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桂枝汤对高、低体温大鼠下丘脑组织转录因子CREB的影响
目的:探讨体温变化时下丘脑组织中磷酸化cAMP反应元件结合蛋白(pCREB)的活性及桂枝汤调节体温作用与此关系.方法:选用前列腺素受体3(EP3)发热大鼠模型及氨基比林低体温大鼠模型,采用比色法测定给予桂枝汤后大鼠下丘脑组织中pCREB活性.结果:两种模型下丘脑组织中pCREB活性均有升高倾向,以发热大鼠明显;给予桂枝汤可使发热大鼠的pCREB活性降低,而低体温大鼠的pCREB活性变化不明显.结论:pCREB参与了大鼠的体温变化过程;桂枝汤的解热作用可能与降低pCREB活性有关;pCREB基本上不参与低体温机制的调节或仅有较弱调节作用,桂枝汤的升温作用与其关系不明显.
关键词： 桂枝汤 大鼠 体温 下丘脑 cAMP反应元件结合蛋白 -
桂枝汤对低体温大鼠下丘脑组织蛋白激酶A和C活性的影响
目的:研究低体温大鼠下丘脑蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)活性的变化及桂枝汤的升温作用机理.方法:选用腹腔注射氨基比林低体温大鼠模型,先观测桂枝汤(p.o.)对模型大鼠体温的影响,继而采用放射性同位素法,测定给予桂枝汤后低体温大鼠下丘脑组织中PKA、PKC的活性.结果:桂枝汤可使低体温模型大鼠下丘脑组织中受抑的PKA、PKC活性显著增强,促进体温恢复.结论:PKA、PKC参与了大鼠的低体温过程,桂枝汤的升高体温的作用可能与提高下丘脑组织中PKA、PKC活性有关.
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桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑15-羟基前列腺素脱氢酶活性的影响
目的:研究桂枝汤对发热和低体温大鼠下丘脑组织内15-PGDH活性的影响,进一步阐明桂枝汤体温双向调节作用机制.方法:采用核素示踪技术测定酵母性发热和安痛定性低体温大鼠及桂枝汤处理组下丘脑组织内15-PGDH活性,并观察其与体温变化的关系.结果:皮下注射酵母可降低下丘脑15-PGDH活性,桂枝汤灌胃可剂量依赖性地抑制该变化并促进发热大鼠体温的恢复,两者呈正相关;而腹腔注射安痛定后,随着体温下降,15-PGDH活性有升高倾向,桂枝汤可抑制该酶活性并加速体温恢复正常,但两者呈弱相关.结论:大鼠下丘脑内15-PGDH可能参与机体体温调节并可能是桂枝汤解热作用靶点之一,但与其抗低体温作用关联不大.
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桂枝汤对发热大鼠下丘脑蛋白质组影响初探
目的:初步观察桂枝汤对发热大鼠下丘脑组织中蛋白质的差异表达,为进一步探讨桂枝汤的解热分子机制奠定基础.方法:应用蛋白质组技术,对酵母发热大鼠模型和桂枝汤治疗组下丘脑组织中蛋白质表达进行比较,观察其差异点.结果:发现模型和治疗大鼠下丘脑蛋白表达有明显差异,主要是蛋白表达量的增加和减少以及个别蛋白等电点的改变,其中在给予桂枝汤后有8种蛋白(Mr/pI:28.9 kD/4.47,24.4 kD/6.28,25.4 kD/6.39,25.9 kD/6.39,17.6 kD/7.38,17.2 kD/7.43,24.9 kD/7.39,26.9 kD/7.59)表达增强,6种蛋白(Mr/pI:14.3kD/4.83,28.5 kD/4.39,16.2kD/4.11,15.3 kD/6.7,30.5 kD/7.09,30.5 kD/7.13)表达降低,1种蛋白(Mr/pI:14.8 kD/5.4)等电点发生了改变,差异蛋白数量约占可分辨蛋白点的2.3%,本次实验未发现新的差异蛋白点.结论:桂枝汤的解热作用可能与改变下丘脑组织中某些蛋白质的表达及修饰有关.
