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人乳腺癌组织和细胞中TNFR1表达及其对MCF-7细胞增殖、凋亡的影响
目的 观察人乳腺癌组织和细胞中肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)的表达,以及抑制人乳腺癌细胞MCF-7中TNFR1表达对细胞增殖及凋亡的影响,并探讨相关机制.方法 取新鲜乳腺癌组织及癌旁组织各30例、人乳腺癌细胞株(MCF-7、MDA-MB-231、T47D)和人正常乳腺细胞,采用Real-time PCR法检测组织和细胞中的TNFR1 mRNA;将MCF-7细胞分为3组,A组不转染,B组转染阴性对照质粒,C组转染siRNA-TNFR1质粒,转染72 h后分别采用MTT法及流式细胞仪观察细胞增殖及凋亡,Western blot法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶8(Caspase-8)及核转录因子κB(NF-κB).结果 人乳腺癌组织和癌旁组织中TNFR1 mRNA相对表达量分别为1.41±0.08和0.38±0.05,癌组织与癌旁组织相比P<0.05;人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231、T47D中TNFR1 mRNA相对表达量分别为2.48±0.06、1.51±0.02、1.66±0.01,人正常乳腺细胞中TNFR1 mRNA相对表达量为1.00±0.09,人乳腺癌细胞与人正常乳腺细胞相比P均<0.05.A、B、C组细胞增殖能力(吸光度值)分别为0.96±0.09、0.93±0.11、0.62±0.05,细胞凋亡率分别为8.23%±3.50%、9.92%±3.19%、24.61%±2.46%,C组与A、B组比较P均<0.05.A、B、C组细胞中Caspase-8蛋白相对表达量分别为0.40±0.03、0.42±0.05、0.82±0.01,NF-κB蛋白表达相对量分别为0.79±0.03、0.76±0.04、0.32±0.06,C组与A、B组比较P均<0.05.结论 人乳腺癌组织和细胞中TNFR基因高表达,其可能通过激活NF-κB信号通路抑制Caspase-8的表达来促进乳腺癌细胞增殖、抑制细胞亡.
