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九味熄风颗粒生物碱类成分指纹图谱建立及其多指标成分定量分析
目的:建立九味熄风颗粒的指纹图谱,并同时测定其中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱.方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱,以甲醇-0.1％三乙胺为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温35℃,检测波长246nm.对10批九味熄风颗粒进行了指纹图谱及含量测定研究,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价软件”(2004A)进行分析.结果:得到分离度、重复性均较好的九味熄风颗粒指纹图谱,共标示出13个共有峰,各批次样品相似度＞0.96;通过对照品比对,确定了4个成分,分别为钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱,并对其进行定量分析.结论:该方法快速、简便、准确,可作为全面评价该制剂质量的有效方法之一.
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去氢钩藤碱对谷氨酸功能低下精神分裂症模型小鼠自主活动和探究行为的影响
目的：观察不同剂量去氢钩藤碱对MK-801所致的谷氨酸功能低下小鼠模型自主活动及探究行为的影响。方法昆明种小鼠66只分组，进行下述对照观察：①取30只为A组：观察去氢钩藤碱高、中、低剂量（2.6、1.3、0.75mg/kg）灌胃3d对昆明种小鼠自主活动和探究行为的影响；②取36只为B组：给予浓度为0.072mg/mLMK-801腹腔注射诱导小鼠自主活动增加，观察去氢钩藤碱各组对MK-801所致小鼠高活动性的影响。结果①A组：去氢钩藤碱各组与空白对照组比较，活动总路程差别不明显（P>0.05）。②B组：模型组与空白组比较活动总路程明显增加（18692.47±4108.67 vs 6893.08±1210.11，P<0.01），去氢钩藤碱各剂量组与模型组相比：活动总路程明显减少（9736.95±870.22，9396.5±1460.13，9416.05±1266.25vs18692.47±4108.67，P<0.05）；中央区和周边区活动路程也有不同程度减少（P<0.05）。结论①去氢钩藤碱对正常小鼠自主活动和探究行为无影响；②去氢钩藤碱对MK-801所致的谷氨酸功能低下小鼠自主活动和探究行为的增高有下调节作用。
关键词： 去氢钩藤碱 自主活动 地卓西平马来酸盐(MK-801) 谷氨酸功能低下 -
钩藤叶化学成分的研究
目的 研究茜草科植物钩藤Uncaria rhynchophylla(Miq.)Jacks.叶的化学成分.方法 用多种色谱方法和重结晶法进行分离和纯化,经理化、光谱和色谱分析等方法鉴定结构.结果从钩藤叶中分离得到5个化合物,鉴定为喜果苷(vincoside lactam,Ⅰ)、异去氢钩藤碱(isocorynoxeine,Ⅱ)、异钩藤碱(isorhynchophylline,Ⅲ)、去氢钩藤碱(corynoxeine,Ⅵ)、钩藤碱(rhynchophylline,Ⅴ).结论化合物Ⅲ为首次从钩藤叶中分离得到,通过2D-NMR技术完善了化合物Ⅲ的核磁数据.
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不同采收期毛钩藤药材中钩藤碱等3种成分的含量变化研究
目的 测定不同采收期毛钩藤中钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量变化,为毛钩藤的合理采收及品质评价提供依据.方法 采用高效液相色谱法,色谱条件:WondaSil C18(4.6mm×200 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.2％氨水梯度洗脱,流速为1 ml·min-,检测波长为254nm,柱温为25℃.结果 1～12月采收的毛钩藤中的钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量得到准确测定.结论 当年秋季至次年初夏采收的毛钩藤药材质量相对较好.
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钩藤生物碱提取工艺研究
目的:优选钩藤生物碱的佳提取工艺.方法:以钩藤总碱的含量,钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱的含量总和及浸膏得率为评价指标,对比了水煮、渗漉、索式回流和回流四种方法的提取效果,优选出回流的提取方法,并采用正交设计的方法考察溶剂浓度、溶剂倍量、提取时间及提取次数对钩藤生物碱的提取率和含量的影响.结果:钩藤生物碱的佳提取工艺为:10倍量90％乙醇,回流提取2次,每次1h.结论:优选确定的工艺简便、稳定可行.
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UPLC法同时测定钩藤提取物中4种生物碱类成分的含量
目的:建立UPLC法同时测定钩藤提取物中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量.方法:采用BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm);以5 mmol/L醋酸铵缓冲液(0.01％氨水调pH =9)(A)-甲醇(B)-乙腈(C)三元体系为流动相进行梯度洗脱;流速:0.44 mL/min;柱温:30℃;检测波长:245 nm.结果:钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的质量浓度在2.97～296.67μg/mL、1.31～450.00 μg/mL、1.58 ～433.33μg/mL、1.28～438.33 μg/mL的范围内线性关系良好,r为0.9993 ～ 0.9995;各成分平均加样回收率在97.34％ ～101.85％,RSD≤2.65％.钩藤提取物中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量分别为23.48、6.19、6.73、9.22 μg/g.结论:该方法准确可靠,便于操作,可用于同时测定钩藤提取物中4种生物碱的含量.
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去氢钩藤碱与异去氢钩藤碱在大鼠体内的生物转化
目的 探讨去氢钩藤碱与异去氢钩藤碱在大鼠体内的生物转化.方法 去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱对大鼠经口投药30 min内收集到的胆汁样品进行高效液相色谱串联质谱仪(LC-MS)测定.结果 发现去氢钩藤碱的底物和2个Ⅰ相代谢物、2个Ⅱ相代谢物可以检出,而异去氢钩藤碱的Ⅰ相代谢物没有检出,但Ⅱ相代谢物检出4个.结论 分析结果显示这2个四环氧化吲哚生物碱的代谢与钩藤碱、异钩藤碱的肝脏代谢非常相似,并且都存在经口投药之后的肝首过效应.体外实验验证了以上代谢过程的结论,并显示是肝微粒体酶CYP450对去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱在肝脏的生物转化起催化作用.