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舒郁胶囊对PMS肝气郁证模型大鼠下丘脑μ-阿片受体的影响
目的:通过观察经前期综合征(PMS)肝气郁证模型大鼠下丘脑中μ-阿片受体(MOR)的蛋白表达,探讨舒郁胶囊治疗PMS肝气郁证的机制.方法:Wista.大鼠56只,随机分为正常组、模型组、舒郁胶囊组(0.408 g·kg-1)和纳洛酮组(0 4mg·kg-1),每组14只,旷场实验和阴道涂片筛选动情周期规律非接受期大鼠进入实验,除正常组,其余各组采用慢性束缚应激法复制PMS肝气郁证模型,旷场实验对模型进行行为学评价,各组大鼠下丘脑采用免疫荧光化学技术(IF)和Western blot分别观察MOR分布及蛋白表达变化.结果:宏观行为学表明,与正常组比较,模型组大鼠旷场总分显著降低(P＜0.01);免疫荧光结果显示,与正常组比较,模型组大鼠下丘脑细胞分布排列杂乱且增多,与模型组比较,舒郁胶囊、纳洛酮给药组均得到显著改善;蛋白免疫印迹结果显示,与正常组比较,模型组下丘脑中MOR表达水平显著升高(P＜0.01),与模型组比较,舒郁胶囊、纳洛酮给药组MOR表达水平均显著下降(P＜0.01).结论:舒郁胶囊可通过对下丘脑中MOR的拮抗作用而改善PMS肝气郁证的症状,另外,下丘脑中MOR上调可能是PMS肝气郁证的发病机制之一.
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桂皮醛解热作用及机制的实验研究
目的:探讨桂皮醛解热作用及其作用机制.方法:采用酵母诱致大鼠发热模型和白细胞介素-1β(IL-1β)刺激小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd.3)作为实验体系,采用酶联免疫法(ELISA)测定致热大鼠下丘脑组织及bEnd.3细胞上清液中前列腺素E2(PGE2)含量.结果:桂皮醛能有效抑制酵母所致大鼠发热反应,显著降低发热大鼠下丘脑PGE2含量,亦能明显抑制IL-1β刺激bEnd.3细胞PGE2的释放.结论:桂皮醛具有明显的解热作用,其解热机制可能与影响PGE2含量有关.
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桂枝汤对发热及低体温大鼠下丘脑可溶性一氧化氮合酶的影响
目的:研究发热和低体温大鼠下丘脑可溶性N0S活性的变化及桂枝汤对之的影响.方法:利用分光光度法测定酵母性发热大鼠、安痛定性低体温大鼠及桂枝汤治疗组下丘脑部位N0S活性.结果:皮下注射酵母5 5h后大鼠下丘脑组织内N0S活性显著升高,而腹腔注射安痛定可使该部位N0S活性明显降低,与体温变化呈正相关;桂枝汤(p.o.)可剂量依赖性地对抗酵母诱导的大鼠下丘脑N0S活性升高,与其解热作用平行;但在低体温模型上可进一步降低该区N0S活性,该作用与抗低体温作用呈负相关.结论:下丘脑可溶性N0S可能参与了大鼠体温调节;桂枝汤抑制酵母诱导的下丘脑N0S活性升高可能是其解热作用机制之一,但其抗低体温作用可能与该区N0S变化无关.
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发热大鼠脑组织15-羟基前列腺素脱氢酶活性的时相变化及桂枝汤的影响
目的:研究发热大鼠下丘脑和其他脑组织15-PGDH活性的时相变化及桂枝汤的影响.方法:利用Radio-TLC法测定发热大鼠及桂枝汤治疗组脑组织不同时间的15-PGDH活性.结果:皮下注射酵母后,伴随体温的升高,大鼠下丘脑PGDH活性先降低后逐渐恢复,桂枝汤可阻止该酶早期的活性降低并升高至正常值以上;其他脑组织PGDH活性也有类似变化,但桂枝汤可抑制后期的PGDH活性向正常恢复.结论:下丘脑PGDH活性降低,参与了酵母性发热的早期机制,升高该部位PGDH活性可能是桂枝汤解热机理之一.
