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杜仲炮制的研究进展
杜仲是杜仲科植物杜仲Eucommia ulmoides Oliv.的干燥树皮,具有补肝肾、强筋骨、安胎﹑降血压之功效.产于湖北、四川、贵州、云南等省[1].历代应用均强调炮制后入药,自刘宋至清末约1 400年历史,至少有62部医药文献有杜仲炮制资料的记载,涉及炮制方法17种,使用辅料14种[1].
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杜仲及常见伪品的鉴别
杜仲为常用中药,性温,味甘.有补肝肾,强筋骨,安胎之功.曾发现有多种植物的树皮经加工后伪充杜仲出售,应注意鉴别.
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杜仲及常见伪品的鉴别
杜仲具有补肝肾、强筋骨、安胎的功能,主要用于腰脊酸痛,足膝痿弱,小便余沥,阴下湿痒,胎漏欲堕等症,为常用中药[1].目前商品较为混乱,常有伪品出现.现将杜仲及其常见伪品的鉴别要点叙述如下,以供大家参考.
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天麻及杜仲的真伪鉴别
近年来,由于中药天麻、杜仲资源紧缺,价格上扬,常有不法分子以假乱真、以次充好,牟取暴利,药品质量低劣影响医疗效果.现将天麻及杜仲混伪品的鉴别介绍如下,供同道参考.
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杜仲不同发育时期未成熟种胚离体培养研究
目的 了解激素对杜仲不同发育程度完整未成熟种胚的影响.方法 以杜仲三个不同发育时期的完整未成熟种胚为实验材料(分别标记为Ⅰ#:心形胚早期,胚长约0.5 mm;Ⅱ#:鱼雷形胚,胚长约1～ 2mm;Ⅲ#:胚长约5mm,约为成熟胚的1/2),以MS为基本培养基,添加不同激素及组合(包括2,4-D、NAA、6-BA、TDZ、GA3)进行离体培养,观察不同激素对完整幼胚的影响.结果 实验结果显示,Ⅰ#材料接种后15天几乎全部死亡,显示简单的无机盐培养基不能满足发育早期种胚离体培养的营养需求;Ⅲ#材料接种后生长迅速,在附加细胞分裂素的培养基中多数萌发形成了幼苗;Ⅱ#材料在培养30天及60天进行结果统计显示:①2,4-D促进疏松愈伤组织形成,抑制不定芽形成;②细胞分裂素类,包括6-BA、TDZ,均能诱导形成不定芽,培养60天诱导率显著增加;在6-BA 2mg/L中不定芽发生率达91％;③在附加0.5mg/L 2,4-D的培养基中,在培养约90天后40个外植体中有3个形成体细胞胚.结论 Ⅱ#鱼雷形胚对激素的反应与杜仲成熟胚或幼苗离体培养结果相近,该发育状态的幼胚可能适合于诱导胚状体.
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杜仲SSR标记的遗传多态性及其亲缘关系分析
目的 利用微卫星分子标记技术对杜仲居群遗传多样性及亲缘关系进行研究.方法 对设计的29对EST-SSR引物以及20对已发表的杜仲SSR引物进行筛选,获得的高多态性引物对不同产区杜仲的125个个体进行遗传多样性及亲缘关系分析.结果 筛选得到的18对引物共扩增出74条清晰带.Neig基因多样性指数H=0.3750,Shannon's多态性信息指数I =0.5512.基因分化系数Gst=0.1149.湖南石门与桑植之间有一定的亲缘关系,重庆秀山与陕西略阳之间遗传距离大.结论 杜仲居群内具有丰富的遗传多样性,而不同群体间的遗传多样性低,居群间存在较大基因流.
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杜仲炮制历史沿革的分析与探讨
通过对杜仲加工炮制历史沿革的分析与探讨,认为杜仲入药必须加工炮制.去粗皮、取里有味者,是对杜仲的质量要求;细丝、小方块、如豆大是杜仲饮片的佳规格;断丝则是杜仲炮制的佳标准;选取多种辅料炮制杜仲是扩大杜仲主治范围的有效途径.
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杜仲采集加工与炮制研究
对杜仲采集、加工和炮制方法作概要介绍,并简要介绍了现代研究进展情况,供研究使用时参考.
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杜仲药材高效液相色谱指纹图谱研究
目的 应用高效液相色谱(HPLC)法对不同产地杜仲药材进行指纹图谱研究.方法 XDB-C18色谱柱(150 mm ×4.6 mm,5μm),乙腈-1%醋酸溶液二元梯度洗脱,体积流量1 mL·min-1,检测波长277 nm.结果 根据选择的色谱条件制订了不同产地杜仲药材的指纹图谱.结论 该方法 操作简便,稳定,重复性好,可为更好地控制杜仲药材的内在质量提供科学依据.
