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长链非编码RNA linc-01135对静态牵张力作用下人炎症牙周膜干细胞成骨分化的影响
目的: 研究长链非编码RNA linc-01135 对12％静态牵张力(SMS) 作用下人炎症牙周膜干细胞(P-PDLSCs) 成骨分化的影响.方法: 分离培养人正常牙周膜干细胞(H-PDLSCs) 和P-PDLSCs,RT-PCR 检测linc-01135 的表达水平以及慢病毒上调及下调linc-01135 表达后进行12％SMS 加载的成骨基因变化,成骨诱导21 d 茜素红染色检测成骨能力变化.结果: P-PDLSCs中linc-01135 表达降低,利用慢病毒上调linc-01135 的表达后进行12％ SMS 加载,RUNX2,ALP,OPG 的表达明显上升(P＜0. 001);下调linc-01135 的表达后,RUNX2、ALP、OPG 的表达明显下降(P＜ 0. 001) .结论: inc-01135 可以促进人炎症牙周膜干细胞在12％SMS 作用下的成骨分化.
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牙周膜干细胞中乙酰基转移酶MORF调控成骨的研究
目的：：比较正常与炎症来源牙周膜干细胞( H-PDLSCs与P-PDLSCs)中乙酰基转移酶MORF表达水平的差异及其对PDLSCs分化的调控。方法：有限稀释法培养H-PDLSCs与P-PDLSCs, LPS、 TNF-α、IL-β及三者混合物体外模拟炎症微环境诱导H-PDLSCs ( IP-PDLSCs )；基因与蛋白检测方法对比2种来源 PDLSCs 中 MORF 的表达水平；蛋白检测方法检测 IP-PDLSCs中MORF的表达水平；基因、蛋白检测与茜素红染色方法对比H-PDLSCs及下调MORF基因后的PDLSCs成骨基因表达的差异。结果：与 H-PDLSCs 相比,P-PDLSCs 中 MORF 的表达显著下降(P <0.05)；IP-PDLSCs 中 MORF 的表达下降；MORF基因被下调后,PDLSCs成骨能力下降(P<0.05)。结论：牙周炎及炎症微环境会导致PDLSCs中MORF表达的下降,从而使其成骨分化受到抑制。
关键词： 牙周膜干细胞(PDLSCs) 牙周炎 乙酰基转移酶 成骨分化 -
釉原蛋白对牙周膜干细胞迁移、黏附及增殖的影响
目的：检测釉原蛋白（amelogenin，AML）对牙周膜干细胞（PDLSCs）迁移、黏附和增殖的影响。方法：用0．25、50和100μg／ml 的 AML 培养人 PDLSCs。用划痕实验和 transwell 法检测 AML 对 PDLSCs 迁移的影响。用黏附实验检测 AML 对PDLSCs 黏附的影响。用 MTT 法和计数法检测 AML 对 PDLSCs 增殖的影响。结果：AML 可促进 PDLSCs 的迁移，而且呈剂量效应关系（P ＜0．05）。AML 对 PDLSCs 迁移和黏附有促进作用（P ＜0．05），且随培养时间延长而增加。AML 可促进 PDLSCs的增殖，且呈剂量效应关系。结论：AML 可促进 PDLSCs 的迁移、黏附和增殖。
关键词： 牙周膜干细胞(PDLSCs) 釉原蛋白 迁移 黏附 增殖 -
miR-20a 对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响
目的：研究 miR-20a 对人炎症牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法：分离培养人牙周膜干细胞后用 qRT-PCR检测 miR-20a 的表达，并且在瞬时转染 miR-20a mimics 和 inhibitor 后成骨诱导，用茜素红染色，Western Blot 和 PCR 的方法检测成骨能力的改变。结果：人炎症牙周膜干细胞中 miR-20a 表达降低，转染 mimics 后成骨能力升高，转染 inhibitor 后成骨能力降低。结论：miR-20a 可以促进人炎症牙周膜干细胞成骨分化。
关键词： miR-20a 牙周膜干细胞(PDLSCs) 成骨分化 -
TNF-α调控牙周膜干细胞骨向分化中LncRNA的差异表达
目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对人牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨作用的影响,以及其中长链非编码(LncRNA)的差异表达情况.方法:分离培养PDLSCs,对照组细胞用成骨诱导液培养,实验组细胞用成骨诱导液+10 ng/ml TNF-α培养.通过茜素红染色、RT-PCR和Western bolt检测两组细胞骨向分化,用高通量测序技术探究LncRNA的差异表达情况.结果:在TNF-α作用下,PDLSCs的骨向分化能力减弱;测序结果发现差异表达显著的长链非编码RNA上调的有57条,下调的有26条.结论:LncRNA可能与PDLSCs骨向分化的调控密切相关.