关键词： 桂枝汤 体温调节 15-羟基前列腺素脱氢酶 下丘脑 大鼠 -
柴荆注射液的解热作用机理研究——对下丘脑中精氨酸加压素及前列腺素E2含量的影响
目的:研究柴荆注射液对酵母致热大鼠体温的影响及对下丘脑中精氨酸加压素(AVP)及前列腺素E2(PGE2)含量的影响,为其解热作用机理提供依据.方法:应用20%高活性酵母诱致大鼠发热,观察柴荆注射液的解热作用并用放射免疫检测法分析柴荆注射液对下丘脑AVP及PGE2含量的影响.结果:①皮下注射20%酵母可致大鼠发热,柴荆注射液具有明显的退热作用,退热效果高剂量组优于低剂量组;②能明显降低致热大鼠下丘脑中PGE,及AVP的含量,与对照组比较具有明显差异.结论:柴荆注射液能降低致热大鼠下丘脑中PGE2及AVP的含量,通过对下丘脑中分泌的这两个重要的内源性介质的抑制和释放利用,起到良好的退热作用.
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大黄总蒽醌对雌性大鼠下丘脑、垂体功能和结构的影响及可逆性
目的:观察大黄总蒽醌对雌性大鼠下丘脑和垂体功能及结构的影响及其可逆性.方法:SD雌性大鼠40只,随机取10只作为正常组,其余30只灌胃大黄总蒽醌73 mg· kg-1,连续60 d.于末次给药后24 h,停药30,60 d分别处死1/3动物.酶联免疫(ELISA)法检测大鼠血清促性腺激素释放激素(GnRH),黄体生成素(LH),卵泡刺激素(FSH)水平;记录性周期;取垂体称重,计算脏器指数;HE染色观察下丘脑、垂体形态学变化.结果:给药60 d和停药30 d LH,FSH水平高于正常组,GnRH水平低于正常组(P＜0.05).停药60 d LH,FSH水平低于给药60 d,GnRH水平高于给药60 d(P ＜0.05).给药30,60 d大鼠性周期紊乱率、动情间期天数高于正常组(P＜0.05);给药60 d大鼠性周期紊乱率、动情间期天数高于给药30 d(P＜0.05).停药30 d性周期紊乱率高于正常组(P＜0.05).垂体指数:给药60 d高于正常组(P＜0.05);停药30,60 d低于给药60 d(P＜0.05).组织形态学检测,给药60 d,下丘脑神经元减少,有红色神经元、鬼影细胞、染色质边集;垂体细胞减少,排列不规整,血窦扩张,嗜酸性细胞适应性增生.停药30 d,下丘脑神经元增加,鬼影细胞、染色质边极减少;垂体细胞增加,血窦扩张减轻,嗜酸性细胞增生减少.停药60 d,下丘脑和垂体的上述病理改变进一步恢复.结论:灌胃60 d大黄总蒽醌对雌性大鼠性激素水平、性周期和下丘脑、垂体组织结构均有毒性,但这种损害是可逆的,停药60 d基本恢复.
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四逆散对抑郁模型大鼠HPA轴、海马BDNF及其受体TrKB的影响
目的:探讨四逆散的高、低剂量组对抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)、海马脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体型酪氨酸激酶B(TrKB)表达的影响.方法:SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、模型组、盐酸文拉法辛组(12.5 mg·kg-1)、四逆散高、低剂量组(10,5 g·kg-1).采用慢性轻度不可预见性刺激造模,同时ig给药21 d后分别取血、下丘脑和海马.采用放射免疫分析法检测大鼠血浆皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)及下丘脑中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的含量变化,采用免疫组化分析法检测海马BDNF及其TrKB阳性神经元面密度值的变化.结果:与正常组相比,模型组大鼠血浆中CORT,ACTH及下丘脑CRH的含量明显升高,海马中BDNF和TrKB的神经面密度值明显降低.与模型组相比,四逆散高、低剂量组可以显著降低抑郁症模型大鼠血浆CORT,ACTH、下丘脑CRH的含量;增加大鼠海马BDNF及其TrKB阳性神经元面密度值.结论:四逆散可明显改善抑郁模型大鼠的抑郁状态,其机制可能是通过HPA轴增加海马BDNF,TrKB的表达.
