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  • 新鲜羊膜移植治疗早期角膜碱烧伤的实验研究

    作者:丁琦;陈剑;徐锦堂;吴静;王彦平;赵松滨

    本实验建立兔早期碱烧伤模型,探讨新鲜羊膜移植手术治疗早期角膜碱烧伤的效果.1 材料与方法1.1烧伤模型与手术实验中所用的羊膜取自无传染性疾病剖宫产妇的胎盘,新鲜羊膜在4℃保存6h内使用;保存羊膜置于含DMEM与甘油的保存液无菌瓶内于-80℃冻存.

  • 吡格列酮对大鼠碱烧伤角膜IL-1α、IL-6表达的影响

    作者:魏海霞;鲁建华;张文芳

    研究表明眼碱烧伤后IL-1α、IL-6的表达水平和炎症反应程度呈正相关[1-2],吡格列酮可以抑制角膜碱烧伤新生血管的生成[3].本课题探讨吡格列酮对大鼠碱烧伤角膜中IL-1α和IL-6表达的影响.

  • 几丁糖促进兔角膜碱烧伤愈合的作用

    作者:杨红;向艳;顾其胜;王蓉;张晓农

    目的观察2%医用几丁糖在兔角膜碱烧伤早期对角膜上皮愈合,抗过氧化损伤和炎症反应的影响.方法用15只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型,设立几丁糖组(右眼)和磷酸盐缓冲液对照组(左眼).裂隙灯观察角膜烧伤后角膜炎症反应及上皮修复过程.于烧伤后第7,14,28天各随机处死5只兔,取角膜和房水检测超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并观察角膜组织病理学变化.结果医用几丁糖组较对照组同期角膜上皮修复快,SOD活性高,MDA生成量少,角膜炎症反应轻.结论几丁糖在角膜碱烧伤急性期治疗中具有较强的促进上皮修复,抗过氧化损伤及抑制炎症的作用.

  • 单态氧猝灭剂叠氮钠治疗角膜碱烧伤实验研究

    作者:邱良秀;张泺;沈远平

    为研究叠氮钠对角膜碱烧伤的治疗作用,在家兔的角膜碱烧伤模型中,用1 g/L NaN3及10 g/L NaN3+100g/L枸橼酸钠滴眼剂治疗.同时用硫代巴比妥酸(TBA)反应法检测过氧化脂质(LPO),用组织培养人角膜上皮细胞检测NaN3毒性,发现角膜烧伤后LPO逐渐减少.治疗组病情较轻,且NaN3毒性低,认为角膜碱烧伤后,用NaN3治疗有一定效果.

  • 地塞米松对家兔角膜碱烧伤的保护作用

    作者:谢德雍;罗德生;郑红花;苏建中;李映红;王汉洲;王梅娟

    目的:探讨地塞米松对家兔角膜碱烧伤的保护作用.方法:复制兔右眼角膜碱烧伤模型,实验组于烧伤后每日以地塞米松球结膜下注射,对照组于烧伤后每日以等剂量生理盐水球结膜下注射,各组左眼为正常对照组.分别于第1、4、8、16、32及64天测量各组丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果:烧伤后的第1、4、8、16、32天,实验组MDA含量显著低于对照组;其SOD活性则明显高于对照组,结果有显著性差异.结论:地塞米松有明显的抗脂质过氧化损伤的作用,能促进碱烧伤后角膜组织的恢复.

  • 维生素B2局部用药治疗兔角膜碱烧伤

    作者:谢德雍;罗德生;郑红花;苏建中;王梅娟;王汉洲

    目的探讨VitB2在兔角膜碱烧伤中的保护作用及其机制.方法复制兔右眼角膜碱烧伤模型,设实验组和烧伤组.实验组于烧伤后每日以VitB20.2ml/kg球结膜下注射.烧伤组每日以等量生理盐水注射.分别于第1,4,8,16,32及64天测量各组角膜组织中丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果:烧伤后的第1,4,8,16,32天实验组MDA含量显著低于烧伤组,而SOD活性1-64天明显高于烧伤组,尤其是第4天至第16天的差异具有统计学意义.结论:VitB2对角膜碱烧伤后角膜组织的恢复有明显的促进作用,其机理之一可能与其抗脂质过氧化损伤有关.

