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扎里奴思方干预骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠黏附分子及NeuN表达的影响
目的:观察扎里奴思方(扎方)干预骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大脑中动脉阻塞(MCAO)模型大鼠黏附分子及神经元核抗原(NeuN)表达的影响,并探讨其作用机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、扎方组、移植组和联合组;线栓法制备大鼠MCAO模型,体外全骨髓贴壁筛选法培养及扩增BMSCs;大鼠ig给药(14.6 g·kg-1·d-1),BMSCs悬浮液经颈内动脉移植人脑;移植后1,3,7,14 d取材,评价神经功能积分(NS),逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)和整合素α4mRNA表达,免疫组化法测NeuN表达.结果:MCAO模型大鼠NS及NeuN表达较假手术组显著降低(P＜0.01),VCAM-1及整合素α4mRNA表达显著增高(P＜0.01);与模型组比较,扎方1,3,14 d移植3,7,14 d及联合各组NS增加(P＜0.01,P＜0.05),扎方、移植及联合各组NeuN增加(P＜0.01),VCAM-1及整合素α4mRNA降低(P＜0.01);与移植组比较,扎方7d组NS减小(P＜0.05),联合1,3,14 d组NS增加(P＜0.01),扎方1,3d组VCAM-1mRNA减少(P＜0.01),扎方1,7,14 d组整合素α4mRNA减少(P＜0.01),联合各组VCAM-1及整合素α4mRNA均降低(P＜0.01),扎方及联合各组NeuN增高(P＜0.01);扎方与联合组比较,联合各组NS及NeuN表达增加(P＜0.01),VCAM-1和整合素α4mRNA表达降低(P＜0.01);同组间比较,各组NS,NeuN及VCAM-1 mRNA均以7d组变化显著,14 d有明显改善(P＜0.01),整合素α4mRNA以3d组变化显著,14 d可改善(P＜0.01).结论:脑缺血后神经功能及神经元均出现不同程度损伤;扎方和BMSCs移植均可不同程度改善脑缺血后神经功能及脑组织神经元状态,以二者联合作用显著,其机制可能与干预VCAM-1及整合素α4动态表达有关.
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α整合素表达及与骨肉瘤细胞恶性侵袭的关系
目的:探讨人骨肉瘤MG-63细胞表面纤联蛋白相关的α整合素的表达及其在肿瘤侵袭中的作用.方法:实验于2004-01/08在南方医院中心实验室完成.人骨肉瘤细胞系MG-63在含体积分数为0.1的血清的DMEM培养基中培养.采用免疫细胞化学和流式细胞仪检测MG-63细胞表面α整合素的表达;基质胶/滤膜法检测MG-63细胞的侵袭能力;抗体及短肽RGD封闭法研究不同的纤联蛋白相关的α整合素在骨肉瘤侵袭过程中的作用.结果:①α4,α5和αⅤ整合素在MG-63细胞表面均有阳性表达.②α5和αV功能封闭抗体对MG-63细胞的侵袭作用无明显影响.③α4表达较弱,但α4封闭抗体和RGD短肽都可明显抑制MG-63细胞的恶性侵袭能力(P＜0.05).④α4功能封闭抗体和RGD短肽联合应用与RGD单独应用对MG-63细胞侵袭的抑制作用无明显差别.结论:不同α整合素受体对骨肉瘤细胞恶性侵袭的作用不同,α4整合素对MG-63细胞的恶性转移能力有明显的诱导作用,而α5和αⅤ整合素在此作用中无明显的作用.除α4整合素以外,还有其他细胞表面受体可以通过与纤联蛋白的相互作用而诱导MG-63细胞的侵袭.
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整合素αv、α4在小鼠胚泡植入中的作用
目的:探讨整合素αv、α4在小鼠胚泡植入中的作用.方法:在体外培养的人蜕膜细胞中分别加入整合素αv、α4抗体,与小鼠胚泡共培养,观察整合素αv、α4抗体对小鼠胚泡在体外培养的人蜕膜细胞上的粘附和铺展的影响.结果:整合素αv抗体组,胚泡的粘附受到暂时抑制,48 h时大部分胚泡才粘附并开始铺展;整合素α4抗体组,胚泡的粘附率不受影响,但铺展率及滋养层细胞的扩展面积以剂量依赖的方式受到抑制.结论:整合素αv、α4能够调节胚泡在人蜕膜细胞上的植入,其中整合素αv可能与胚泡的粘附有关,而整合素α4可能与胚泡侵入和滋养层细胞的进一步生长相关.
