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食管鳞状上皮细胞癌及癌旁组织中HPV11 L1基因克隆及序列比较
[马群风,江 红,刘 锟,冯永强,周勇安,王小平,李谨瑜. 细胞 与分子免疫学杂志,2001;17(3):251-254] 目的 克隆食管癌组织和癌旁组织中HPV11型主要壳蛋白L1基因,并比 较两个序列间的同源性. 方法 以食管癌组织和癌旁组织纯化的总DNA为模 板,根据HPV11型L1基因的保守区分段设计引物. 分两段扩增HPV L1基因,克隆入质粒载体 中,pGEM-3Zf(-)以双脱氧法双向测定目的片段的序列,并拼接出该片段的全序列,比较两 个序列间的同源性,以及与已知基因序列的差异性. 结果 从1例食管癌患 者食管癌组织和癌旁组织中,分别克隆到1株HPV11型L1的编码序列M1和M2,两序列间的同源 性极高,仅在个别位点存在差异. 与GenBank中登录的HPV序列NC001525.1(HPV-11), M1411 9.1(HPV-11)和AF217526.1(HPV-11)相比较大部分相同. 结论 成功地构 建了HPV11型L1基因上游片段pGEM-3Zf(-)和下游片段pGEM-3Zf(-)的重组克隆,为深入研 究HPV的感染与食管癌发病机制的关系奠定了基础.(井晓梅)