  • 兔角膜碱烧伤后角膜组织中NO、MDA含量及SOD活性的变化

    作者:谢德雍;苏建中;罗德生;郑红花;李映红;王汉洲;王梅娟;董加喜

    目的:探讨一氧化氮与脂质过氧化反应在角膜碱烧伤中的作用.方法:在兔右眼角膜用2mol/L NaOH溶液烧伤60秒钟后,分别于第1、4、8、16、32及64天测量其NO和丙二醛(MDA)的含量及SOD活性,左眼为正常对照.结果:烧伤后的第1、4、8、16及32天,其NO和MDA含量显著高于对照组,至第64天接近对照组水平.烧伤后第1~16天,SOD活性较对照组显著降低,第32天已基本恢复至对照组水平.结论:角膜碱烧伤后角膜组织中NO水平升高和脂质过氧化反应增强可能是其损伤机制之一.

  • 新鲜羊膜移植治疗眼部碱烧伤的临床观察

    作者:徐涛;贺秀英;桓莹

    眼部化学性烧伤是严重的眼科致盲疾病之一.碱烧伤尤为严重,常引起睑球粘连、眼球穿孔、眼球萎缩、结膜囊狭窄等并发症.新鲜羊膜移植可以有效地治疗和预防以上并发症的发生.我院共收治角膜碱烧伤病人15例(15眼),均采用新鲜羊膜移植治疗,现将结果报告如下:

  • 姜黄素治疗大鼠角膜碱烧伤的实验研究

    作者:李妍;秦莉;李晶明

    目的 观察姜黄素对大鼠角膜碱烧伤新生血管(CNV)的抑制作用和对CD11b及角膜上皮凋亡细胞表达的影响,初步探讨其治疗角膜碱烧伤的作用机制.方法 选用雄性SD大鼠24只,随机分为4组(每组6只):A组为空白组,B组为模型组,C组为姜黄素组,D组为二甲基亚砜(DMSO)组.除空白组外,采用氢氧化钠眼内烧伤造模,并予相应干预,第3、7、10、14天裂隙灯下观察角膜CNV形态并眼前节照相记录CNV长度,计算CNV面积,进行统计学分析;通过H-E染色法观察角膜病理形态学变化;免疫组化法观察CD11b表达;TUNEL染色法检测角膜上皮细胞凋亡表达.结果 裂隙灯下观察B组和D组CNV生长旺盛,管腔粗大,C组CNV稀疏管腔细小;3 d时三组CNV面积分析差异无统计学意义(P>0.05),7、10、14 d时CNV面积比较C组CNV面积显著降低(P<0.05);H-E染色B组和D组角膜基质层内大量的CNV管腔和血细胞,C组基质层偶见CNV,管腔细小;A组CD11b、角膜上皮凋亡细胞在角膜仅少量表达,B组和D组CD11b在基质层新生血管内壁上高表达,角膜上皮层凋亡细胞高表达,C组CD11b低表达,角膜上皮层凋亡细胞低表达.结论 姜黄素能有效的抑制大鼠角膜碱烧伤CNV治疗角膜碱烧伤,通过下调CD11b抗炎和下调角膜上皮凋亡细胞抗凋亡发挥作用.

  • 角膜缘干细胞移植治疗兔眼表碱烧伤的实验研究

    作者:刘海俊;钟世镇;余磊;熊绍虎;龚向明;葛坚

    目的: 探讨眼表碱烧伤后行角膜缘干细胞移植术的疗效,并与单纯行角膜移植术组作比较.方法: 在16只兔双眼上制作碱烧伤模型,1 d后,右眼行异体板层角膜缘干细胞移植术,左眼行异体板层角膜移植术,术后观察6 月,根据术眼的角膜新生血管分级、植片的混浊度、水肿度来计算移植排斥反应指数(RI),以RI值判断植片的存活情况.结果:行异体板层角膜缘干细胞移植术的16眼中有14眼RI<9,治愈率达87.5%;行单纯异体板层角膜移植的16眼中6眼RI值<9,有效率37.5%;两者相比有显著性差异(P<0.001).两组的新生血管数、植片的混浊度、水肿度及RI值均有显著性差异.结论:含干细胞的异体角膜缘移植治疗眼表碱烧伤的疗效明显优于单纯异体角膜移植,是一种较有效的方法.

