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对藻酸钠消毒方法的研究
经对4种消毒方法比较,对作为动物细胞微囊重要材料之一的藻酸钠以用流通蒸汽消毒效果好.该法作用30 min对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭率达100%,对藻酸钠粘度影响小,制成的微囊破损率为18.5%.
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口腔正畸科印模托盘清洗消毒的临床研究
多年来口腔印模托盘的清洗是一个老大难问题,一般平均一天一个护士要负责十几个大夫所采取的50-60付记存及工作模型,50-60付托盘都要清洁干净后再送去干燥或高压灭菌,然后才能再次使用.每一个托盘上都有100多个防止印模材脱落的小孔,这些小孔在取印模后粘附的印模材给护士刷洗托盘增添了许多麻烦和困难,每一个小孔中的藻酸钠都要用探针将其捅出,再用铜丝刷刷洗干净,这种工作非常烦琐和麻烦,已满足不了临床上的工作需要.本研究观察对比了2%万福金安消毒液、5%"84"消毒液、2%戊二醛消毒液三种对比效果,试找到一种有效的托盘消毒清洗剂以利于临床推广使用.
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可注射性材料藻酸钠体外培养幼猪关节软骨细胞及形成组织工程化软骨的能力
目的:观察以藻酸钠为载体体外培养幼猪关节软骨细胞的增殖及形成工程化软骨的能力;评价藻酸钠凝胶作为培养软骨细胞载体的可行性.方法:实验于2003-10/2004-03在中山大学附属第二医院实验中心完成.取3个月龄小型猪膝关节软骨,酶消化法得到高纯度软骨细胞,体外培养3代后与藻酸钠混合,调节软骨细胞密度为5×109 L-1,接种于96孔培养板中,每孔接种50μL,25 g/L氯化钙溶液凝胶化10 min后,DMEM培养基加体积分数为0.1的胎牛血清于96孔培养板中培养.4周后取材观察,行苏木精-伊红染色、Masson染色及免疫组织化学分析,观察软骨细胞形态,Ⅱ型胶原表达及成软骨能力.结果:①单层培养的软骨细胞呈多角形,细胞浆内表达Ⅱ型胶原;藻酸钠与软骨细胞复合后,藻酸钠凝胶材料与透明软骨细胞之间嵌合好.②苏木精-伊红染色见幼猪软骨细胞在海藻酸钠中增殖成株状或岛状;Masson染色见类似软骨陷窝之间胶原被染成绿色,可见细胞周围胶原分泌;免疫组织化学染色见细胞岛及其周围基质呈橘红色,细胞分泌Ⅱ型胶原较多.结论:幼猪软骨细胞在藻酸钠中可良好生长增殖,幼猪软骨细胞和藻酸钠复合可在体外成功构建组织工程化软骨.
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Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶作为可注射性支架构建组织工程软骨的可行性
背景：藻酸钠水凝胶和微载体均可作为注射性支架材料，但存在力学性能差和可塑性差等缺点。
目的：探索Cytodext-3微载体与藻酸钠水凝胶复合体作为可注射性组织工程软骨支架的可行性。
方法：制备可注射性Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶复合支架、可注射藻酸钠水凝胶支架，检测两组支架的力学性能。将软骨细胞与Cytodext-3微载体置于生物反应中培养，获得负载软骨细胞的微载体，再与藻酸钠水凝胶复合，作为实验组；将软骨细胞与可注射藻酸钠水凝胶支架共培养，作为对照组，检测两组支架内的细胞活性、细胞合成DNA与糖胺聚糖的能力。
结果与结论：①可注射性Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶复合支架杨氏弹性模量高于可注射藻酸钠水凝胶支架(P<0.05)；②对照组内软骨细胞呈圆形形状，均匀分布于藻酸钠凝胶中；实验组软骨细胞帖附于微载体表面，均匀分布于支架中；培养1 d后，两组支架内部可见，亦可见大量死亡的软骨细胞；14 d后，两组支架内均未发现死亡细胞，大量增殖软骨细胞保持较高的细胞活性，实验组细胞数量明显多于对照组；③随着时间的延长，两组细胞合成DNA与糖胺聚糖的含量逐渐增多，实验组DNA与糖胺聚糖含量高于对照组(P<0.05)；④结果表明：Cytodext-3微载体/藻酸钠水凝胶复合体有望作为一种良好的具有可注射性的组织工程软骨支架。 -
藻酸钠预防术后粘连性肠梗阻的临床观察
我们自1993～1996年以藻酸钠为主要成分,加入UW脏器保护液中,配成防粘连液,对胃大部切除术患者作关腹前腹腔冲洗,同时设立对照组进行统计学比较分析,证明了藻酸钠的防粘连作用,现报告如下.
