方抗恶性肿瘤单一信号通路及多靶点联合治疗的作用机制,从分子、蛋白及基因水平深层次揭示其抗癌机制.方法:中药组及对照组分别以低、中、高剂量消癌解毒方中药及0.9％氯化钠溶液灌胃3d,制备成含药血清,经细胞培养,全基因组表达谱芯片实验和实时荧光定量PCR技术检测消癌解毒方及在此基础上加入激动剂脂多糖(LPS)及TLR4阻断剂(CD284)对人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-κB信号转导通路关键基因表达的影响.结果:高浓度含药血清+CD284组与空白血清+CD284组比较,下调表达了TLRs/NF-κB信号通路TLR4,TRAF-6等表达水平.并运用实时定量PCR法验证TLR4等mRNA和基因表达水平.结论:消癌解毒方能够明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,其机制可能是含药血清与CD284能协同作用于人肝癌细胞SMMC-7721的TLRs/NF-KB信号转导通路,抑制核转录因子NF-κB的异常持续活化,促进肿瘤细胞凋亡.