  • 自体角膜缘移植治疗兔单眼碱烧伤的实验研究

    作者:刘海俊;钟世镇;曾静;龚向明;葛坚

    目的探讨角膜碱烧伤后行自体角膜缘移植术的疗效,并评估其对健康眼的影响.方法在32只兔右眼上制作碱烧伤模型,烧伤1周后行自体角膜缘移植,作1/4、1/2、3/4周和全周范围移植者各8只,术后4周观察疗效.结果作全周自体角膜缘移植的8只兔患眼全部恢复正常眼表,作3/4、1/2、1/4周移植的患眼分别有87.5%(7/8)、37.5%(3/8)和0.00%恢复正常眼表;而作全周切取角膜缘的8只供眼均未恢复正常眼表(100%),角膜糜烂,有新生血管和假性胬肉长入,而切取3/4、1/2周角膜缘的供眼分别有75%(6/8)和12.5%(1/8)未恢复正常,切取1/4周角膜缘的供眼均恢复正常.结论行自体角膜缘移植可有效地治疗眼碱性烧伤,可作临床推广,但要注意供体眼取材范围不宜超过1/2范围,以免损伤健康眼.

  • 新鲜羊膜移植对碱烧伤早期角膜及房水中超氧化物歧化酶活力、丙二醛含量的影响

    作者:陈剑;丁琦;吴静;王彦平

    目的:探讨新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中与自由基反应的关系。方法:以48只新西兰大白兔制作角膜碱烧伤模型,烧伤兔被分为新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组及对照组,烧伤后24h分别实施手术。分别于术后14、30d处死实验兔取材房水及角膜组织,检测其超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量。结果:新鲜羊膜移植组、保存羊膜移植组丙二醛含量均低于对照组(P<0.01),超氧化物歧化酶活力均高于对照组(P<0.01)。术后14 d新鲜羊膜移植组角膜超氧化物歧化酶活力高于保存羊膜组(P<0.05);术后30 d新鲜羊膜组角膜及房水丙二醛含量均低于保存羊膜组(P<0.05)。结论:新鲜羊膜移植在早期角膜碱烧伤治疗中能减轻自由基反应对眼组织的损伤,其效果优于保存羊膜移植。

  • 角膜碱烧伤大鼠接受多西环素干预后的细胞凋亡情况及角膜和房水中IL-1、TNF-α、HIF-1α的表达

    作者:徐小芹

    目的:研究多西环素干预对角膜碱烧伤大鼠细胞凋亡情况及角膜和房水中IL-1、TNF-α、HIF-1α表达量的影响.方法:选择雄性SD大鼠作为实验动物,随机分为对照组、碱烧伤组、多西环素组,氢氧化钠滴眼建立角膜碱烧伤模型后给予多西环素滴眼液滴眼干预.造模后14天和28天时,检测角膜中细胞凋亡分子、炎症反应细胞因子、血管新生分子的表达量以及房水中炎症反应细胞因子、血管新生分子的表达量.结果:造模后14天和28天时,碱烧伤组大鼠角膜组织中Bcl-2、PEDF的蛋白表达量显著低于对照组,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、IL-1、TNF-α、HIF-1α、VEGF的蛋白表达量均显著高于对照组;多西环素大鼠角膜组织中Bcl-2、PEDF的蛋白表达量显著高于碱烧伤组,Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、IL-1、TNF-α、HIF-1α、VEGF的蛋白表达量均显著低于碱烧伤组.结论:多西环素用于角膜碱烧伤干预能够抑制细胞凋亡、炎症反应及血管新生.

