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青海地区产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌CTX-M基因型及耐药性研究
目的:了解青海地区医院分离产超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的CTX-M基因型及耐药性.方法:采用美国临床与实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)推荐的表型确证实验,收集产ESBLs大肠埃希菌(173株),提取质粒DNA;分别用CTX-M-1、CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,扩增产物测序后在Genbank数据库进行比对确定基因型.结果:173株产ESBLs大肠埃希菌中检出100株携带CTX-M型基因,共有8种CTX-M基因亚型:CTX-M-14、CTX-M-55、CTX-M-15、CTX-M-27、CTX-M-24、CTX-M-64、CTX-M-3、CTX-M-123.检出比例较高的是CTX-M-14型(34株)、CTX-M-55型(29株)和CTX-M-15型(15株),分别占总检测菌株数的19.65％、16.76％和8.67％.其中4株同时携带两种CTX-M型亚型基因.所有实验菌株药敏结果对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦、呋喃妥因耐药率较低,头孢曲松的耐药率高.本地区流行的CTX-M-14型、CTX-M-55型、CTX-M-15型三组菌株对于环丙沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他定、头孢吡肟、氨曲南的耐药率差异有统计学意义(P＜0.05).结论:①青海地区产ESBLs大肠埃希菌携带CTX-M基因比例高,CTX-M基因亚型种类多;②CTX-M-14型、CTX-M-55型和CTX-M-15型是青海地区产ESBLs大肠埃希菌主要流行的CTX-M基因亚型;③本地存在同时携带两种CTX-M亚型基株菌;④本地临床治疗产ES-BLs大肠埃希菌引起的感染时可首选亚胺培南、阿米卡星、呋喃妥因、哌拉西林/他唑巴坦、头孢替坦;⑤CTX-M-14型、CTX-M-55型和CTX-M—15型对于环丙沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、头孢他定、头孢吡肟、氨曲南的耐药率具有统计学差异.
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肠球菌β-内酰胺酶测定及药敏分析
目的:观察96株肠球菌的耐药性与β-内酰胺酶的关系.方法:用纸片扩散法检测5种抗生素的耐药性,用NITROCEFIN法测定β-内酰胺酶的状况.结果:肠球菌对氨基糖甙类抗生素具有高度耐药性,未发现万古霉素的耐药株;对青霉素类的抗生素的耐药性,屎肠球菌明显高于粪肠球菌.结论:96株中40株肠球菌β-内酰胺酶阳性,12株屎肠球菌中9株产酶,明显高于粪肠球菌.屎肠球菌对青霉素的耐药性与β-内酰胺酶产生率呈正相关.
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251株产ESBLs的G-杆菌药敏分析及临床意义
目的 了解革兰氏阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率和耐药性.方法 收集不同患者痰、尿、伤口分泌物等标本379株,用法国梅里埃公司生产ATBBLSE试剂条,检测超广谱ESBLs,并同时进行药敏试验.结果 在379株革兰氏阴性(G-)杆菌中,有251株革兰氏阴性杆菌产超广谱ESBLs,产酶率66.23%;在123株大肠埃希菌、126株肺炎克雷伯菌、54株肠杆菌、76株其它肠杆菌中ESBLs检出率分别为70.73%、74.60%、62.96%、47.37%,感染部以呼吸道为主(主要是肺炎克雷伯菌),其次为泌尿生殖道和伤口渗液(主要是大肠埃希菌),产ESLBs菌对亚胺培南、美洛培南敏感,阿米卡星较敏感.结论 革兰氏阴性菌是感染的主要致病菌,及时、准确地检测出耐药菌株及其耐药机制,指导临床合理使用抗生素,延缓细菌耐药性的产生、控制耐药菌株的播散,以降低院内感染.
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二种产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性分析
目的:对新疆克拉玛依市人民医院2013年分离出的384例产ESBL的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性进行监测分析;了解克拉玛依地区常见ESBL细菌耐药动态,为临床选择用药提供新依据.方法:对临床分离产与非产ESBL细菌分布构成及耐药性进行回顾性分析.结果:检出大肠埃希菌190株其中ESBL阳性101株(53.1％);肺炎克雷伯菌194株,其中ESBL阳性28株(14.4％).大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBL阳性菌对氨基糖苷类,喹诺酮类药物耐药明显,均超过50％,明显高于ESBL阴性菌;氨苄西林/舒巴坦对ESBL阳性菌耐药率达51.5％.结论:细菌的耐药性分析能为临床合理用药提供参考.