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加味保阴煎治疗功能性子宫出血62例
功能失调性子宫出血,简称"功血",是妇科常见病,多发于青春期和更年期妇女,是由下丘脑-垂体-卵巢-子宫轴功能失调所致,中医属"崩漏"范畴,也可见于"月经过多"、"经期延长"病证中.轻者阴道出血淋漓月余难净,重者势如注下,迅即造成失血性贫血,给妇女带来难以启齿的痛苦.笔者近年来采用自拟加味保阴煎,滋阴清热,益气摄血为主治疗功血62例,疗效满意,现报告如下:
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针刀疗法对第3腰椎横突综合征大鼠中枢CCK-8mRNA表达的影响
目的:通过观察第3腰椎横突综合征大鼠中枢不同部位八肽胆囊收缩素(CCK-8)mRNA阳性细胞表达的变化,探讨针刀疗法治疗第3腰椎横突综合征的中枢镇痛机制.方法:选用SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组和针刀组,后3组采用埋置明胶海绵的方法建立第3腰椎横突综合征的动物模型,电针组和针刀组分别给予电针左侧"肾俞"、"腰阳关"和针刀松解局部治疗.实验第28d进行取材,应用原位杂交方法检测各组动物下丘脑CCK-8 mRNA阳性细胞的表达.结果:造模后,大鼠脊髓背角、下丘脑和缰核CCK-8 mRNA的阳性细胞表达较正常增多,阳性强度增高,有显著性差异(P<0.01),电针组和针刀组中枢各部位CCK-8 mRNA阳性细胞表达较模型组减少,阳性强度降低,有显著性差异(P<0.05,P<0.01).结论:针刀疗法和电针可通过降低中枢CCK-8 mRNA的表达,达到中枢镇痛的目的.
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中医"肾应冬"调控机制与下丘脑G蛋白关系的研究
"肾应冬"是五脏应时学说的一个组成部分.本文通过对雄性SD大鼠生理及摘除松果体条件下下丘脑G蛋白各亚型冬夏两至含量变化的研究,探讨了"肾应冬"调控机制与细胞信号转导之间的相关性.实验结果显示:在生理条件下冬夏季节的变化对下丘脑Gs、Gi的含量没有明显的影响,而Gq和Go的含量冬夏则存在显著的差异,均表现为夏高冬低.摘除松果体后冬夏季节G蛋白的各种亚型空白组和模型组、模型组与模型组之间均无显著差异.从而说明松果腺参与调节冬夏季节的变化对机体细胞信号转导系统的影响,而"肾应冬"调控机制与细胞信号转导系统之间存在着某些相关性.
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针刺捻转补泻手法对SHR下丘脑RAS的影响及其中枢机制
目的:通过观察针刺捻转补泻手法对自发性高血压大鼠(SHR)下丘脑肾素-血管紧张素系统(RAS)调控轴各组分表达的影响,探讨其调控血压的中枢机制.方法:56只雄性SHR随机等分为模型组、针刺组、捻转补法组和捻转泻法组.14只Wistar大鼠作为空白组.各针刺组分别采用相应的手法干预太冲穴,空白组和模型组不做针刺处理.实验第14天采用HE染色法观察下丘脑组织病理学改变,采用ELISA法和RT-qPCR技术检测下丘脑RAS调控轴各组分的表达.结果:与模型组比较,捻转补法组和捻转泻法组均能明显降低SHR血压(P＜0.01),各针刺组RAS升压轴各组分表达量显著减少(P＜0.01),RAS降压轴各组分表达量显著升高(P＜0.01);且捻转泻法组降低血压和良性调控RAS效果较捻转补法组更明显(P＜0.05,P＜0.01).结论:针刺捻转补泻手法可通过良性调节SHR下丘脑RAS各组分表达,发挥其降压作用以及对下丘脑神经元的保护效应,这可能是捻转补泻手法降压的中枢机制之一.
关键词： 捻转补泻手法 原发性高血压 下丘脑 肾素-血管紧张素系统 中枢机制 -
阴虚型去卵巢大鼠下丘脑基因表达谱改变研究
目的:寻找与更年期综合征肾阴虚病变相关的下丘脑基因表达谱特征.方法:对雌性大鼠实施去卵巢手术以模拟更年期肾虚病变,在去卵巢手术基础上灌服辛热、温燥、利水中药以模拟肾阴虚病变.提取大鼠下丘脑总RNA,以差异表达2倍作为显著性意义标准,分析差异表达基因.结果:与正常大鼠相比,去卵巢组大鼠下丘脑基因上调1 261个,下调126个；与单纯去卵巢组大鼠相比,阴虚大鼠基因上调1 081个,下调57个；阴虚大鼠与正常大鼠相比,基因上调1 688个,下调115个.结论:发现一些与更年期综合征肾阴虚病变联系性较强的基因表达特征,提供了进一步研究的线索.