  • 重组人色素上皮衍生因子/壳聚糖纳米粒的制备及其对兔角膜新生血管的影响

    作者:贾立;计岩

    目的:应用离子交联法制备色素上皮衍生因子壳聚糖(PEDF/CS)纳米粒,考察其体外性质及其在兔角膜碱烧伤中对角膜新生血管的影响,探讨其作用机制。方法通过离子交联法制备PEDF/CS纳米粒,考察纳米粒粒径、包封率、zeta电位及体外释放量,建立兔角膜碱烧伤模型,右眼作为实验眼。单纯随机抽样法,分为生理盐水对照组(A组)、PEDF滴眼液组(B组)、PEDF/CS纳米粒组(C组),每组20只。用药后7、14、21、28d大体观察及HE染色角膜新生血管情况,并使用RT-PCR方法检测各组角膜组织中VEGF的表达。结果 PEDF/CS纳米粒大部分呈规则的球型,粒径为(354±1.6)nm,zeta电位为(22.5±0.7)mV,包封率为(76.15±2.80)%,体系较为稳定,具有缓释功能。明显下调兔创伤角膜中的VEGF的表达促进角膜修复,各时间点各组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论色素上皮衍生因子壳聚糖纳米粒滴眼液通过下调兔创伤角膜中的VEGF的表达,可以减少角膜新生血管的生成。

  • 人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管PEDF和VEGF表达及角膜新生血管的影响

    作者:赵抒羽;郭小南;何锦贤

    目的:探讨人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管形成过程中色素上皮衍生因子(PEDF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达及角膜新生血管的影响.方法:选取2015-06/2016-06在佛山爱尔眼科医院治疗的角膜碱烧伤患者32例37眼,随机分为A、B两组.其中A组17例19眼,采用40mg/L人羊膜匀浆提取液治疗,B组15例18眼,采用3g/L泼尼松龙滴眼液治疗.在治疗不同的时间点(1、4、7、14、21、28d)观察角膜新生血管的生长,同时检测新生血管形成过程中PEDF及VEGF的表达水平.结果:A组患者在使用人羊膜匀浆提取液治疗后,PEDF表达水平显著高于B组,差异有统计学意义(P=0.001),在治疗28d后,PEDF表达水平达到了0.721依0.314,而B组患者PEDF表达水平仅有0.538依0.253,两组患者PEDF表达水平间的差异具有统计学意义( P<0.05 );A组VEGF表达水平在不同的时间点检测时均低于B组,在治疗28 d后,A组患者VEGF 表达水平为0.152依0.020,B 组患者VEGF表达水平为0.302依0.031,两组患者VEGF表达水平间的差异具有统计学意义(P<0.05);A组患者角膜新生血管数量显著低于B组患者,差异有统计学意义( P<0郾05 ).结论:人羊膜匀浆提取液可以促进患者角膜碱烧伤后新生血管形成过程中PEDF表达,抑制VEGF的表达和角膜新生血管的增殖.

  • PEDF和Avastin对大鼠角膜碱烧伤新生血管作用的比较

    作者:朱丹;陆晓和;付月;吴伟;陈晓红

    目的:比较局部应用PEDF与Avastin对大鼠碱烧伤角膜新生血管(CNV)的作用.方法:建立碱烧伤诱导大鼠CNV模型,将30只SD大鼠随机分为5组:A组于烧伤当日开始给予10μg/mL PEDF点眼;B组于烧伤后第3d开始给予10μg/mL PEDF点眼;C组于烧伤当日开始给予5mg/mL Avastin点眼;D组于烧伤后第3d开始给予5mg/mL Avastin点眼;E组于烧伤当日开始使用生理盐水点眼,均每日4次,每次10μL.裂隙灯显微镜观察CNV情况并计算各组CNV的面积,采用免疫组织化学染色观察VEGF和CD31的表达.结果:第12d时,A组CNV面积小于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.01);B,C组与D组相比,差异无统计学意义(P=0.215,0.058).免疫组织化学检测VEGF及CD31示A组VEGF及CD31表达较弱,B,C,D组表达增多,E组表达显著增强.结论:局部应用Avastin及PEDF均能抑制大鼠角膜化学伤后的CNV.烧伤后早期使用PEDF效果优于Avastin.