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β-内酰胺类抗生素口服制剂微生物限度检查方法的建立
目的:建立β-内酰胺类抗生素微生物限度检查方法.方法:采用薄膜过滤并在培养基中加入β-内酰胺酶的方法,去除β-内酰胺类抗生素的抗菌活性.结果:本方法满足中国药典2005年版验证试验的基本要求.5株验证菌株中枯草芽孢杆菌对β-内酰胺类抗生素敏感,可作为β-内酰胺类抗生素微生物限度检查方法的质控菌株.结论:该方法可作为β-内酰胺类抗生素的常规微生物限度检查方法.
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蜡样芽孢杆菌CMCC(B)63301产生青霉素酶的特性及其应用的研究
目的:研究蜡样芽孢杆菌CMCC(B)63301发酵青霉素酶的方法及其酶学特点.方法:采用中国药典95版的方法进行发酵,并对其诱导方法进行调整;采用紫外分光光度法测定该酶水解青霉素G的活性和水解谱,考察不同条件下此酶的活性变化.结果:经青霉素诱导,再按药典方法发酵得PG酶活性高;活性测定在pH 4～7环境下稳定,随温度的升高活性增加,55 ℃时达高;此酶不论是以固体方式保存,还是以液体方式保存,都至少有半年以上的稳定性;此酶对大多数青霉素类抗生素都有酶解能力.结论:本株蜡样芽孢杆菌产生的青霉素酶活性非常稳定,紫外分光光度动力学法测定酶活性简便、快速.
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脑外伤患者中产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的监测及临床意义
目的研究脑外伤病人继发肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其对常用抗生素的耐药性.方法应用纸片扩散确证法检测ESBLs,Kirby-Bauer(K-B)法检测细菌对抗生素的耐药性.结果肺炎克雷伯菌产酶率为30.0%,大肠埃希菌产酶率为25.0%;除头孢他啶和亚胺培南外,产ESBLs株对β-内酰胺类抗生素高度耐药,且其耐药性显著高于非产酶株(P＜0.05),产ESBLs株对亚胺培南完全敏感,喹诺酮类抗生素对产ESBLs株的敏感性高于其它抗生素.结论脑外伤患者中产ESBLs菌感染已经比较常见,应引起高度重视.
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医院感染生物被膜铜绿假单胞菌β-内酰胺酶活性检测
目的检测生物被膜铜绿假单胞菌(PA)产β-内酰胺酶的活性,为临床治疗其引起的院内感染提供参考依据.方法用平板法培养细菌生物被膜,银染色法快速鉴定.检测浮游PA(A组)、生物被膜PA(B组)及亚胺培南(C组)和头孢西丁(D组)诱导后生物被膜PA产β-内酰胺酶的活性.结果B、C、D组均有明显的生物被膜形成,其β-内酰胺酶活性[(11.38±3.58)U/ml、(15.76±4.71)U/ml、(14.86±4.19)U/ml]与A组[(0.577±0.159)U/ml]比较差异有非常显著性(F=63.193,P＜0.01).经亚胺培南和头孢西丁诱导后生物被膜PA产β-内酰胺酶活性(C组和D组)与B组比较差异有显著性(q=4.903,3.968,P＜0.05).结论生物被膜下PA高产β-内酰胺酶,合理用药减少PA生物被膜(BF)形成是预防医院感染(HI)的有效措施.
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1例耐甲氧西林溶血表皮葡萄球菌检测及用药分析
目的 了解淋球菌尿道炎合并或继发感染耐甲氧西林溶血表皮葡萄球菌检测及耐药性,为临床治疗合理用药提供依据,指导临床临床合理使用抗菌药物,溶血表皮葡萄球菌的检出文献未见报道,产β-内酰胺酶菌株临床报道文献资料较少.方法 从门诊淋球菌感染患者尿道分泌物中检测出耐甲氧西林溶血表皮葡萄球菌1例,对19种抗菌药物体外药敏试验结果进行耐药性分析.结果 青霉素、复方新诺明、庆大霉素、红霉素、四环素、诺氟沙星、苯唑西林耐药,克林霉素、左氧氟沙星中介,米诺环素、万古霉素、替考拉宁、利福平、夫西地酸、呋喃妥因、奎奴普汀/达福普汀敏感;纸片法,阿莫西林/克拉维酸、头孢西丁、阿奇霉素、环丙沙星均耐药.结论 表皮葡萄球菌感染以耐甲氧西林菌株(MRSE)居多,MRSE对临床常用抗生素呈多重耐药,应加强表皮葡萄球菌耐药性监测,根据药敏结果合理使用抗菌药.
