首页 > 文献资料
-
铀矿尘致矽肺发病机制研究进展
本文综述了铀矿尘的细胞毒性，巨噬细胞致纤维化因子及其它细胞因子在致矽肺纤维化中的作用，以及粉尘对免疫系统的影响3方面的研究进展，初步探讨了铀矿工矽肺的发病机制。
-
铀矿尘对人正常支气管上皮细胞株细胞凋亡相关蛋白表达的影响
目的 探讨铀矿尘对人正常支气管上皮细胞株HBE细胞凋亡相关蛋白表达的影响及凋亡的可能机制.方法 体外培养HBE细胞,分为对照组、铀矿尘组(12.5、25、50、100、200 μg/ml).细胞染毒12h后,用MTT法检测HBE细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白、Bc1-2相关X蛋白(Bax)及细胞色素C(Cyt C)、半胱天冬酶-3(caspase-3)和半胱天冬酶-9(caspase-9)的蛋白表达.结果 当铀矿尘浓度为25～200 μg/ml时,HBE细胞存活率均低于对照组,细胞凋亡率和坏死率均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.01).随着铀矿尘浓度的升高,HBE细胞Bax、Bcl-2、Cyt C、caspase-3、caspase-9蛋白表达量逐渐增加,均高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 铀矿尘对HBE细胞的凋亡作用可能是通过线粒体途径实现的.
-
铀矿尘对RAW 264.7细胞的氧化损伤作用
目的 探讨铀矿尘作用于小鼠RAW 264.7细胞一定时间后羟自由基(·OH)、过氧化氢(H2O2)及丙二醛(MDA)含量的变化.方法 用120 μg/ml的铀矿尘混悬液作用于小鼠RAW264.7细胞,分别在作用2、4、8、16、24和32 h后,采用噻唑蓝比色法(MTT法)检测RAW264.7细胞存活率；HE染色镜下观察细胞形态学变化；比色法测定细胞上清液中·OH、H2O2及MDA含量的改变.结果 铀矿尘作用于RAW264.7细胞2、4、8、16、24、32 h后,可见铀矿尘对RAW264.7细胞的增殖有明显抑制作用,染尘32 h后细胞存活率仅有(28.37±3.3)％；铀矿尘在作用于RAW264.7细胞16、24、32 h后,镜下可见梭型或不规则型细胞、多核细胞明显增加,细胞胞质缺失,胞核外露和染色变浅,细胞数目明显减少；铀矿尘处理的细胞上清液中·OH、H2O2及MDA在染尘后24 h达到峰值,分别为(94.05±4.72) U/ml、(68.83±4.34) mmol/L、(5.67±0.29) nmol/ml,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 铀矿尘可明显抑制RAW264.7细胞的增殖作用,导致细胞死亡数量增多.可引起细胞上清液中·OH、H2O2及MDA含量增高,对RAW264.7细胞具有氧化损伤作用.
关键词： 铀矿尘 RAW264.7细胞 细胞毒性 氧化损伤 -
铀矿尘致肺纤维化对PⅢNP、LN和TGF-β1影响
目的 探讨铀矿尘致大鼠肺组织纤维化对血浆中Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)、层粘连蛋白(LN)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响.方法 60只大鼠随机分为铀矿尘组和对照组,铀矿尘组每只大鼠气管内一次性滴注20 mg/mL粉尘悬液1mL,对照组给予等量生理盐水,分别于处理后第7、14、21、30及60d采取肺组织及外周血,进行肺组织形态学观察及血浆中PⅢNP、LN和TGF-β1含量测定.结果 在染尘后第21、30、60d时,PⅢNP含量为(17.90±1.55)、(19.06±1.62)、(20.09±1.65) ng/mL,LN含量为(81.81±1.32)、(83.64±1.52)、(84.73±2.20)ng/ mL,TGF- β1含量为(34.03±3.21)、(46.65±3.09)、(40.95±3.18) pg/mL,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01),血浆中PⅢNP和LN含量增高与肺组织纤维化程度具有较好一致性.结论 铀矿尘诱导大鼠肺组织纤维化过程中可引起血浆中PⅢNP、LN和TGF-β1含量明显增高.
