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特异结合肽文献资料
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利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子特异结合肽及其抗肝癌作用的研究
目的 利用噬菌体随机肽库筛选人肝再生增强因子(human augmenter of liver regeneration,hALR)特异结合肽并研究其抗肝癌作用.方法 以hALR为靶分子,利用Ph.D.TM噬菌体肽展示系统筛选出与hALR特异性结合的单克隆噬菌体,ELISA法鉴定筛选出的单克隆噬菌体与hALR的结合性,对特异性结合噬菌体DNA中插入片段进行PCR扩增、测序及短肽合成,MTS法检测特异结合肽对人HepG2肝癌细胞增殖的影响,观察特异结合肽对裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长的影响.结果 经过3轮生物淘筛,特异性结合噬菌体得到富集;筛选到的单克隆噬菌体与hALR结合具有特异性(与对照组比较P＜0.05);特异结合肽在体外能抑制人HepG2肝癌细胞增殖(24 h抑制率为46.2％ vs 6.5％,P＜0.01;48 h抑制率为23.6％ vs 5.9％,P＜0.05),在体内能抑制裸鼠人HepG2肝癌移植瘤生长[(1.250±0.512) cm3 vs (4.590±0.398) cm3,P＜0.01;(1.100±0.453)gvs (3.794 ±0.299)g,P＜0.01];该特异结合肽免疫小鼠后机体内无相应抗体检出,且对裸鼠的重要脏器组织结构及功能无明显损害.结论 利用噬菌体肽库筛选到hALR特异结合肽,该短肽通过阻断hALR促肝癌细胞增殖作用,能抑制人HepG2肝癌细胞在体内外增殖,达到抗肝癌的作用,同时产生较低的免疫原性及毒性损害.