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2003年度肠杆菌科细菌感染情况及耐药性分析
目的:本文对2003年度全院共检出的182株肠杆菌感染情况耐药性进行分析.方法:用VITEK仪鉴定细菌;药敏试验采用K-B法.结果:标本来源主要为痰,其次为尿液.检出的细菌主要为大肠杆菌,占59%;其次为克雷佰氏杆菌,占31%;产超广谱β-内酰胺酶的共60株,占33%.药敏试验显示,肠杆菌科细菌对磺胺类、氨基甙类、青霉素类、喹诺酮类、四环素类及头孢类等多种抗生素的耐药率＞50%;对亚胺培南敏感,尚未出现耐药菌株.结论:分析细菌耐药情况可指导临床医生用药.
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2015-2016年我院呼吸道嗜血杆菌感染流行病学特征及耐药性分析
目的:了解我院呼吸道感染嗜血杆菌的生物分型及耐药性.方法:收集2015年6月-2016年6月年我院自呼吸道分离的嗜血杆菌,对其进行鉴定、生物分型、采用纸片扩散法进行药敏试验,头孢硝噻吩纸片法进行β-内酰胺酶测定.结果:2015年6月-2016年6月我院自呼吸道分离出流感嗜血杆菌74株,副流感嗜血杆菌20株,其他11株;流感嗜血杆菌检出Ⅱ(29株)、Ⅲ(28株)、Ⅳ(3株)、Ⅵ(2株)、Ⅶ(2株)、Ⅷ(5株)共6个生物型,产β-内酰胺酶26株;副流感嗜血杆菌检出Ⅰ(1株)、Ⅱ(2株)、Ⅲ(7株)、Ⅳ(3株)、Ⅶ(9株)、Ⅷ(3株)共6个生物型,产β-内酰胺酶7株;流感嗜血杆菌对复方新诺明(66.7％)和氨苄西林(30.0％)耐药率较高;副流感嗜血杆菌对复方新诺明(45.5％)、和四环素(36.4％)耐药率较高.结论:我院呼吸道嗜血杆菌以流感嗜血杆菌为主,生物分型以Ⅱ型和Ⅲ型为主,产β-内酰胺酶率为35.14％,对氨苄西林和复方新诺明耐药率高.
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β-内酰胺类抗生素的作用机制及应用
目的 综述文献介绍β-内酰胺类抗生素的合理应用,为临床用药提供借鉴.方法 引述文献,按β-内酰胺类抗生素的不同种类总结应用机制.结论 β-内酰胺类抗生素被广泛应用,临床应用中应合理.
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老年人肺炎克雷伯菌属肺部感染的临床特点和耐药性研究
目的了解老年人克雷伯菌属肺部感染的临床特点和细菌耐药性.方法对61例老年人肺炎克雷伯菌属肺部感染的临床资料进行统计分析,用纸片法检测克雷伯菌属对阿米卡星等12种抗生素的体外药敏试验并检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs).结果 61例患者有基础疾病37例,占93.4%,临床症状以发热、咳嗽、咳痰为主,胸部X线以含有空气支气管征的大叶肺实变(26.2%)、小叶浸润(59.9%)和肺脓肿(14.8%)的形成为主要病变,有10例(16.4%)叶间隙成弧形下坠形成克雷伯菌属肺部感染特有的X线征象.61例患者中,产ESBLs菌19株,占31.1%,对多种抗生素交叉耐药,对亚胺培南和部分含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素敏感.结论老年人肺炎克雷伯菌属肺部感染者多有基础疾病,临床表现无特异性.诊断依靠病原菌检测并结合临床和X线检查,治疗应根据药敏测定,选择敏感抗生素.对产ESBLs克雷伯菌属引起肺部感染者,应用亚胺培南或部分含β-内酰胺酶抑制剂的复合抗生素,或者选用药敏测定显示敏感的药物.合理使用抗生素,控制和减轻细菌耐药性的增长已成为当务之急.
