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  • 产单核细胞李斯特菌减毒候选菌株分子生物学特性研究

    作者:殷月兰;焦新安;许海燕;焦红梅;潘志明;黄金林

    目的为了确定用于减毒的产单核细胞李斯特菌菌株,对初筛入选的血清型为1/2a菌株Lm1、Lm2、Lm3和Lm4的分子生物学特性进行了比较研究.方法利用PCR技术均成功地扩增出4株菌株的hly基因及actA和plcB基因片段.以LD50的测定试验作为菌株毒力指征,对4株菌株的毒力进行了测定.结果 4株菌株均为强毒菌株,其中菌株Lm4的毒力强,用BALB/c小鼠测得的LD50为1.47×104CFU.结论确定以Lm4作为候选菌株.

  • 李斯特菌溶血素诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制的研究

    作者:张琼;周子轩;胡鑫;李佳;刘运德;申艳娜

    目的 探讨李斯特菌溶血素LLO诱导THP-1细胞产生IL-1β的分子机制.方法 将THP-1细胞随机分为Syk处理组、未处理组及阴性对照组.Westem blot检测不同LM菌株感染巨噬细胞不同时相点Syk的磷酸化水平;免疫荧光法观察细胞内炎症复合体的关键蛋白组分ASC-speck的形成情况;实时荧光定量PCR法检测白细胞介素(IL)-1β表达.结果 WT和△hly∶∶hly菌株感染THP-1细胞0 min、15 min、30 min时,Syk磷酸化水平均较△hly明显升高;Syk处理组胞内ASC-speck阳性的细胞百分比明显低于未处理组(P<0.01),△hly菌株感染组的ASC-speck阳性细胞百分比也明显低于WT、hly菌株感染组(P <0.01);Syk处理组产生的IL-1β明显低于未处理组,并且△hly菌株感染THP-1细胞产生的IL-1β较WT和△hly∶∶hlyLM感染组明显降低(P<0.05).结论 Syk介导的信号通路参与调控LM感染过程中LLO介导的炎症复合体的形成.

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