  • 结膜瓣覆盖治疗角膜碱烧伤中MMP-9和TIMP-1的表达

    作者:宋东宇;高明宏;徐旭;于静;禹海;陈颖新;张晓光

    目的:研究结膜瓣覆盖术治疗兔角膜碱烧伤中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达机制.方法:将50只兔随机分成实验组及对照组,每组分别25只,建立兔角膜烧伤模型.实验组在角膜烧伤后当天行结膜瓣覆盖术.采用免疫组化法测定两组角膜碱烧伤后不同时间点MMP-9和TIMP-1的表达.结果:MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高,14d达到高,之后逐渐下降;而TIMP-1在伤后即有表达,7d有所下降,于14d达到低,21d达到峰值.实验组MMP-9的表达均明显低于对照组,且角膜碱烧伤后的3,14,21d和28d差异有统计学意义(P<0.05);而TIMP-1则明显高于对照组,且角膜碱烧伤后3,14d和21d差异有统计学意义(P<0.05).结论:角膜碱烧伤的病理损伤及修复过程中,MMP-9及TIMP-1的表达密切相关.结膜瓣覆盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切.

  • 大鼠角膜碱烧伤新生血管形成中β-catenin的表达

    作者:张莹;张明昌;何志

    目的:探讨检测大鼠角膜碱烧伤后新生血管形成过程中β-连环蛋白(β-catenin)的表达变化. 方法:使用碱烧伤诱导左眼角膜新生血管模型,SD大鼠25只随机分成5组,使用碱烧伤诱导左眼角膜新生血管模型,将右眼作为对照组,每日裂隙灯下观察角膜新生血管的发展,并采用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,分别检测碱烧伤1,4,7,14,21d组以及正常对照组β-catenin和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达. 结果:在正常大鼠角膜组织中,β-catenin不表达或弱表达,碱烧伤后1d时,β-catenin免疫活性开始增强,4d时表达强,14d时下降,21d时仍有弱表达.RT-PCR显示碱烧伤后β-catenin表达增强,在伤后4d表达明显,21d后呈极弱表达.VEGF与β-catenin表达分布相似,强度较弱,二者之间呈正相关(r=0.855,P<0.05). 结论:角膜碱烧伤后,β-catenin表达水平与新生血管形成明显相关性.

  • 组织工程角膜上皮移植治疗兔角膜碱烧伤的形态学观察

    作者:皮裕琍;陆江阳;唐维强;董莹

    目的:探讨组织工程角膜上皮移植治疗角膜碱烧伤的疗效和时机.方法:1mol/L NaOH制作改良兔角膜碱烧伤模型21只42眼,分对照组和移植组,移植组分别在碱烧伤后1,3,6,9d(早)和14d(中)行自体或同种异体组织工程角膜上皮移植术,比较移植组及对照组烧伤后28d内眼表和组织病理学变化.结果:角膜碱烧伤后7d开始出现角膜上皮的大片脱落,14d角膜上皮大片脱落或溃疡发生率达72%,持续至28d,而移植组在28d时发生率仅为25%,大多获得完整的角膜上皮;烧伤后早期移植组角膜基质深层炎性细胞浸润和新生血管生长较对照组明显受到抑制,而中期移植组角膜基质层较对照组并无明显差异;28d内异体组织工程角膜上皮移植的免疫排斥反应并不大于自体移植.结论:自体或同种异体组织工程角膜上皮移植均可尽快恢复眼表完整性,且烧伤后早期移植效果明显优于中期移植.

  • 结膜瓣遮盖治疗角膜碱烧伤中PMNs浸润的变化

    作者:宋东宇;高明宏;崔珊珊

    目的:研究结膜瓣遮盖术治疗角膜碱烧伤的疗效及损伤修复中多形核中性白细胞( polymorphonuclear neutrophils, PMNs)的浸润情况。
      方法:选取50只兔,随机分为两组,每组25只,即实验组和对照组,并建立兔角膜碱烧伤模型。实验组在角膜碱烧伤后当天行结膜瓣遮盖术。裂隙灯下观察两组角膜病损恢复情况并照相。采用苏木素-伊红( HE)染色切片后测定两组角膜碱烧伤后不同时间点PMNs的浸润量值。
      结果:PMNs在角膜碱烧伤后的3 d开始升高,大量浸润角膜,7 d略有下降,14 d上升达到大峰值,之后逐渐降低,早期分布在烧伤部位角膜基质内,后期则与溃疡浸润面积相一致。实验组PMNs的计数均明显低于对照组,且角膜碱烧伤后的3、14和21 d的差异有统计学意义( P<0.05)。
      结论:结膜瓣遮盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切,角膜的病理损伤和修复与PMNs的浸润密切相关。

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