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产β-内酰胺酶大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析
目的研究大肠杆菌、肺炎克雷伯菌临床株产β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,分析临床菌株对抗菌药物的敏感性.方法采用琼脂纸片扩散法、表型确证试验研究临床株产ESBLs情况及耐药表型.结果大肠杆菌和肺炎克雷伯菌临床株产ESBLs比率分别为30.6%和30.4%,在ICU病房产ESBLs发生率达48.8%.产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率低,其次为阿米卡星.产ESBLs菌株可在人体多部位定植和感染.结论产ESBLs菌株比非产ESBLs菌株发生医院感染的概率高,并对大多数抗生素耐药.ICU病房分离株产ESBLs发生率高于内科和外科等病房.
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儿童呼吸道感染流感嗜血杆菌的检验及耐药性分析
目的 :针对儿童患者呼吸道感染流感嗜血杆菌(Hi)的临床特征进行鉴定,并分析流感嗜血杆菌的耐药性,为临床用药提供指导意见.方法 :对我院2016年11月-2017年8月儿科门诊收治的流感患儿呼吸道标本分离出的40株嗜血杆菌进行分析,探究流感嗜血杆菌的检出率和对抗生素的耐药性.结果 :Hi对药物的耐药率由高到低依次为复方新诺明(62.5％)、氨苄西林(55％)、头孢噻吩(37.5％).流感嗜血杆菌敏感性高的药物为利福平(95％)和头孢噻肟(95％),其次为阿奇霉素(92.5％)和氯霉素(92.5％),依次阿莫西林(90％)和氧氟沙星(87.5％)等.讨论:对于流感嗜血杆菌耐药性较高的复方新诺明,氨苄西林和头孢噻吩这些药物不适于临床,要注意多重耐药性,应首选敏感率较高的阿奇霉素和头孢噻肟等抗生素.
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慢性重型肝炎患者泛耐铜绿假单胞菌40种耐药相关基因的研究
目的 研究慢性重型肝炎患者泛耐铜绿假单胞菌40种耐药相关基因.方法 应用法国梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条和美国BD公司的Phoenix NMIC/ID-109鉴定/药敏板鉴定和细菌药敏试验,应用PCR法检测1株泛耐铜绿假单胞菌临床分离株29种β-内酰胺酶相关基因、外膜蛋白D2基因(oprD2)、6种氨基糖甙类修饰酶基因(AMEs)、消毒剂/磺胺耐药基因(qacE△1-sul1),3种整合子基因(intI1、2、3)等40种耐药相关基因,分析其分布情况.结果 在本株菌,6种耐药相关基因阳性(二种β-内酰胺酶基因(blaTEM、blaOXA10)、二种氨基糖甙类修饰酶基因(aac(6')-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ)、qacE△1-sull和Ⅰ类整合子基因(intI1)),同时oprD2缺失;其它27种β-内酰胺酶基因、4种氨基糖甙类修饰酶基因(aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、ant(2")-Ⅰ)和2种整合子基因(intI2、intI3)均为阴性.结论 本株泛耐菌耐药机制为多重机制,主要与7种耐药相关基因(blaTEM、blaOXA10、oprD2缺失、aac(6')-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ、qacE△1-sul1和Ⅰ类整合子)有关.经检索中文生物医学期刊文献数据库(CMCC)和medline数据库,本研究是泛耐铜绿假单胞菌检测耐药相关基因多的报道.