-
抗氧化剂对铀矿尘致巨噬细胞损伤保护作用
目的 探讨N-乙酰半胱胺酸(NAC)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘露醇4种抗氧化剂对铀矿尘致巨噬细胞损伤的保护作用.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、荧光显微镜及化学/荧光发光仪检测不同浓度铀矿尘处理巨噬细胞后细胞存活率、细胞内活性氧(ROS)以及还原型谷胱甘肽(GSH)水平变化;采用annexin V/PI双染法检测4种抗氧化剂对铀矿尘致巨噬细胞凋亡的保护作用.结果 与对照组比较,铀矿尘染毒组巨噬细胞存活率下降,胞内ROS含量上升,GSH水平下降,呈时间-剂量效应关系(P＜0.05);抗氧化剂NAC、CAT、SOD、甘露醇孵育后,与对照组比较,NAC和甘露醇组巨噬细胞存活率[分别为(89.00±0.95)％、(85.87 ±2.20)％]明显升高,ROS含量[分别为(3.87 ±0.41)、(6.47 ±0.99)]下降,GSH水平[分别为(22.81±2.90)、(21.20 ±2.85)]升高(P＜0.05).结论 NAC和甘露醇对铀矿尘致巨噬细胞损伤具有保护作用并明显优于CAT与SOD.
-
铀矿尘对肺成纤维细胞合成胶原蛋白影响研究
目的：观察铀矿尘对小鼠肺成纤维细胞合成胶原蛋白的影响并探讨其机制。方法①取小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞分为溶剂对照组和染尘组，分别以终浓度为0、120 mg／L的铀矿尘混悬液处理0、2、4、8、16、24和32 h后，收集细胞上清液，采用酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测转化生长因子-β1（TGF-β1）水平，选择佳染尘时间，分离制备该时间点的2组细胞上清液作为条件培养液（CM）进行后续实验。②取小鼠肺成纤维细胞L929细胞分为对照组和铀矿尘组，分别予溶剂对照组和染尘组的CM处理0、6、12、18、24、30、36 h后，采用免疫组化法检测细胞内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达，ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原蛋白（ COLⅠ）、III型胶原蛋白（ COLⅢ）和羟脯氨酸（ HYP）的水平。结果①染尘组RAW264.7细胞上清液中TGF-β1水平从染尘后4 h时间点起开始较溶剂对照组出现有统计学意义的升高（ P＜0.05）；在染尘后4～24 h呈随染尘时间的增加而升高的时间－效应关系（P＜0.05），至染尘后24 h达到峰值。取染尘后24 h时间点的2组细胞上清液作为CM进行后续实验。②相较同时间点对照组，铀矿尘组在经相应CM处理后18～36 h，L929细胞中α-SMA表达水平均上调（ P＜0.05），在CM处理后12～36 h，L929细胞上清液中COLⅠ、COLⅢ和HYP的水平均升高（P＜0.05），且α-SMA表达水平和COLⅢ、HYP的水平均不同程度地呈现随CM作用时间的增加而升高的时间－效应关系（ P＜0.05）。结论铀矿尘刺激巨噬细胞后可导致细胞分泌TGF-β1增加，继而作用于成纤维细胞，上调α-SMA 表达，增加COLⅠ、COLⅢ和HPY合成，可能是铀矿尘致肺纤维化的机制之一。
-
铀矿尘对大鼠肺组织及血浆中转化生长因子-β1和一氧化氮水平影响
目的 探讨铀矿尘致大鼠肺纤维化过程中,肺组织和血浆中转化生长因子-β1 (TGF-β1)、一氧化氮(NO)水平变化.方法 60只成年Wistar大鼠,随机分为铀矿尘组与对照组.采用一次性非暴露式气管灌注法,铀矿尘组一次性气管内灌注质量浓度为20 g/L铀矿粉尘悬液1 ml,对照组一次性气管内灌注生理氯化钠溶液1 ml.每组分别于染尘后第7、14、21、30及60天随机处死6只动物,取周围血及肺组织.肺组织形态学观察采用HE染色法;肺组织及血浆中TGF-β1水平的测定采用酶联免疫吸附法(ELISA法)；肺组织及血浆中NO水平的测定采用硝酸还原酶法.结果 实验观察期内铀矿尘致大鼠肺组织纤维增生病变；铀矿尘在致肺组织纤维化过程中,可引起肺组织及血浆中TGF-β1及NO水平增高,且在染尘后第30、60天时其肺组织和血浆中TGF-β1及NO水平与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；肺组织与血浆中TGF-31及NO水平变化存在直线正相关(rTGF=0.887,P＜0.05；rNO=0.958,P＜0.05).结论 在铀矿尘致大鼠肺纤维化过程中,其肺组织和血浆中TGF-β1和NO的水平可见明显增高,肺组织与血浆中TGF-β1及NO水平变化存在直线正相关.