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骨形态发生蛋白－2缓释复合物的制备及其性能的研究
目的：研究 BMP-2缓释复合物的成骨性能，并对比其与单纯 BMP-2间成骨差异。方法：该实验采用藻酸钠、BMP-2和氯化钙混合制备藻酸钙-BMP 复合材料，进行体外观察和兔动物试验，通过用 X 线、组织学、骨密度等方法，研究其诱导成骨活性。结果：缓释组和 BMP-2组均在4~12周形成新生骨组织，两组标本均为编织骨形态， X 线、组织学、骨密度等方法，均提示两组在骨新骨形成量上存在显著差异，缓释组新骨形成量大于单纯 BMP-2组。结论：BMP-2缓释载体复合物刺激成骨与直接应用 BMP-2刺激成骨对新骨形成量存在显著差异，缓释复合物可以持续稳定促进新骨形成，达到缩短骨愈合的目的。
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藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化软骨细胞表型的实验研究
[目的] 研究在连续体外单层培养条件下不同接种密度对大鼠关节软骨细胞分化状态的影响,并探讨藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化关节软骨细胞表型的调节机制.[方法]以正常密度(3×10<,4>/cm<'2>)或低密度(3×10<'2>/cm<'2>)分别连续体外单层传代培养大鼠膝关节软骨细胞使其去分化,RT-PCR检测Ⅰ、Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖mRNA的表达以确定其分化状态.取正常密度培养时的去分化软骨细胞,藻酸钠微球包被4周以恢复其表型,在该立体培养过程中将特异的SIRT1抑制剂-EX-527加入到培养基中抑制其表达,甲苯胺兰染色微球中软骨细胞分泌的细胞外基质,Western blot检测各种条件下SIRT1和Sox-9的表达.[结果] 当以正常密度连续体外单层培养时,软骨细胞在第4代发生去分化,低密度时于第1代即明显去分化,此时SIRT1和Sox9表达明显降低.藻酸钠微球三维立体培养能显著地增强去分化软骨细胞中Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚镛mRNA以及SIRT1、Sox9蛋白的表达,同时降低Ⅰ型胶原mRNA的表达.EX-527不仅限制藻酸钠微球中的软骨细胞周围细胞外基质的大量生成而且还抑制了SIRT1和Sox9的表达.[结论]关节软骨细胞连续体外单层培养的去分化与细胞接种密度有关,低密度培养加速去分化过程.藻酸钠微球三维立体培养恢复去分化关节软骨细胞表型的作用可能是通过细胞-细胞、细胞-细胞外基质间的相互作用,从而激活SIRT1的表达,继而增强Sox9的转录活性来实现.
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组织工程化口腔粘膜的构建技术初步研究
目的探索组织工程化口腔粘膜的构建方法.方法用Dispase中性蛋白酶分离提取未长毛的SD乳鼠硬腭口腔粘膜细胞,用角化细胞培养液对口腔粘膜细胞进行培养,以自制藻酸钠薄膜作为支架材料构建组织工程化的口腔粘膜.结果 Dispase中性蛋白酶可较好地分离提纯口腔粘膜细胞,用Dispase消化酶分离获取上皮后,再用胰蛋白酶消化上皮为单细胞的佳时间为10 min,过低的细胞密度不易形成克隆,鼠口腔粘膜细胞培养的适密度为1.5×105/cm2.角化细胞培养液能对鼠口腔粘膜细胞进行培养,且没有成纤维细胞污染;口腔粘膜细胞在藻酸钠薄膜上生长良好.结论利用角化细胞培养液作为培养基,藻酸钠薄膜作为支架材料可成功构建组织工程化口腔粘膜.
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玻璃瓷贴面的临床应用
玻璃瓷牙修复材料结合了烤瓷的美观及强度和复合树脂操作简单的优点,临床可应用于前牙贴面,磨除牙体组织少,有利于牙体组织健康,其强度、硬度接近牙釉质,耐磨性好,色泽稳定逼真,操作简单快速,对龈组织无刺激.笔者采用德国古莎公司生产的Artglass制作前牙玻璃瓷贴面23例、25个,均取得满意效果,现将该制作方法介绍如下:1 材料与方法1.1 材料德国古莎Artglass玻璃瓷牙套装、UniXs强力光聚合机、藻酸钠弹性印模材料、超硬石膏.