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中药复方益糖康对糖尿病大鼠下丘脑和骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶的表达及活性影响
目的:通过观察中药复方益糖康对糖尿病大鼠下丘脑和骨骼肌组织腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的影响,探讨其改善糖尿病糖脂代谢异常的作用.方法:将Wistar大鼠分为正常组,模型组和治疗组.用Western blot法检测下丘脑及骨骼肌组织AMPK α及AMPKα蛋白的表达,RT-PCR法测AMPKα mRNA表达.结果:与正常组比较,模型组下丘脑、骨骼肌组织AMPK表达水平及其活性降低(P＜0.05),血糖和血脂水平增高(P＜0.05);与模型组比较,治疗组骨骼肌与下丘脑内AMPK表达水平及活性增高(P＜0.05),并且血糖、血脂水平降低(P＜0.05).结论:中药复方益糖康可以促进糖尿病大鼠骨骼肌组织AMPK表达水平增高,并影响下丘脑AMPK活性,这可能是益糖康改善糖尿病糖脂代谢异常的部分机制.
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电针对胰岛素抵抗模型大鼠下丘脑IRS2和Akt2mRNA表达的影响
目的:观察“双固一通”电针法对胰岛素抵抗模型大鼠下丘脑IRS2和Akt2 mRNA表达影响.方法:高脂饮食诱导胰岛素抵抗模型大鼠,以“双固一通”电针法进行治疗.检测各组大鼠血清离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平;下丘脑IRS2含量和Akt2 mRNA表达.结果:①预防组和“双固一通”电针组大鼠FFA、TG、TC降低(P＜0.05,P＜0.01);②预防组和“双固一通”电针组大鼠下丘脑中IRS2含量增加(P＜0.05);③预防组和“双固一通”电针组大鼠下丘脑中Akt2 mRNA表达提高(P＜0.01).结论:“双固一通”电针法调节胰岛素抵抗模型大鼠的血FFA、TG、TC水平,与提高模型大鼠下丘脑中IRS2含量和Akt2 mRNA表达具有相关性.
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百合知母汤对肾阴虚型围绝经期综合征大鼠治疗作用研究
目的:观察百合知母汤对肾阴虚型围绝经期综合征大鼠子宫系数、血清性激素水平及下丘脑ERmRNA的表达情况的影响.方法:选用双侧卵巢切除的雌性3月龄SD大鼠,随机分为12组:模型组,雌激素组,百合知母汤水煎液组,黄酮高、低剂量组,皂苷高、低剂量组,黄酮皂苷配比Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组及空白对照组.采用甲状腺素复制肾阴虚模型,同时各组给予相应药液.4周后测定大鼠子宫系数,血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)、促卵泡生成激素(FSH)及促黄体生成激素(LH)的含量,下丘脑ER mRNA的表达情况.结果:与空白对照组比较:模型组大鼠的子宫系数明显降低,E2、P水平明显降低,FSH、LH升高,下丘脑内ER mRNA表达减少(P＜0.01).与模型组比较,各给药组大鼠的子宫系数明显升高,E2、P水平升高、FSH、LH水平则有所下降,下丘脑ER mRNA表达升高,且水煎液组、黄酮皂苷配比Ⅲ和Ⅳ组作用更为显著(P＜0.05,P＜0.01).结论:百合知母汤能明显改善围绝经期综合征大鼠的肾阴虚症状,且黄酮和皂苷有效部位合用效果好.
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天然药物淫羊藿和巴戟天的免疫调节作用研究进展
淫羊藿是小檗科植物Epimedium brevicornum Maxim的干燥茎和叶,其主要成分为黄酮(淫羊藿苷)、淫羊藿多糖等,具有温阳补肾、助阳益精和祛风除湿等功能[1].巴戟天属茜草科植物Morinda Officinalis How的干燥根,主要成分为巴戟天多糖、树脂,并含丰富的微量元素和维生素C等,同样具有温阳补肾和祛风湿的功能[2].中医的"肾"与"阳"与现代医学的免疫功能密切相关,沈氏认为温阳补肾能够通过调节下丘脑-垂体-肾上腺皮质和免疫网络而发挥多环节的调节作用,而且研究发现补肾药物是先作用于神经内分泌系统,而后才影响免疫系统[3].本文就淫羊藿和巴戟天的免疫调节作用研究进展作一综述.
