首页 > 文献资料
-
二氢叶酸还原酶抑制剂在肿瘤治疗中的研究进展
二氢叶酸还原酶(dihydrofolate reductase,DHFR)是合成DNA的必需前体物胸腺嘧啶脱氧核苷(dTMP)的关键酶,在细胞增殖中起重要作用,是肿瘤治疗的重要靶点.抑制DHFR能够抑制dTMP的生物合成,进而抑制肿瘤细胞的生长或增殖,在临床上显示抗肿瘤的作用.近年来,该类药物的神经毒性极大限制了其临床广泛应用.基于此,本文对DHFR抑制剂药物在肿瘤治疗中的应用进行综述,并介绍药物相应的神经毒副作用(药物剂量限制性不良反应),探讨DHFR抑制剂药物在肿瘤治疗中的发展现状及为临床合理用药减少神经毒性反应提供指导.
关键词： 二氢叶酸还原酶(DHFR) 抑制剂 抗肿瘤 神经毒性 -
实时荧光定量PCR法检测人骨肉瘤耐MTX细胞系中RFC、DHFR、GST-π的mRNA表达
[目的]研究RFC(还原叶酸载体)、GST-π(谷胱甘肽S转移酶π)、DHFR(二氢叶酸还原酶) mRNA在人骨肉瘤U2-OS细胞系及人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中的表达差异,并探讨其在人骨肉瘤MTX化疗耐药中的意义.[方法]采用冲击并逐步增加诱导药物浓度诱导的方法,诱导人骨肉瘤细胞系U2-OS,并建立耐MTX细胞系(U2-OS/R1-R3),利用荧光定量PCR技术在mRNA 水平检测RFC、GST-π、DHFR在U2-OS及(U2-OS/R1-R3)中的表达.[结果]本试验成功建立三株人骨肉瘤耐药细胞系U2-OS/R1-R3中,荧光定量PCR结果显示MTX耐药与DHFRmRNA表达增加有关,与RFCmRNA的表达降低有关,与 GST-πmRNA的表达增加有关.[结论]本试验在基因水平探讨人骨肉瘤细胞MTX化疗耐药机制, DHFR、GST-π基因表达的增加及RFC基因表达的降低参与了人骨肉瘤细胞的MTX耐药,为临床探索骨肉瘤患者的MTX耐药机制提供了重要的依据,为临床筛选MTX化疗不敏感患者提供重要的依据.
-
DHFR基因RNA干扰质粒载体的构建及鉴定
目的:构建二氢叶酸还原酶(dyhidrofolate reductase,DHFR)基因RNA干扰质粒载体,为探讨抑制DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础.方法:设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA,筛选出佳siRNA沉默片段,退火后连接入pGPU6/GFP/Neo载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染SKOV3细胞株,并进行荧光摄像.结果:将退火后的双链寡核苷酸片段连接到pGPU6/GFP/Neo载体,测序结果正确.转染SKOV3细胞后,PCR鉴定干扰效果,G418筛选稳定细胞株.结论:成功构建针对DHFR基因的siRNA载体,找到了有效的干扰靶序列,转染SKOV3细胞后,DHFR基因的表达明显减弱.
关键词： RNA干扰 二氢叶酸还原酶(DHFR) pGPU6 -
DHFR基因rs11742688位点单核苷酸多态性与中国东北人群唇腭裂相关性研究
目的：探讨二氢叶酸还原酶（DHFR）基因 rs11742688位点单核苷酸多态性与中国东北部人群的非综合征唇腭裂（NSCL／P）的相关性。方法：采用聚合酶链－限制性片段长度多态性方法检测东北地区220例 NSCL／P 及其父母（其中包括138例完整的核心家系），180例正常儿童作为对照组，进行 HW 平衡检验，用 SPSS 统计学软件对病例组和对照组进行检验及计算 OR 值和95％可信区间。结果：病例对照研究结果显示，东北地区单纯唇裂和唇腭裂 rs11742688位点的 TT 基因型频率差异无显著性（χ2＝0．439，P ＞0．05）。结论：DHFR rs11742688位点 T 等位基因与东北人群的 NSCL／P 无相关性。