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四川产杜仲药材高效液相色谱指纹图谱的建立
目的 比较四川省4个主产区杜仲药材高效液相色谱(HPLC)共有模式,建立四川产杜仲药材HPLC指纹图谱.方法 采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对四川4个主产区杜仲药材进行HPLC指纹图谱分析,建立各产区对照指纹图谱及共有峰,在此基础上建立四川产杜仲的指纹图谱.结果 四川达州、都江堰、广元和通江等4个产区各自的10批杜仲HPLC指纹图谱共有峰数目分别为17,24,21,14,其整体相似度范围分别为0.818～ 0.985,0.913 ～0.971,0.945 ～ 0.989,0.457～0.956.比较4个产区杜仲指纹图谱的共有模式,确定11个共有峰,各产区之间HPLC指纹图谱整体相识度在0.585～0.950.结论 四川省4个产区间杜仲药材质量基本一致,通过本方法评价四川地区杜仲药材质量更加科学合理.
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贵州产杜仲高效液相色谱指纹图谱的建立与分析
目的 建立杜仲药材高效液相色谱(HPLC)的指纹图谱,评价不同产地杜仲中化学成分的差异,为制定杜仲的质量控制标准提供参考.方法 色谱柱为Phenomenex Synergi Hydro-RP C18(250 mm×4.6 mm,4μm),流动相为甲醇-0.05％磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长235 nm,柱温25℃.利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件进行相似度计算,并应用聚类分析与主成分分析对指纹图谱进行化学模式识别法研究.结果 建立了杜仲药材的指纹图谱,确定了19个共有峰,并用对照品指认了3个峰.相似度评价表明,20批不同产地的杜仲药材相似度存在差异;聚类分析将20个样品分成A与B两类.结论 杜仲药材指纹图谱的建立为杜仲的质量控制评价体系提供了科学依据.
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杜仲总多糖抗肿瘤作用的实验研究
目的 研究杜仲总多糖的抗肿瘤的作用.方法 以环磷酰胺为阳性对照药,考察杜仲总多糖对肿瘤S-180的抗肿瘤活性及其对环磷酰胺骨髓抑制的拮抗作用.结果 从500 g的杜仲中药饮片中共提取出多糖10.9 g,其纯度为55.2%.杜仲总多糖能够抑制S-180肉瘤的生长,并能够提高胸腺指数和脾指数,增加骨髓有核细胞计数及外周血白细胞计数,拮抗环磷酰胺引起的外周血白细胞和骨髓有核细胞减少.结论 杜仲总多糖具有一定的抗肿瘤活性,能够提高机体的免疫力并拮抗环磷酰胺引起的骨髓抑制.
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不同产地杜仲药材水提液高效液相色谱指纹图谱及其共有模式
目的：采用高效液相色谱法建立不同产地杜仲药材水提液指纹图谱。方法采用 SinoChrom ODS￣BP (250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈￣0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL.min－1,检测波长为230 nm,柱温25℃。结果确定14个共有峰,10批不同产地杜仲药材水提液的色谱指纹图谱整体相似度在0.592~0.986,并得出对照指纹图谱。结论该指纹图谱方法简便、重复性好,为有效地控制杜仲药材的内在质量提供科学依据。
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杜仲HPLC指纹谱图研究
目的：：用松脂醇二葡萄糖苷为参照物,建立不同生长年限及不同品种类型的杜仲HPLC指纹图谱,以此为建立郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲HPLC指纹图谱的企业质量标准提供依据。方法：采用ZORBAX Eclipse XDB-C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水,梯度洗脱,检测波长为277 nm,流速为1.0 ml·min-1,柱温为25℃,进样量为5μl。结果：建立了以松脂醇二葡萄糖苷为参照物的杜仲HPLC指纹图谱,确定了14个共有峰,10批样品指纹图谱整体相似度均在0.939以上。结论：该方法简便,重复性好,HPLC指纹图谱可作为郴州大诚中药饮片有限责任公司GAP基地杜仲药材的企业质量标准。
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杜仲主要化学成分分类总结
本文综述了近年来国内外对中药杜仲主要化学成分的分类总结。为进一步研究杜仲药材的有效成分，控制其质量提供参考依据。
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恩施产杜仲药材HPLC指纹图谱的研究
目的：：建立恩施产杜仲药材水提液HPLC指纹图谱的分析方法。方法：10批恩施产杜仲药材水提,采用WondaSil C18(250 mm ×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸水溶液二元线性梯度洗脱,检测波长230 nm,流速1.0 ml·min-1,柱温25℃,进样量10μl,进行 HPLC指纹图谱分析。结果：确定了12个共有峰,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》计算10批杜仲药材水提液的指纹图谱整体相似度在0.596~0.997,并得出对照指纹图谱。结论：针对恩施产杜仲药材建立的HPLC指纹图谱分析方法,操作简便,稳定性高,重复性好,可有效地控制恩施产杜仲药材的内在质量。
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斜率校正"一测多评法"同时测定杜仲中京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷和松脂素二葡萄糖苷的含量
目的:建立斜率校正"一测多评法"同时测定杜仲中京尼平苷酸(GPA)、绿原酸(CHA)、京尼平苷(GP)、松脂素二葡萄糖苷(PDG)含量的方法.方法:以HPLC法含量测定为基础,CHA为对照,计算GPA、GP、PDG的斜率相对校正因子,并比较斜率校正"一测多评法"与外标法两种结果相关性,从而验证斜率校正"一测多评法"的准确性,终建立测定杜仲多种活性成分的斜率校正"一测多评法".结果:在一定的线性范围内,GPA、GP、PDG的斜率相对校正因子分别为:0.762 8,0.478 6,0.711 2,重复性良好.斜率校正"一测多评法"计算的含量值与外标法实测值相关性较好,56批杜仲样本中GPA、GP、PDG含量结果的相关系数均大于0.99.结论:建立的斜率校正"一测多评法"准确性高,可用于杜仲中GPA、CHA、GP、PDG活性成分的含量测定.
