醋酸铅对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用

铅是普遍存在环境中的有毒重金属,随着现代工业的迅猛发展,铅污染问题日益严重.现认为铅对人体各系统有着广泛的毒性.铅可致染色体断裂、姐妹染色单体交换(SCE),DNA单链或双链断裂,DNA片段缺失等[1].

小鼠骨髓CD90+、CD34+、CD117+和Sca-1+细胞的肝干细胞潜能比较

目的 比较的小鼠CD90+Lin-、C34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能.方法 供体为纯系BALB/C雄性小鼠,应用免疫磁珠分选法获取CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-和Sca-1+Lin-骨髓细胞.受体为35Gy全肝照射处理后的同龄同系BALB/C雌性小鼠,A、B、C、D组小鼠分别接受CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞移植.移植后30天活杀小鼠,取肝进行Y染色体原位分子杂交与白蛋白免疫组织化学联合检测.结果 各组小鼠肝组织中都可以检测到Y染色体和白蛋白均呈阳性的双阳性细胞,C组的双阳性细胞数量显著多于其它各组.结论 CD90+Lin-、CD34+Lin-、CD117+Lin-、Sca-1+Lin-骨髓细胞都具有肝干细胞潜能,其中CD117+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能大、形成肝细胞的能力量强.

干细胞研究进展

早使用"干细胞"这个词是在1961年,当年加拿大放射学家Till和McCulloch建立了一种能鉴定小鼠多能干细胞的体外集落方法即脾集落形成单位(CFU-S).他们初研究的目的是为了建立一种放射保护测定方法.他们将正常小鼠骨髓细胞注射到受致死量照射的小鼠,14天以后,发现受体小鼠的脾脏形成许多结节.

人造板材释放的甲醛对小鼠骨髓细胞微核率影响

目的探讨不同浓度气态甲醛对暴露小鼠的骨髓嗜多染红细胞微核的诱发效应.方法用不同剂量气态甲醛对小鼠进行连续动态染毒处理72 h,取小鼠骨髓细胞制片,观察小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成率,从而判断气态甲醛对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的诱发效应.结果经甲醛染毒处理后,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率逐渐升高,与对照组相比有极显著性意义.结论甲醛可不同程度地影响小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核形成率,并呈良好的剂量-效应关系.

DiI荧光示踪剂在小鼠骨髓细胞肝内移植中的研究

螺旋藻片对小鼠骨髓细胞染色体致畸变实验

目的:观察螺旋藻片对小鼠骨髓细胞染色体是否有致畸变作用.方法:以4.0,2.0,1.0g·kg-1BW剂量的螺旋藻片连续给小鼠灌胃3d,取小鼠股骨骨髓,制备小鼠骨髓细胞染色体标本.结果:各剂量组小鼠骨髓细胞染色体畸变率与溶剂对照组比较无显著性差异(P>0.05),而阳性对照组与溶剂对照组比较有极显著性差异(P<0.01).结论:螺旋藻片各剂量组对小鼠骨髓细胞无染色体畸变作用.

咖啡因与酵母对小鼠骨髓细胞有丝分裂指数的影响

目的:找出能明显促进小鼠骨髓细胞有丝分裂的药物及剂量,探讨咖啡因和酵母对小鼠骨髓细胞有丝分裂指数的影响.方法:选择健康小鼠,分别经腹腔注射不同剂量的咖啡因或酵母液,24小时后颈椎脱臼处死,取股骨并制成骨髓细胞染色体标本,观察并计数小鼠骨髓细胞有丝分裂相的比例.结果:咖啡因的三个剂量组和酵母的低、中剂量组小鼠骨髓细胞中分裂数目均有明显增加,与对照组比较有显著性的差异(P＜0.05),其中咖啡因低剂量组和中剂量组的酵母效果为明显(P＜0.01).结论:咖啡因和一定剂量的酵母都能促进小鼠骨髓的细胞增殖,增加小鼠骨髓细胞的有丝分裂指数,但咖啡因的作用更显著.

小鼠c-Kit+lin-骨髓细胞移植生成肝细胞的实验研究

目的评价小鼠c-Kit+Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能,为骨髓源性肝干细胞的临床运用提供可行性实验依据.方法供体为纯系BALB/C雄性小鼠,c-Kit+Lin-骨髓细胞采用免疫磁珠分选法分离细胞.受体为行35 Gy全肝照射处理后的同龄同系BALB/C雌性小鼠,立即移植供体c-Kit+lin-骨髓细胞.接受c-Kit+lin-骨髓细胞移植1月后,活杀取肝做常规病理学检查、Y染色体的原位杂交检查、甲胎蛋白与白蛋白的免疫组化检测.结果移植1月后小鼠肝脏的组织结构已恢复正常,肝组织细胞中存在原位杂交和免疫组化均呈阳性反应的双阳性细胞.结论小鼠c-Kit+Lin-骨髓细胞具有肝干细胞潜能,移植后可以在肝内定居并分化形成肝细胞.可做为肝病细胞移植疗法的种子细胞.

