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猪胆汁炮制对黄连中生物碱类成分溶出的影响
目的:比较黄连、胆黄连及其水煎液中生物碱类成分的含量,研究猪胆汁炮制对黄连中生物碱类成分溶出效果的影响,探讨胆黄连寒性增强的炮制机制.方法:采用紫外分光光度法(UV)测定黄连、胆黄连及其水煎液中总生物碱含量,检测波长345 nm.采用高效液相色谱法(HPLC)测定黄连、胆黄连及其水煎液中盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量,流动相乙腈(A)-磷酸三乙胺水溶液(B)梯度洗脱(0 ～ 15 min,25％ ～ 30％A;15 ～ 20 min,30％～55％A),流速1.0 mL·min-1,检测波长345 nm.结果:黄连水煎液、胆黄连水煎液中总生物碱的转移率分别为71.17％和78.50％;黄连水煎液中盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的转移率分别为73.93％,51.59％,56.16％;胆黄连水煎液中三者的转移率分别为80.42％,64.21％,64.79％.结论:黄连经猪胆汁炮制后能够增加黄连中生物碱类成分在水煎液中的溶出,可达到寒性增强的炮制目的.
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一测多评法与外标法测定胆黄连中生物碱类成分含量比较
目的：建立一测多评法（QAMS）测定胆黄连中3种生物碱成分含量，并与外标法测定结果进行比较，探讨QAMS的可行性。方法采用高效液相色谱法，以盐酸小檗碱为内参物，建立盐酸小檗碱与盐酸巴马汀、盐酸药根碱间的相对校正因子，用所得相对校正因子进行含量计算（计算值），实现一测多评。同时采用外标法测定3个成分的含量（实测值），比较计算值与实测值的差异。结果10批胆黄连中3种生物碱成分含量的计算值与实测值无显著差异。结论 QAMS可用于胆黄连中生物碱类成分的含量测定。
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基于尿液代谢组学研究黄连和胆黄连对热证药效作用机制的差异性
利用超高效液相色谱与LTQ-Orbitrap-MS串联质谱仪的尿液代谢组学方法,研究黄连、胆黄连对热证模型大鼠药效作用机制的差异性,探讨胆黄连炮制的科学性.采用大鼠灌胃附子、干姜、肉桂水煎液15d并皮下注射干酵母混悬液致热证模型,给药15d后采集各组大鼠造模后0～6,6～12,12～24 h的尿样;采用主成分分析(PCA)、偏小二乘-判别分析(PLS-DA)法等技术进行数据处理.正常组与模型组在0～6,6～12 h达到分离,12～24 h出现重叠,分离趋势不明显;黄连组和胆黄连组0～6h大鼠尿样与模型组分离,接近于正常组;黄连组和胆黄连组在0～6,6 ～ 12 h大鼠尿样有分离趋势.鉴定30个与热证相关的差异代谢物,结果表明,黄连经猪胆汁炮制后对热证模型大鼠的整体药效作用发生改变,胆黄连解热作用具有多靶点、起效快、作用强度较强的特点,主要通过对胆碱能神经递质、氨基酸代谢、嘌呤代谢的调节发挥解热作用.
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胆黄连在实热证大鼠体内的整合药代动力学与药效学的相关性
研究胆黄连中生物碱成分的整合药代动力学与药效作用的相关性.大鼠分为正常组、模型组和给药组,模型组采用实热证模型,各组于给药后0、3、6和9h分别测定各大鼠的直肠体温,并采用UPLC-MS/MS方法检测胆黄连灌胃给药后不同时间点的小檗碱、药根碱和巴马汀的血药浓度,并结合权重系数,计算胆黄连中3种生物碱成分整合药代动力学参数,并与药效体温数据结果相结合,分析二者的相关性.胆黄连中生物碱成分在血浆中的达峰时间是1.11 h,胆黄连的解热作用在3h显著;胆黄连的整合药时曲线出现双峰现象,第二次达峰时间是4.82 h,胆黄连的解热作用在3～6 h较为显著,在6～9 h解热作用明显降低.胆黄连中的生物碱成分在体内的动态变化过程与解热药效作用之间的相关性良好.