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超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定杜仲药材中5个指标成分
目的:建立超高效液相色谱串联质谱法同时测定杜仲药材中的京尼平苷酸、原儿茶酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷.方法:采用Waters BEH C18 (2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1％甲酸乙睛溶液-0.1％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI),以多反应离子监测(MRM)检测.结果:京尼平苷酸、原儿茶酸、绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇单葡萄糖苷分别在0.842～68.182,0.040～9.838,0.042～10.101,0.499～121.212,0.378～30.606μg·ml-1范围线性关系良好,平均回收率为93.15％～103.68％,RSD＜3％.精密度、重复性和稳定性良好.结论:本方法能简便有效的定量研究杜仲多种成分,为杜仲药材质量控制提供了新的方法.
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杜仲对糖尿病大鼠阴茎组织超微结构和超氧化物歧化酶活性的影响
目的:研究杜仲改善糖尿病(DM)大鼠阴茎组织氧化损伤的效应,为开发新型治疗勃起功能障碍(ED)的药物提供实验依据.方法:随机选取的雄性DM大鼠20只和正常大鼠10只分为3组:A组(n=10,DM大鼠赋形剂灌胃组),B组(n=10,DM大鼠杜仲灌胃组)和C组(n=10,正常大鼠赋形剂灌胃对照组);灌胃4周后用透射电镜技术检查阴茎组织超微结构特征,并测定血清及阴茎组织匀浆液中超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:SOD活性:B组显著高于A组(P＜0.01),C组显著高于A组(P＜0.01),B组与C组比较差异无显著性.透射电镜观察:与C组大鼠比较,A组大鼠阴茎组织有髓神经纤维排布失序,部分变性、板层分离形成透明空泡或网络状,小血管、内皮细胞、平滑肌细胞和细胞器出现不同程度的损伤;B组大鼠阴茎组织有髓神经纤维髓鞘排布有序,内皮细胞、平滑肌细胞和细胞器未见明显异常.结论:杜仲可通过提高SOD活性改善DM大鼠阴茎组织氧化损伤.
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盐炙杜仲对老年性骨质疏松模型大鼠骨组织BMP-2的影响
目的 通过建立D-半乳糖致老年性骨质疏松(SOP)大鼠模型,探讨盐炙杜仲治疗SOP过程中对骨组织BMP-2的影响.方法 将60只雄性SD大鼠随机分为六组,除了空白对照组外,其他五组均给予腹腔注射D-半乳糖;空白对照组给予腹腔注射同等剂量的生理盐水.8周后造模成功,空白对照组、模型对照组均给予0.5％CMC-Na液灌胃;阳性对照组给予依替膦酸钠灌胃;杜仲低剂量组给予盐炙杜仲低剂量灌胃;杜仲中剂量组给予盐炙杜仲中剂量灌胃;杜仲高剂量组给予盐炙杜仲高剂量灌胃.各组连续给药4周后进行骨组织BMP-2免疫组化检测和骨密度(BMD)检测.结果 与模型对照组比较,杜仲高剂量组BMP-2表达呈显著增强(P＜0.05),与阳性对照组比较无显著差异(P＞0.05).结论 实验证明高浓度盐炙杜仲能够提高骨组织BMP-2活性升高BMD,促进成骨细胞代谢,有利于骨质矿化,从而治疗老年性骨质疏松症.