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釉基质蛋白诱导不同生理性根吸收期乳牙牙周膜干细胞向成牙骨质细胞方向分化的研究
目的:检测釉基质蛋白(EMD)诱导乳牙生理性根吸收不同时期的牙周膜干细胞(PDLSCs)向成牙骨质细胞方向分化的能力及矿化相关蛋白表达水平的变化.方法:选取根吸收早期(E组)、中晚期(M组)的乳牙和恒前磨牙(P组)作为组织来源,并分离培养其PDLSCs;然后再将各组PDLSCs分为2个亚组:实验组用含100 mg/mL EMD的DMEM诱导培养,对照组用DMEM培养;并于诱导7 d后检测各组细胞中CAP、CEMP-1及BSP、OCN、ALP、COL-1表达水平的差异.结果:各组细胞经EMD诱导培养7 d后,实时定量PCR检测结果显示,与对照组相比,各实验组PDLSCs中BSP、ALP、COL-1的表达水平均显著上调(P<0.05),升高幅度为P组>E组>M组;P、E、M各实验组PDLSCs中CAP、CEMP-1 mRNA的表达水平为P组>E、M组(P<0.05),E组与M组间无统计学差异(P>0.05);BSP、OCN的表达水平均为P组>E组>M组(P<0.05);ALP的表达水平为P组>E、M组(P<0.05),E组和M组间无统计学差异(P>0.05);COL-1的表达水平在各实验组间相比无统计学差异(P>0.05).免疫组化染色结果显示,P、E、M各实验组PDLSCs中BSP、OCN、ALP、COL-1均呈阳性表达,对照组则显示染色不显著.结论:EMD可诱导乳牙PDLSCs向成牙骨质细胞方向分化.随着乳牙生理性根吸收的进行,乳牙PDLSCs向成牙骨质细胞方向分化的能力及矿化相关蛋白的表达水平均逐渐降低.
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牙周膜干细胞聚合体:一种潜在骨组织再生方法
目的:探索牙周膜干细胞的成骨能力.方法:体外培养牙周膜干细胞(PDLSCs),经体外鉴定、扩增构建PDLSCs细胞膜片(CS)和细胞聚合体(CP),通过大体观察、HE和免疫组化染色、扫描电镜进行形态学检测,实时定量PCR检测CS和CP成骨相关基因的表达水平,并观察裸鼠体内成骨能力.结果:成功分离、培养并鉴定PDLSCs后,构建PDLSCs CS和CP.组织学观察发现CP内细胞外基质丰富;免疫组化染色发现这些细胞外基质中骨涎蛋白(BSP)、碱性磷酸酶(ALP)和Ⅰ型胶原表达呈阳性;CP上BSP、ALP和Runx2基因表达水平明显高于CS;体内实验发现CP组大量骨样组织形成,而CS组可见纤维样骨组织形成.结论:PDLSCs细胞聚合体技术为修复牙槽骨缺损提供了一种新的方法.
关键词： 牙周膜干细胞(PDLSCs) 细胞聚合体(CP) 骨再生 组织工程
