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人参皂苷Rg1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶表达的影响
目的:探讨人参皂苷Rg1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶(NEP)表达的影响.方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50 mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1(5、10、20 μmol/L)对SK-N-SH细胞存活率的影响,应用RT-PCR观察细胞中NEP表达的变化.结果:50 mg/L的LPS能使SK-N-SH细胞存活率降低,细胞内NEP的表达下降.人参皂苷Rg1能提高LPS处理的SK-N-SH细胞的存活率,使NEP的表达增高.结论:人参皂苷Rg1对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用,并可对抗LPS对细胞内NEP表达的降低.
关键词: 人参皂苷Rg1 脂多糖 SK-N-SH神经母细胞瘤细胞 脑啡肽酶 -
反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达
目的 构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率.方法 使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP).将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率.结果 成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL.在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达.在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到3O%以上.结论 SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率.