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正交试验法优选胆黄连炮制工艺的研究
目的 通过优选出胆黄连的佳炮制工艺,为控制黄连炮制品种质量、探讨炮制机制以及考察辅料对药物寒热药性可能产生的影响奠定基础.方法 采用正交试验法,以胆黄连饮片外观性状、醇浸出物和3种生物碱总量为考察指标,选择胆汁量、炒制时间及炒制温度3个因素(每因素3水平),对胆汁制黄连工艺进行优选.结果 胆汁用量、炒制温度对试验结果有显著性影响,影响程度为胆汁量＞炒制温度＞炒制时间,确定佳炮制工艺为加入12%胆汁,1.0℃炒制10 min.结论 本研究对规范胆黄连的炮制工艺具有一定的意义,为制备胆黄连标准饮片以进行下一步研究工作奠定了基础.
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胆黄连在实热证大鼠体内的整合药代动力学与药效学的相关性
目的:探讨胆黄连在实热证大鼠体内的整合药代动力学与药效学相关性.方法:在2015年5月～2016年5月,将大鼠分成正常组、模型组以及给药组.模型组采用实热证模型,在给予三组大鼠0、3、6、9h以后,对大鼠体内的直肠体温进行测量,检测胆黄连灌胃给药之后不同时间段药根碱和巴马汀的血药浓度,将整合药代动力学相关残烛测量出来,同时结合药效体温数据结果,对两者之间的相关性进行分析.结果:与正常组大鼠比较,在3h以内,模型组大鼠的体温升高比较明显,而给药组没有明显的变化.在6h以内,模型组和给药组大鼠体温升高显著.在9h以内,模型组大鼠体温仍明显提升,给药组无明显差异.结论:胆黄连中的生物碱成分在大鼠体内的动态变化和解热药效存在良好的相关性.
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响应面法优化胆黄连的炮制工艺
目的:优选炒制胆黄连的炮制工艺参数.方法:以总生物碱、浸出物含量的归一值OD为因变量,运用Box-Behnken试验考察炒药温度、炒药时间、闷润时间对胆黄连炮制工艺的影响,运用Design Expert 8.0.6软件对试验数据进行分析,建立OD值与各自变量的多元二次回归方程的数学模型,通过响应面法确定工艺参数.采用紫外分光光度法测定总生物碱的含量.结果:胆黄连的佳炮制工艺是炒药温度为94℃,炒药时间为19min,闷润时间为1h.此模型下胆黄连中总生物碱含量为131.494 mg·g-1,浸出物含量为5.243％.回归模型的预测值与实测值的相对误差＜3％,该回归方程与实际情况拟合较好.结论:采用响应面法优化的胆黄连炮制工艺可用于胆黄连饮片制备.
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黄连胆汁炙前后对热证模型大鼠血清甲状腺激素水平和体温的影响
目的 观察黄连经猪胆汁炮制前后对热证模型大鼠血清中甲状腺激素水平及体温变化的影响.方法 采用口服附子、干姜、肉桂水煎液与皮下注射外源性致热因子(干酵母混悬液),复制热证模型大鼠.灌胃给予黄连、猪胆汁和胆黄连药液,测定大鼠血清中游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、血清游离甲状腺素(FT4)、逆-三碘甲腺原氨酸(rT3)及大鼠体温.结果 与空白对照组比较,模型组大鼠体温显著性增高(P＜0.001),血清FT3、FT4、rT3含量均显著性降低(P＜0.01);与模型组大鼠比较,3h的猪胆汁组和胆黄连组体温显著性降低(P＜0.01),黄连、胆黄连可显著升高FT3含量(P＜0.05),猪胆汁可显著性降低FT4含量(P＜0.05),rT3无显著性变化.结论 猪胆汁和胆黄连在3h内可拮抗大鼠体温的升高,黄连和胆黄连可拮抗热证大鼠血清中FT3含量的降低.