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慢性重型肝炎患者痰泛耐药鲍曼不动杆菌39种耐药相关基因的研究
目的 研究慢性重型肝炎患者痰泛耐药鲍曼不动杆菌39种耐药相关基因.方法 应用法国梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条和美国BD公司的Phoenix NMIC/ID-109鉴定/药敏板鉴定和细菌药敏试验,应用PCR法检测分离于慢性重型肝炎患者合格痰标本1株泛耐Ab临床分离株29种β-内酰胺酶相关基因(bla)、6种氨基糖甙类修饰酶基因(AMEs)、消毒剂/磺胺耐药基因(qacE△1-sul1)、3种整合子基因(intI1、2、3)等39种耐药相关基因,分析其分布情况.结果 本株菌7种耐药相关基因阳性(二种bla基因(blaTEM、blaADC)、三种AMEs基因(aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ、qacE△1-sul1和Ⅰ类整合子基因(intI1));其它27种bla基因、3种AMEs基因(aac(6')-Ⅱ、aac(3)-Ⅱ)、ant(2")-Ⅰ)和2种整合子基因(intI2、 intI3)均为阴性.结论 本株泛耐菌耐药机制为多重机制,主要与7种耐药相关基因(blaTEM、blaADC、aac(6')-Ⅰb、aac(3)-Ⅰ,ant(3")-Ⅰ、qacE△1-sul1和Ⅰ类整合子)有关.经检索中文生物医学期刊文献数据库(CMCC)和medline数据库,本研究是泛耐Ab检测耐药相关基因多的报道.
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神经内科住院患者医院感染肺炎克雷伯菌的β-内酰胺酶分类检测
目的 了解神经内科住院患者医院感染肺炎克雷伯菌所产各种β-内酰胺酶(β-lase)分布情况.方法 采用多底物改良相邻纸片法检测神经内科住院患者医院感染34株肺炎克雷伯菌所产各种β-lase.结果 神经内科住院患者医院感染34株肺炎克雷伯菌中产[β-lase菌株27株,总β-lase检出率为79.4%,其中产青霉素酶11株(32.4%),广谱酶1株(2.9%),单产ESBLs 5株(14.7%),产复合酶10株(29.4%),ESBLs总计15株(44.1%),未检出头孢菌素酶、培南酶.结论 本组神经内科住院患者医院感染肺炎克雷伯菌产β-lase 以青霉素酶、ESBLs为主,未检出头孢菌素酶、培南酶.
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血液病患者医院感染大肠埃希菌产β-内酰胺酶的分类检测及耐药性分析
目的 探讨血液病患者医院感染大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)所产各种β-内酰胺酶(β-lase)的分布及其耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 采用多底物纸片法(协同法,拮抗法),超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认试验、AmpC酶检测法检测38株血液病患者医院感染E.coli所产各种β-lase,采用琼脂扩散法分析其耐药性.结果 ①38株E.coli.总β-lase检出率为68.5%,其中产青霉素酶13株(34.2%),产广谱酶5株(13.2%),产ESBLs 8株(21.0%),未检出AmpC酶、复合产酶、碳青霉烯酶.②非产酶E.coli对五大类9种抗生素均敏感;26株产β-内酰胺酶E.coli中,氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、亚胺培南、庆大霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、复方新诺明、四环素耐药率分别为100.0%、34.2%、30.8%、0.0%、61.5%、5.4%、75.9%,61.5%、69.2%.结论 ①血液病患者医院感染E.coli产β-lase率高,产三种酶,以青霉素酶、ESBLs为主,未检出AmpC酶、碳青霉烯酶、产复合酶.②不同菌株耐药谱不同,非产酶E.coli对五大类9种抗生素均敏感;产酶菌株对亚胺培南、丁胺卡那霉素较为敏感.
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弗劳地柠檬酸杆菌β-内酰胺酶检测
目的 探讨弗劳地柠檬酸杆菌所产各种β-内酰胺酶(β-lase)的分布情况.方法 以头孢硝噻吩试验检测33株弗劳地柠檬酸杆菌所产β-lase,采用多底物纸片法(协同法、拮抗法)、AmpC酶检测法、碳青霉烯酶分类检测其所产各种β-lase.结果 检出33株弗劳地柠檬酸杆菌,其中各种酶全阴菌为4株,29株检出β-lase,总检出率为87.9%(29/33);头孢硝噻吩试验27株为阳性(81.8%);29株产酶菌株中,产青霉素酶为2株,产头孢菌素酶为3株,产广谱酶为5株,产超广谱酶为11株,产超广谱酶+AmpC酶为6株,ESBLs总产酶率51.5%,产碳青霉烯酶为2株(均为复合产超广谱酶+金属酶).结论 弗劳地柠檬酸杆菌产β-lase率、ESBLs总产酶率和复合产酶率很高,产六种酶,以广谱酶、ESBLs为主.
