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chelex100法文献资料
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快速提取细菌DNA方法的研究
目的:研究快速、有效可以应用于压电基因传感器对病原微生物的快速检测的DNA的提取方法.方法:采用沸水浴法,酚、氯仿法,chelex100法和试剂盒法提取金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC 27853和大肠杆菌ATCC 25922的DNA对产物进行纯度和产量测定,并对16SrDNA区域利用通用引物进行扩增.初步应用自行研制的压电基因传感器检测金黄色葡萄球菌ATCC25923的PCR产物.结果:除沸水浴法,其他3种方法均能抽提出3种细菌的DNA与100法和酚、氯仿法抽提产物的纯度和产量差异无显著性(P＞0.05),但chelex100法操作更为简单、成本低;试剂盒法抽提出的产物纯度和产量明显高于酚、氯仿法、chelex100法P＜0.05),但成本高,操作繁琐.结论:chelex100法操作简便、省时、成本低,适宜用于压电传感器样本的预处理.
关键词： 细菌DNA chelex100法 压电基因传感器 -
用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究
为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率,本文用Chelex100法及Chelex100法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件6份血斑及6份混合斑中精子DNA,并用PE公司Profiler Plus系统复合扩增,ABI 310型基因分型仪检测.结果表明,常规采用Chelex100法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时,应对Chelex100法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取,可极大提高DNA检验成功率.采用本文建立的Chelex100法联合有机溶剂提取法,提高了PCR扩增阳性率,对实际检案很有帮助;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验,否则对于重要检材应进行梯度扩增.
关键词： DNA提取 chelex100法 有机法 PCR STR