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炎症性肠病口服药物的新进展
近二十年来,随着对炎症性肠病(IBD)发病免疫学机制的深入研究,其治疗药物已由传统的5-氨基水杨酸、糖皮质激素和硫唑嘌呤发展至静脉或皮下注射生物制剂,如肿瘤坏死因子抑制剂和整合素拮抗剂.但由于上述药物的给药方式、长期使用的不良反应以及治疗疾病时失效或失应答,寻找具有稳定结构、不良反应小的口服药物已成为临床的迫切需求.目前IBD的新型口服药物包括α4整合素拮抗剂AJM300、JAK拮抗剂tofacitinib和反义寡核苷酸mongersen等,本文就新型口服药物的研究现状作一综述.
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健胎液对小鼠子宫内膜LIF表达的影响
目的:探讨小鼠围着床期子宫内膜LIF的表达规律及健胎液对小鼠子宫内膜LIF表达的影响.方法:小鼠胚胎着床障碍模型诱导方法及对各组小鼠干预处理同第一部分,取正常组、中药组、模型组小鼠妊娠第5天子宫内膜,应用超敏免疫吸附法检测内膜LIF的表达情况.比较3组小鼠子宫内膜LIF的表达情况,结合整合素α4,β3亚基的表达情况,分析3者在围着床期中表达的联系.结果:中药组LIF的表达较模型组明显升高(P＜0.05),模型组水平低,明显低于正常组(P＜0.01).中药组LIF的表达水平与正常组相近,差异无显著性意义(P＞0.050).结论:健胎液对小鼠围着床期子宫内膜的LIF的表达有促进作用,与健胎液对α4,β3的表达影响相同.
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鼻息肉中ICAM-1、VCAM-1和整合素α4的表达
目的 检测细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)和整合素俚α4在鼻息内中的表达,探讨此三种黏附分子在鼻息肉发生中的作用. 方法 采用流式细胞术(FCM)检测ICAM-1、VCAM-l和整合素α4在60例鼻息肉患者的鼻息肉标本及20例正常中鼻甲黏膜中的表达.结果 ①ICAM-1、YC(AM)-1和整合素α4在鼻息肉组织中的表达明显高于正常中鼻甲黏膜.②ICAM-1、VCAM-1和整合素α4在慢性鼻窦炎鼻息肉各分期中的表达无显著差异.结论 ICAM-1、VCAM-1及整合素α4在鼻息肉中的表达明显高于正常中鼻甲黏膜,三者可能与鼻息肉的发生有关;ICAM-1、VCAM-1及整合素α4在鼻息肉各临床分型分期中无显著差异,表明在初发鼻息肉与复发鼻息肉形成过程中所起的作用是一样的.
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人类骨髓成纤维样基质细胞对多发性骨髓瘤细胞迁移和归巢特性的影响
目的 观察人类骨髓成纤维样细胞系HFCL对多发性骨髓瘤细胞RPMI8226增殖、迁移和归巢的影响.方法 采用体外细胞培养,建立RPMI8226细胞和HFCL细胞共培养体系,锥虫蓝拒染法测定生长曲线;流式细胞术(FCM)检测细胞周期和黏附分子CD49d的变化;RT-PCR检测CXCR4基因的表达情况.结果 HFCL细胞抑制RPMI8226细胞生长,且与HFCL细胞直接接触组的抑制作用大于非直接接触组(Transwell)组.RPMI8226细胞与HFCL细胞共培养后,直接接触组G1期细胞增高,S期细胞减少:HFCL细胞下调RPMI8226细胞的CXCR4和CD49d 的表达,单独培养组明显高于直接培养组;Transwell组无明显变化.结论 人类骨髓成纤维样细胞HFCL能抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI8226的增殖,抑制CXCR4和CD49d的表达,影响骨髓瘤细胞的迁移和归巢.