内皮细胞对鼠骨髓造血细胞的增殖和分化作用

探索内皮细胞对小鼠骨髓造血细胞的刺激和诱导分化作用. 人脐静脉内皮细胞取自剖腹产后12hr以内的脐带.按Jaffe法进行培养,建立内皮细胞体外培养模型,收集原代培养的内皮细胞上清液(HECS).按本室常规方法制备骨髓有核细胞.在造血细胞半固体和液体培养体系中加入不同组合的重组造血因子,分为三组 :①粒系培养组加GM-CSF(德国BM公司),终浓度为20ng/ml.②红系培养组加入IL-3(美国SIGMA公司)与EPO(德国BM公司),终浓度分别为20ng/m l和2u/ml.③实验组加入内皮细胞培养上清液,以RPMI-1640为对照组.将上述体系接种于24孔板中,每孔1ml,培养7d,收集细胞,作细胞计数,台盼蓝拒染活力检测.细胞表面标记分析:选用抗红系或粒系的单克隆抗体CD71和CD13(美国 Coulter公司)作细胞表面标记检测.培养后细胞经PBS洗涤,取细胞悬液2～5 ×105细胞),加抗体1μl,4℃孵育30min,用PBS洗去没有标记上的抗体和FITC,重新悬浮细胞,用流式细胞仪(Coulter Elite Esp,美国Coulter公司)进行分析.用T检验分析实验数据以x±SD表示.结果:HECS对小鼠骨髓细胞形成各类造血祖细胞集落具有明显的刺激作用,能够提高BF U-E,CFU-E,CFU-GM集落产率,分别为43.04±5.80,148.7 5±32.20,104.67±9.92(P＜0.05);HECS诱导细胞7d后, 细胞表面表达CD13为93.75±5.38,CD71为59.95±7.10(P＜ 0.05).实验组与阳性对照组基本一致,阴性对照组无集落形成和抗体表达.内皮细胞不但能够促进造血干祖细胞的增殖并且能够诱导其定向分析.以往对骨髓细胞的体外培养均采用琼脂或甲基纤维素半固体培养的方法,在用流式细胞仪进行分析时,由于难以去除琼脂或甲基纤维素对实验的干扰,造成对细胞表面抗原标记的困难,影响了实验的准确性.本实验将小鼠骨髓细胞进行体外液体培养,同时加入不同组合的重组造血生长因子,诱导造血干祖细胞向红系和粒系分析,为流式细胞仪分析细胞特异性抗原的表达提供了新的途径.

运用单细胞凝胶电泳研究稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA的损伤

背景与目的:探讨稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA的损伤.材料与方法:给小鼠灌胃氧化钬的盐酸溶液,24h后取股骨骨髓细胞进行单细胞凝胶电泳,观察有无染色体损伤和DNA损伤.结果:试验表明在20～80 mg/kg剂量范围内,彗星细胞的尾长随剂量的增加而增长,而头长则随剂量的递增而缩短,并且在40～80 mg/kg剂量范围内与阴性组差异存在显著性;同时,拖尾率与DNA损伤率也随剂量的增加而升高.结论:稀土元素钬对小鼠骨髓细胞DNA具有一定的损伤作用.

FISH技术评价昆明山海棠在小鼠骨髓细胞中的非整倍体诱发效应

目的: 研究以荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术评价了中草药昆明山海棠根部水抽提物[Tripterygium hypoglaucum (Level) Hutch,THH]在小鼠骨髓细胞中的特异染色体不分离效应.方法:以受试物THH腹腔注射昆明种雄性小白鼠,24 h后取骨髓细胞常规制片,以bio-16-dUTP标记的8号染色体特异性着丝粒重复顺序探针进行FISH,并以streptavidine-Cy3与杂交信号结合.荧光显微镜下分析受试物处理动物后骨髓细胞8号染色体分离情况.结果:在3个受试剂量中,THH具有与阳性对照秋水仙素类似的作用趋势,其所诱发的8号染色体不分离频率均显著高于溶剂对照.结论:本研究证实了THH为小鼠骨髓细胞8号染色体异常分离的诱发因素.

四乙酸铅对小鼠骨髓细胞染色体的损伤作用

目的:为探讨四乙酸铅染毒对细胞内染色体的损伤作用.方法:本试验用四乙酸铅12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg对小鼠经腹腔注射进行染毒,用生理盐水作对照,每天1次,连续6天,第7天处死染毒小鼠.取小鼠骨髓细胞,时骨髓细胞DNA受损情况进行分析.结果显示,骨髓细胞DNA受损率随四乙酸铅浓度增高而升高,随着四乙酸铅浓度增高骨髓细胞DNA受损情况加重,该结果表明,四乙酸铅对小鼠的骨髓细胞有很强的遗传毒性.